ספקטרומטריית פלזמה-מסה בשילוב אינדוקטיבי של אבלציה בלייזר להדמיית מתכות ברקמת מוח של עכבר

הנח דגימת רקמת מוח של עכבר ותקנים בתא אבלציה בלייזר.

התקנים מכילים ריכוזים ידועים של מתכות המוחדרות להומוגנטים ברקמת מוח כבש.

מלאו את החדר בגז ארגון ומקדו קרן לייזר אולטרה סגולה על הרקמה.

הלייזר מאדה את הדגימה והתקנים בתבנית ליניארית, ויוצר תרסיס של חלקיקים עדינים.

גז ארגון נושא את החלקיקים לתוך הפלזמה המצומדת אינדוקטיבית, מקור יינון בטמפרטורה גבוהה.

הפלזמה מאטמת ומייננת את החלקיקים ליונים טעונים חיובית.

היונים נכנסים לספקטרומטר המסה ומופרדים על סמך יחסי המסה למטען שלהם.

הנתונים המתקבלים מושווים למסד נתונים ייחוס כדי לזהות את המתכות הקיימות במדגם. מהתקנים נוצרת עקומת כיול.

חשב את ריכוזי המתכות בדגימה על ידי כיול עוצמות האותות שלה מול אלו של התקנים, וחשוף את ההתפלגות המרחבית של מתכות בתוך פרוסת המוח.

ראשית, הנח דגימת רקמת מוח וכל תקני הרקמות התואמות למטריצה בתא אבלציה בלייזר. ודא שהדגימות נמצאות בעומק השדה של מצלמת LACCD. סגור את דלת החדר והדק את הברגים באצבע.

לאחר מכן בתוכנת ICP-MS, פתח את שסתום הגז המוביל והגדר את קצב הזרימה ל -1.2 ליטר לדקה. בתוכנת LA, הפעל טיהור של 30 דקות של תא האבלציה עם הגז הנשא לתא אבלציה של 2 נפחים. כל 10 דקות, העבר את הדגימה stage לכל פינה בתא כדי להפחית את כמות האוויר הנותר בתא.

הפעל את ה-ICP-MS ואפשר למכשיר להתחמם במשך שעתיים. בזמן שהמכשיר מתחמם, בתוכנת אבלציה בלייזר, צייר קו אבלציה באורך של כ-3 מילימטרים על פני תקן הרקמות הראשון. לחץ על קו האבלציה והגדר את קוטר הקרן המוגדר כברירת מחדל, את מהירות הסריקה ואת שטף הקרינה. שכפל את הקו שש פעמים, תוך ריווח בין הקווים לפי קוטר האלומה. חזור על תהליך זה עבור כל תקן.

לאחר מכן, השתמש בכלי קו כדי לצייר את אזור האבלציה מעל הדגימה מהפינה השמאלית העליונה על פני הנקודה הרחבה ביותר של הדגימה, תוך שימוש באותם פרמטרים כמו עבור התקנים.

שכפל את הקו לפי הצורך לכיסוי מלא של המדגם באותו מרווח המשמש בתקנים. לאחר מכן צייר סט קווים לסריקה לסירוגין של תקנים לא יאוחר מ-20 שעות של סריקת הדגימה או בין כל דגימה. הוסף סריקה של התקנים לסוף הניסוי.

בהתבסס על אורך הקו ומהירות הסריקה, קבע את זמן הניתוח עבור המדגם והקווים הסטנדרטיים. לאחר מכן צור אצווה חדשה בתוכנת ICP-MS ובחר ניתוח שנפתר בזמן. בחר את ערכי יחס המסה למטען המעניינים, והגדר את זמני האינטגרציה עבור כל יחס, כך שזמן האינטגרציה הכולל למחזור אחד הוא 0.25 שניות. שמור את האצווה.

עבור אצווה סטנדרטית, מלא את זמן הניתוח עבור כל שורה במאגר נוסף של 15 שניות כדי לקחת בחשבון את זמני החימום והשטיפה של הלייזר. הגדר רשימת הפעלה לדוגמה עם רכישה עבור כל שורה סטנדרטית. עבור אצווה המדגם, שכפל את האצווה הסטנדרטית והתאם את הזמנים ומספר הרכישות בהתאם לדפוס האבלציה של הדגימה.

לאחר שה-ICP-MS התחמם, הוסף את האצווה הראשונה לתור וודא שהתוכנה ממתינה לטריגר ממכשיר ה-LA. לאחר מכן, בתוכנת LA, הפעל את ספק הכוח של הלייזר והגדר את זמני החימום והשטיפה של הלייזר. התחל את רצף הלייזר ובדוק שה-ICP-MS מתחיל נכון באיסוף הנתונים לאחר האבלציה.

לאחר איסוף הנתונים, חלץ את הנתונים עבור התקנים מקבצי ה- CSV. בצע חיסור בסיסי ואל תכלול את אות הרקע. זהה נפילות אות הנגרמות על ידי חורים בתקני הרקמות.

הסוו את אזורי האות הנמוכים הללו ולאחר מכן יצאו את הנתונים כגיליון אלקטרוני. חשב מקדם המרה מ-CPS ל-PPM עבור כל רכיב שזוהה. חזור על תהליך זה עבור כל תקן.

לאחר מכן, פתח את התוכנה לבניית תמונות כמותית וייבא את הנתונים לדוגמה מקבצי ה-CSV. בחר מספר אזורים ברקע כדי להחיל תיקון רקע. בחרו בכלי עריכת התרשימים, לחצו לחיצה ימנית על התמונה ובחרו 'שינוי מראה תמונה'. שנה את הצבע הראשון ב- Z לערך שלילי גדול.

ולחץ על סיום כדי לשפר את אות הרקע. לאחר מכן, בכרטיסייה תקנים, הזן את גורמי התיקון של CPS PPM עבור כל תקן ולחץ על בצע. פתח את דפדפן הנתונים בכרטיסייה נתונים, לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני על קובץ תמונה מתוקן ולחץ על תמונה חדשה.

פתחו את החלון Modify Image Appearance והגדירו את טבלת הצבעים ואת קנה המידה. השתמש בכלי העזר Add Annotation כדי למקם סרגל צבעים על התמונה. התאם את סרגל הצבעים בחלון סרגל הצבעים. לאחר צביעת התמונה והערותיה, העתק והדבק את התמונה בתוכנית אחרת או ייצא את התמונה מתוכנת בניית התמונה.

כדי להפעיל את כלי ההחזר על ההשקעה, בחר עיבוד תמונה מחבילות הניתוח ובחר תמונה. בכרטיסייה תמונה, לחץ על החזר ROI והתחל את ציור החזר ההשקעה. בחר את אזור העניין ולאחר מכן לחץ על סיים החזר על ההשקעה.

בכרטיסייה תמונה, לחץ על נתונים סטטיסטיים כדי לקבל את נתוני ההחזר על ההשקעה. העתק והדבק את הנתונים בגיליון אלקטרוני, והקפד לשמור בעת הוספת כל החזר על ההשקעה. חזור על התהליך לפי הצורך.