Name: תפלצת רוחנית דור הקפסולה testis (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 24 s
Description: למדו את שיטת מבחן הטרטומה להערכת רב-התמיינות של תאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים בבלוטת האשכים של עכברים. שיטה זו מאפשרת אימות יכולת ההתמיינות של התאים לשלוש שכבות הנבט.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו מומנה על ידי מענקים CIRM # TR-1250, RT1-01108, ו CL1-00502.

הערה: כל הנהלים בעלי חיים חייב להיות מאושר על ידי IACUC או שווה ערך. כל הציוד הכירורגי יש לעקר לפני הניתוח. כפפות סטריליות, וילונות גזה יש להשתמש. 1. הכנה לפני הניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשיג 6 בן שבוע מ.א.ס. מאסכאלאס CbySmn.CB17-Prkdc SCID / י עכברים ממין זכר או זן immunocompromised השני של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את כל מכשירי ניתוח, כפפות, ו גזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתק hPSCs להיות מוזרק עם accutase. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספירת תאים ו resuspend 1,000,000 תאים לכל μL 20-30 ב matrigel בדילול 01:01 ב DMEM/F-12. שמור על תאים על הקרח עד גמר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב כי לעיתים קרובות כדאי לעשות ריצה דרך של ניסוי שבו Trypan כחול מוזרק. זה יעזור לזהות בעיות פוטנציאליות לפני כל התאים מבוזבז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ב ביבר, להרדים את העכבר בהתאם לנהלים המקובלים במוסד שלך. בניסויים שלנו, השתמשנו anesthesia מכונה עם isoflurane. העכברים הוכנסו בתחילה עם חמצן 1L/min ו 3-4% isoflurane בתא אינדוקציה. הרדים פעם, חרוט האף עם חמצן 1L/min ו 2-3% isoflurane היה בשימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הבטן עם קוצץ, ולנקות את הקיר הקדמי של הבטן העכבר, החל ממרכז הבטן ועבודה עם כיוון השעון כלפי חוץ. הפתרון הראשון Povidone-יוד השימוש מכן לשטוף עם אתנול 70%. לחזור 3 פעמים, שינוי דגימות בכל פעם. להעביר את בעל החיים משטח חימום כדי לשמור על בעל החיים חם בתוך התרבות רקמות או מכסה המנוע לנתח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך אורכי 1 ס"מ דרך העור הצפק עם מספריים כירורגיות סטריליות ממש מתחת לרמה של הירך משותפת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוך כדי לחיצה הצפק עם מלקחיים, להגיע לעבר הירך הימנית עם forcept אחר סטרילית ולשלוף את רקמת שומן לבן יחד עם האשכים המצורפים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את האשכים על גזה סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא טוברקולין או המילטון (1cc) מזרק Wiה hPSCs כדי להיות מוזרק. שים לב, זה רעיון טוב לכלול פס בקרה hPSC שאתה יודע שהוא pluripotent כגון WA09 (הידוע גם בשם H9). בדרך זו יש לך ביקורת חיובית שאפשר להשתמש בו כדי לקבוע אם הזריקה שלך או ניתוח היה פגום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט לאט להזריק את hPSCs (20-30 μL) למרכז הקפסולה testis הרחק מכל כלי הדם הגדולים, לעצור אם הקפסולה האשכים מתחיל להתנפח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוציא את המחט לאט לאט כדי למנוע רפלוקס של התאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מלקחיים, להעביר את האשכים והגב רקמת שומן למקומו המקורי בבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסגור את הצפק עם 2 או 3 תפרים reabsorbable ולסגור את העור עם autoclips. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העכבר יש לשמור חם עד שהוא מתאושש וקיבל צורה כלשהי של כאבים (ראה מה שמקובל ביבר שלך) לאחר הניתוח פעמיים ביום במשך 1-2 ימים. שים לב, לא הרדמה או משכך כאבים עם להפריע להתפתחות הגידול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג הדואר חיה על הגידול שבועות 6-12. לעתים נדירות ביותר, גידולים עשוי לגדול ל 5 מ"מ בגודל קודמות עד 6 שבועות לאחר ההזרקה, ולכן חשוב לעקוב אחר בעלי החיים. אם זה יקרה, בעלי החיים צריך להיות מורדמים וגידולים את עיבוד וניתוח כרגיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הגידול הוא מוחשי ומגיעה בגודל 5 מ"מ בערך, להרדים את העכבר ולהקריב אותו על פי הנהלים המקובלים פרוטוקול של בעלי חיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרה של הגידול המסמך בהתאם - גודל, מדד צילום, לשקול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גזור הגידול לחתיכות קטנות ולתקן בפתרון paraformaldehyde 4%. חנות paraformaldehyde 4% עד דגימות נשלחות פתולוג עבור מכתים, חתך וניתוח. </li></ol> 2. נציג תוצאות: כאשר בפרוטוקול זה נעשה כפי שתואר לבין הקו התא שהוחדר הוא pluripotent, מוחשי, ברור מבחינה חזותית, הגידול צריך להקים בתוך 12 שבועות לכל היותר. עבור קווי hPSC שהוקמו כמו WA09, אנו בדרך כלל רואיםגידולים בתוך 6 שבועות. עבור קווי iPSC אין זה יוצא דופן לראות גידולים בתוך 8-10 שבועות. חשוב מאוד להכניס עכברים עם קו זה ידוע pluripotent, כביקורת חיובית, על מנת להיות בטוח כי ההליך בוצע בצורה נכונה. גידולים בדרך כלל נראים הטרוגנית מאוד ויש להם ציסטות מצורפים רבים (איור 1). ניתוח של דגימות הגידול על ידי פתולוג צריך להראות רקמות הבדיל מכל שלוש שכבות הנבט (איור 2). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/3177/3177fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. אופיינית תפלצת רוחנית נגזר hPSC בכמוסה testis. בעקבות הפרוטוקול המתואר, WA09 מיליון תאים הוזרקו הקפסולה testis של העכבר נפגעת מערכת החיסון. שישה שבועות לאחר מכן נצפתה תפלצת רוחנית. א) משך תפלצת רוחנית של העכבר. ב) תקריב תמונה של תפלצת רוחנית. הערה המבנים ואת ההטרוגניות ציסטה. <img alt="איור 2" src='"/' files> איור 2. Hematoxylin וחתכים Eosin מוכתמים מן תפלצת רוחנית להראות רקמות של כל שכבת נבט. לאחר קיבוע, תפלצת רוחנית נותח ומוכתמים Hematoxylin ו Eosin. ניתוח על ידי פתולוג חשף את נוכחותם של תאים כל אחד 3 שכבות הנבט.

<ol><li>Bradley, A., Evans, M., Kaufman, M. H., Robertson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formation+of+germ-line+chimaeras+from+embryo-derived+teratocarcinoma+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Formation of germ-line chimaeras from embryo-derived teratocarcinoma cell lines.</a> Nature. 309, 255-255 (1984).</li>
<li>Evans, M. J., Kaufman, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+in+culture+of+pluripotential+cells+from+mouse+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos.</a> Nature. 292, 154(1981).</li>
<li>Martin, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+a+pluripotent+cell+line+from+early+mouse+embryos+cultured+in+medium+conditioned+by+teratocarcinoma+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Isolation of a pluripotent cell line from early mouse embryos cultured in medium conditioned by teratocarcinoma stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 78, 7634-7634 (1981).</li>
<li>Downing, G. J., Battey, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technical+assessment+of+the+first+20+years+of+research+using+mouse+embryonic+stem+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Technical assessment of the first 20 years of research using mouse embryonic stem cell lines.</a> Stem Cells. 22, 1168-1168 (2004).</li>
<li>Thomson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+stem+cell+lines+derived+from+human+blastocysts%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts.</a> Science. 282, 1145-1145 (1998).</li>
<li>Reubinoff, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+stem+cell+lines+from+human+blastocysts%3A+somatic+differentiation+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Embryonic stem cell lines from human blastocysts: somatic differentiation in vitro.</a> Nat Biotechnol. 18, (2000).</li>
<li>Muller, F. J., Goldmann, J., Loser, P., Loring, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+call+to+standardize+teratoma+assays+used+to+define+human+pluripotent+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">A call to standardize teratoma assays used to define human pluripotent cell lines.</a> Cell Stem Cell. 6, 412-412 (2010).</li>
<li>Brivanlou, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cells.+Setting+standards+for+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Stem cells. Setting standards for human embryonic stem cells.</a> Science. 300, 913-913 (2003).</li>
<li>Lensch, M. W., Schlaeger, T. M., Zon, L. I., Daley, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Teratoma+formation+assays+with+human+embryonic+stem+cells%3A+a+rationale+for+one+type+of+human-animal+chimera%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Teratoma formation assays with human embryonic stem cells: a rationale for one type of human-animal chimera.</a> Cell Stem Cell. 1, 253-25 (2007).</li>
<li>Gertow, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organized+development+from+human+embryonic+stem+cells+after+injection+into+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Stem.+Cells.+Dev%22%5BJournal%5D)">Organized development from human embryonic stem cells after injection into immunodeficient mice.</a> Stem. Cells. Dev. 13, 421-421 (2004).</li>
<li>Gertow, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+human+embryonic+stem+cell-derived+teratomas+for+the+assessment+of+pluripotency%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Stem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Isolation of human embryonic stem cell-derived teratomas for the assessment of pluripotency.</a> Curr Protoc Stem Cell Biol. Chapter 1, Unit1B 4-Unit1B 4 (2007).</li>
</ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

השיטה המוצגת כאן מספקת אמינה מאוד, באמצעים פשוטים של יצירת teratomas מ hPSCs הקפסולה testis. ישנם מספר פרמטרים קריטיים בטכניקה זו. בפרט, חשוב להזריק שורות תאים hPSC שידוע כי הם להיות pluripotent כביקורת. פרמטרים חשובים נוספים כוללים את מרווח הזמן בין הזרקה והתבוננות הגידול. על שורות תאים כמו WA09, teratomas צריך לשמור על 6-8 שבועות. על קווים חדשים iPSC אנו מוצאים כי לעתים קרובות 10 שבועות נדרשים. חשש נוסף הוא מספר התאים המוזרקים. אנחנו מזריקים מיליון תאים, אך assay יכול להיעשות בקלות עם פחות תאים. בנוסף, בינוני זריקה חשובה. אנו מוצאים כי אנחנו מקבלים את התוצאות הטובות ביותר כאשר התאים מוזרקים בתערובת 01:01 של matrigel ו DMEM/F-12, לעומת PBS או DMEM/F-12.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td></tr><tr><td> Accutase </td><td> Invitrogen </td><td> A1110501 </td></tr><tr><td> DMEM/F-12 </td><td> Invitrogen </td><td> 113300-032 </td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> BD Biosciences </td><td> 354277 </td></tr></tbody></table>

תפלצת רוחנית דור הקפסולה testis

Teratoma Generation in the Testis Capsule

בתאי גזע pluripotent (PSCs) יש מאפיין ייחודי כי הם יכולים להתמיין לתאים מכל שלוש שכבות הנבט. זה גורם להם להיות כלי רב ערך פוטנציאלית לטיפול במחלות שונות. עם כניסתו של המושרה בתאי גזע pluripotent (iPSCs) ומחקר המשך בתאי גזע עובריים אנושיים (hESCs) יש צורך מבחני זה יכול להוכיח כי קו מסוים הוא תא pluripotent. שידור germline כבר את תקן הזהב עבור הוכחת pluripotence של תא גזע עובריים בעכבר (המסקלין) שורות 1,2,3. שימוש assay זה, החוקרים יכולים להראות כי הקו המסקלין יכול לעשות את כל סוגי התאים בעובר כולל בתאי הנבט 4. עם הדור של האדם ESC קווים 5,6, assay המתאים להוכיח pluripotence של תאים אלה לא היה ברור מאז ESCs אדם לא יכול להיבחן לשידור germline. כתחליף, assay תפלצת רוחנית משמשת כיום להפגין pluripotency בתאי גזע האדם גזע pluripotent (hPSCs) 7,8,9. למרות assay זה הגיע לאחרונה תחת בדיקה וטכנולוגיות חדשות נבדקות באופן פעיל, assay תפלצת רוחנית הוא תקן הזהב הנוכחי 7. ב assay זה, התאים המדוברים מוזרקים לעכבר נפגעת מערכת החיסון. אם התאים pluripotent, תפלצת רוחנית בסופו של דבר לפתח קטעי הגידול יראה רקמות מכל 3 שכבות הנבט 10. ב assay תפלצת רוחנית, hPSCs יהיה ניתן להזריק לתוך אזורים שונים של העכבר. האתרים הנפוצים ביותר כוללים הזרקת testis הקפסולה, הקפסולה כליות, כבד, או את הרגל או מתחת לעור או לשריר 11. כאן אנו מתארים את פרוטוקול חזקים עבור הדור של teratomas מ hPSCs באמצעות הקפסולה testis כאתר של הגידול.

אדם בתאי גזע pluripotent (hPSCs) יש פוטנציאל לטפל מספר עצום של מחלות שונות. השירות של תאים אלה הוא בכך שהם יכולים להתמיין לכל סוג תא בגוף. כאן אנו מתארים את assay תפלצת רוחנית, אשר משמש כדי להדגים את pluripotence של hPSCs.

לתאי גזע פלוריפוטנטיים (PSCs) יש את המאפיין הייחודי שבו הם יכולים להתמיין לתאים מכל שלושת השכבות העובריות. דבר זה הופך אותם ל...

