הדמיית פוליזומים שבודדו ממוח של עכבר באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי

התחל עם יריעת נציץ עם פוליזומים מודבקים שבודדו מרקמת מוח העכבר.

פוליזום הוא קומפלקס של ריבוזומים מרובים המחוברים לגדיל RNA.

בעזרת סרט, אבטח את גיליון הנציץ למחזיק הדגימה.

הנח את מחזיק הדגימה לשלב מיקרוסקופ הכוח האטומי.

מקם את השלוחה המותקנת מראש. יישר את הלייזר והגלאי כדי להבטיח זיהוי אותות מדויק במהלך ההדמיה.

התאם את תדירות התנודה של השלוחה כדי לייעל את זיהוי תכונות פני השטח תוך שמירה על שלמות הדגימה.

התחל בהדמיה על ידי תנודת קצה השלוחה מעל פני הדגימה.

כאשר הקצה נתקל במשטח מוגבה של הפוליזום, הלייזר מוסט.

סטיות אלה של הלייזר נלכדות על ידי הגלאי, שיוצר תמונה ברזולוציה ננומטרית.

השתמש בתוכנה מתאימה כדי לתקן אפקטים שרירותיים של הטיה וסחיפה, המאפשרים הדמיה של הפוליזום.

חבר את הדגימה המוכנה למחזיק המדגם של ה-AFM באמצעות סרט דו צדדי. לאחר מכן, הכנס את מחזיק המדגם ל-AFM tagבהתאם להוראות היצרן. לאחר הכיול, התקרב לדגימה עד שקצה השלוחה יתחבר למשטח.

בחר אזור סריקה של 2 על 2 מיקרון, רזולוציה של 512 על 512 פיקסלים לפחות. בחר מצב חיסור רקע חי ובחר סולם Z של 20 עד 25 ננומטר. לאחר מכן, התחל ברכישת תמונה. בדוק את התמונה, חפש נוכחות של עצמים עגולים המאופיינים בגובה שבין 10 ל -15 ננומטר בעת רכישת תמונות באוויר.

לאחר מכן, התאם את נקודת ההגדרה ופרמטרי המשוב עד להדמיית אובייקטים חדים. הרקע אמור להיראות שטוח יחסית בדגימות טובות עם עצמים בגובה של כ-2 עד 4 ננומטר. ברגע שהתמונה נראית טוב, רכוש מספר סריקות של 2 על 2 מיקרון באזורי דגימה שונים.