אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 5:37 דק׳ • May 29th, 2025
התחילו עם קטע של רקמת עור אפידרמיס המכילה סיבי עצב תוך-אפידרמיסיים או IENFs, קצות נוירונים תחושתיים דקים.
ה-IENFs עשירים במיטוכונדריה, ומספקים אנרגיה להעברת אותות נוירונים.
לרקמה יש IENFs, מיטוכונדריה וגרעיני אפידרמיס עם תווית פלואורסצנטית.
באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי הפוך, רכשו ברצף אותות פלואורסצנטיים בדידים באורכי גל מתאימים לגרעינים, IENFs ומיטוכונדריה.
הפעל סריקה חיה כדי ללכוד את אות ה-IENF, המקיף את שכבת האפידרמיס.
לאחר מכן, בצע סריקה רציפה עבור כל אות כדי למנוע דיבור צולב של אות פלואורסצנטי.
מהתמונה המשולבת, באמצעות התוכנה, חתוך ובודד את תאי האפידרמיס הכחולים.
לאחר מכן, עבדו את האזור שנחתך כדי לשפר את הרזולוציה של אותות IENF ירוקים ואותות מיטוכונדריאלים אדומים.
לאחר מכן, צור תמונת משטח תלת מימדית ליצירת מסכה עבור IENFs, ולאחר מכן שכב על תמונת פני השטח המיטוכונדריאלית כדי לבודד מיטוכונדריה ספציפית לעצב.
בפלט הסופי, IENFs מופיעים בציאן, בעוד שהמיטוכונדריה מופיעים כמבנים זעירים בצבע מג'נטה.
בחר את מטרת טבילת השמן פי 40 במיקרוסקופ קונפוקלי לסריקת לייזר הפוכה. בחר את הלייזרים והגלאים המתאימים כדי לדמות את הגרעינים, סיבי העצב והמיטוכונדריה. הזן את פרמטרי הסריקה הבאים ברזולוציית עוצמת 12 סיביות של תוכנת המיקרוסקופ. קצב סריקה של 600 הרץ עם ממוצע של שתי מסגרות וזום של 2.2. הגדר את תוכנת המי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים