הדמיית תאים חיים של נדידת גרעין גליית מולר במהלך התחדשות רשתית דג הזברה

התחל עם צמח רשתית גבי משובץ אגרוז מדג זברה טרנסגני, המותקן בפלואורודיש עם מדיה.

הרשתית מציגה נזק לקולטני אור המושרה על ידי אור ומכילה תאי גליה של מולר או MGCs עם גרעינים המבטאים GFP.

מניחים את המנה בתא מיקרוסקופ מולטיפוטון.

באמצעות תאורת שדה בהיר, התמקד ברשתית.

עבור למצב פלואורסצנטי כדי לאתר את ה-MGC.

הגדר מחסנית z משכבת תאי הגנגליון או GCL לשכבה הגרעינית החיצונית או ONL.

התחל הדמיה חיה.

קולטני אור פגומים משחררים TNF-α, ומפעילים את ה-MGC.

גרעיני MGC נודדים באופן בסיסי בתוך השכבה הגרעינית הפנימית או INL כדי לשכפל את ה-DNA שלהם.

לאחר מכן, הגרעינים נודדים אפיקלית ל-ONL כדי לעבור מיטוזה, ומייצרים אבות עצביים.

לאחר המיטוזה, גרעיני ה-MGC והאבות הקדמונים נודדים בחזרה ל-INL.

האבות הקדמונים מתרבים, נודדים לאתר הפגיעה ומתמיינים לקולטני אור, מה שמאפשר התחדשות רשתית.

נתח את התמונות שצולמו כדי לדמיין הגירה גרעינית.

בתוכנה לרכישת תמונות, פתח חלונות A1 MP GUI, TiPad, A1 Compact GUI ו-ND Acquisition. עבור הדמיה מרובת פוטונים, ודא שאפשרות IR NDD נבחרה בחלון ממשק המשתמש הקומפקטי A1. לאחר מכן, בשדה ההגדרה, בחר IR-DM עבור המראה הדיכרואית הראשונה ובדוק שמסנן מעבר הפס מוגדר ל-525 עד 50 כדי להשיג פלואורסצנטיות GFP.

לאחר מכן, הפעל את לייזר ה-IR בחלון ממשק המשתמש הגרפי A1 MP. ייקח כמה דקות עד שהלייזר יהיה מוכן. לאחר מכ