הדמיית ביולומינסנציה להערכת צמיחת גידול בפרוסת מוח אורגנוטיפית של עכבר

קח צלחת מרובת בארות המכילה פרוסת מוח עכבר אורגנוטיפית עם תאי גידול. תאים אלה מבטאים את האנזים לוציפראז.

הרם את התוספת כדי להוסיף תמיסת לוציפרין למדיה וערבב היטב. החזר את התוספת לבאר.

הלוציפרין נכנס לתא הגידול ומתחמצן על ידי לוציפראז, ופולט ביולומינסנציה.

הנח את הצלחת בתוך תא ההדמיה של מערכת ההדמיה in vivo, שיכולה ללכוד ביולומינסנציה הנפלטת מהדגימה.

נעל את החדר כדי למנוע הפרעות אור חיצוניות.

התאם את הגדרות המצלמה כדי ללכוד באר אחת לכל תמונה.

הזז את הבמה כדי למקם את הבאר ישירות מתחת למצלמה.

מטב את זמן הרכישה על סמך עוצמת הביו-לומינסנציה הנפלטת.

הגדר את צורת הגידול ולאחר מכן התחל בהדמיה ביולומינסנציונית.

כמת את האות הביולוגי כדי להעריך את צמיחת הגידול על פרוסת המוח.

פיפטה 5 מיקרוליטר של 30 מיליגרם לתמיסת לוציפרין מיליליטר לתוך המדיום שמתחת לתוספות בתוך מכסה מנוע סטרילי. הנח את צלחת שש הבארות עם המכסה בתוך תא ההדמיה של המכשיר מתחת למצלמה הנייחת ונעל את דלת החדר.

פתח את התוכנה ואתחל את המכשיר. לאחר בחירת הגדרות המצלמה, המאפשרות הדמיה ולכידה של באר אחת בלבד לכל תמונה, הנח את הבאר לתמונה ישירות מתחת למצלמה. השתמש בכלי החזר ההשקעה, התאם אותו סביב צורת הגידול וגודלו. מדוד את החזר ה-ROI ודווח על הקריאות הכוללות כדי לכמת את האות הביו-לומינסנט של כל גידול על הפרוסה.