אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:19 דק׳ • May 29th, 2025
התחל עם קטע רקמת מוח של עכבר המכיל את אזור העניין במאגר כדי לשמור על לחות במהלך ההדמיה.
הרקמה מתקבלת ממודל של עכבר מחלת אלצהיימר שהוזרק עם מתוקסי X04, צבע פלואורסצנטי.
מתוקסי X04 נקשר במיוחד למבני יריעות קפלים β בלוחות עמילואיד ושומר על הקרינה שלו לצורך הדמיה וניתוח.
באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי עם מסנן UV, עורר את המתוקסי X04 וללכוד את הקרינה הנפלטת כדי לדמיין פלאק עמילואיד עם תווית פלואורסצנטית כנגד הרקמה שמסביב.
מבלי להתאים את שלב המיקרוסקופ, צלם תמונות של אותו אזור במצב שדה בהיר כדי לפרט את מבנה הרקמה ומצב הקרינה כדי לדמיין את הפלאק.
יישר את תמונות השדה הבהיר והפלואורסצנטי באמצעות תוכנת עיבוד תמונה כדי למפות במדויק את הפלאק על המבנים האנטומיים.
תמונות אלה מספקות הדמיה מפורטת של פלאק עמילואיד בהקשר המבני שלהם כדי לחקור את הפתולוגיה של מחלת האלצהיימר.
בעזרת אטלס מוח של עכבר סטריאוטקסי, בחר קטעי מוח המכילים את אזור העניין, ומקם כל חלק בחומר קריופרוטקטנט בבאר של צלחת תרבית של 24 בארות. לאחר מכן, השתמש בפיפטה חד פעמית כדי להוסיף טיפה של PBS על שקופית מיקרוסקופ ולאחר מכן הנח את החלק על הטיפה.
בחן את הקטע תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי לזהות אזורים המכילים פלאק A-beta המסומן במתוקסי-X04. מבלי להזיז את שלב המיקרוסקופ, צלם תמונות של אזורי העניין בשדה בהיר כמו גם במצב פלואורסצנטי. כל תמונה חייב
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים