הדמיית פוטו-אקטיבציה פלואורסצנטית של הובלת נוירופילמנטים באקסונים של עכברים עם מיאלין

התחל עם מכלול זלוף המונח על במת מיקרוסקופ הפוך.

מכלול הזלוף מכיל עצב היקפי מנותח המאובטח בין כיסוי למגלשת מיקרו אמת מים עם זלוף מי מלח רציף.

האקסונים המיאליניים של העצב מבטאים את הנוירופילמנטים הירוקים המתויגים בפלואורופור.

באמצעות תאורת שדה בהיר, התמקדו באקסונים המיאלינים.

עבור למצב קונפוקלי, פוטו-אקונומיקה עם עוצמת לייזר גבוהה, ולאחר מכן צלם תמונת ייחוס אוטו-פלואורסצנטית נמוכה באמצעות עוצמת לייזר נמוכה.

צייר קווים מקבילים לאורך האקסון כדי להגדיר את אורך חלון הפוטו-אקטיביות. השתמש באפשרות זו כמדריך ליצירת אזור הפעלה מלבני.

האירו את האזור הזה באורך גל ספציפי כדי להפעיל את הנוירופילמנטים הירוקים המתויגים בפלואורופור, ולגרום להם להאיר. רכוש את התמונה.

לאחר ההפעלה, צלם תמונות דולג זמן.

עם הזמן, הנוירופילמנטים הפלואורסצנטיים נעים לשני הכיוונים ומתפשטים לאזורי אגף סמוכים.

הופעת הקרינה באזורים המאגפים הסמוכים לאזור ההפעלה מאשרת הובלה נוירופילנטית.

אחוז בקצה הפרוקסימלי של העצב והניח אותו לאט על החלקת כיסוי. לאחר מכן, יישר אותו במתח עדין. הנח את מגלשת המיקרו אקוודוקט מעל העצב כשהמגלשה המחורצת כלפי מטה ומקם את כיוון הזרימה במקביל לעצב. הפוך את מכלול החלקת הכיסוי ואמת המים המיקרו והנח אותו בבית תא הזלוף כשהמגלשה מנוגדת לאטם החיצוני.

כדי לאבטח את תא הזילוף, הנח אותו בבית המתכת וסובב את טבעת הנעילה. לחץ