המטרה הכללית של הליך זה היא לבחון פלוריפוטנציה על ידי יצירת טרטומה במעטפת האשכים של עכברים עם מערכת חיסונית לקויה, תוך שימוש בתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים או H PSCs. התחילו באיסוף תרבית של H PSCs המועמדים לבדיקת פלוריפוטנציה. לאחר מכן, בצעו ניתוח לחשיפת אשכי העכבר והזריקו את התאים אל תוך מעטפת האשכים.החזיר את האשכים למיקומם המקורי וסגור את העכבר באופן כירורגי. לאחר שש עד 12 שבועות, בחן את הגידול שהתפתח באמצעות היסטולוגיה כדי לבדוק נוכחות של תאים מכל שכבת נבט. בסופו של דבר, התוצאות יכולות להוכיח שקו HPSC הוא אכן פלוריפוטנטי על ידי הצגה של יכולתו להתמיין לתאים מכל שלוש שכבות הנבט בעכבר עם מערכת חיסונית מוחלשת. למרות ששיטות חדשות להוכחת פלוריפוטנציות של תאי גזע אנושיים דווחו לאחרונה, מבחן הטרטומה נותרe złoty standard בתחום; הפרוצדורה תוצג על ידי tron, טכנאי בכיר במעבדת תרבויות התאים שלי.יש להביא את תאי הגזע הפלוריפוטנטיים האנושיים לקונופלואנס ולאחר מכן להפריד את ה-HPSCs באמצעות Accutase. ספרו את התאים כדי להכין תרחיף של 1 מיליון HPCs לכל הזרקה. ראשית, גלחו את הבטן של עכברים זכרים בני שישה שבועות תחת הרדמה, מזן עכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת, באמצעות מכשיר גילוח.לאחר מכן, שטפו את האזור הגולח ב-70%ethanol. חזרו על התהליך שלוש פעמים, תוך החלפת המטבונים בכל פעם. לביצוע ההליך הכירורגי, העבירו את החיה למשטח חימום בתוך מנדף סטרילי עם מספריים כירורגיים סטריליים.בצעו חתך אורך של סנטימטר אחד דרך העור והפריטונאום, ממש מתחת לגובה מפרק הירך, תוך כדי החזקת הפריטונאום באמצעות פינצטה. הגיעו עם זוג נוסף של פינצטות סטריליות לכיוון הירך הימנית ומשכו החוצה את הרקמה השומנית הלבנה יחד עם האשכים המחוברים אליה. כעת מלאו מזרק טוברקולין של 1 CC ב-hpsc להזרקה. הזריקו לאט 20 עד 30 µL של H PSCs למרכז קפסולת האשך, הרחק מכלי דם מרכזיים.הוצא את המחט באיטיות באמצעות פינצטה כדי למנוע רפלוקס של התאים. העבר את האשכים ורקמת השומן חזרה למיקומם המקורי בבטן. סגור את הפריטונאום באמצעות שתי או שלוש תפרים נספגים וסגור את העור בעזרת אוטו-קליפסים.לאחר הניתוח, יש להעניק משככי כאבים פעמיים ביום לפי הצורך. יש לעקוב אחר צמיחת גידול מורגש במישוש בבעל החיים לאורך תקופה של שש עד 12 שבועות. כאשר הגידול יגיע לגודל של כחמישה מילימטרים, יש להוציא את הגידול מהעכבר שהוקריב לצורך תיעוד.צלמו את הגידול ומדדו הן את הגודל והן את המשקל. לאחר מכן חתכו את הגידול לחתיכות קטנות וקבעו אותו בתמיסת 4%paraldehyde לצורך היסטופתולוגיה. בדרך כלל, טרטומה נצפית לאחר ששה עד 12 שבועות.בדוגמה זו, מיליון תאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים מסוג WA 09 הוחדרו לקפסולת האש של עכבר עם מערכת חיסון לקויה. בדיקה מעמיקה של הטרטומה חושפת הגתרוגניות וציסטות רבות הצמודות אליה, כפי שצפוי.ניתוחים היסטופתולוגיים מעידים על נוכחות של תאים מכל אחת משלוש שכבות הנבט. בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור לכלול קו תאים של ביקורת חיובית הידוע כבעל פוטנציאל גבוה, כדי לוודא שהבדיקה בוצעה כהלכה. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה בידיכם הבנה טובה לגבי האופן שבו קובעים האם קו תאי גזע אנושי הוא פלוריפוטנטי או לא.

teratoma-generation-in-the-testis-capsule

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

בידול בימוי של hESCs לתוך תאים ספציפיים יצרה עניין רב ברפואה רגנרטיבית. אנו מספקים תמציתי, צעד אחר צעד פרוטוקול...

הגורל מיפוי בתאי גזע עובריים אנושיים על ידי גיבוש תפלצת

הפרוטוקולים של תא החיידק השתלת רקמות xenografting testis מתוארים. תא הנבט השתלת תוצאות spermatogenesis, התורם המופק האשכים הנמען ומהווה assay הכינון מחדש תפקודית לזיהוי בתאי גזע spermatogonial (SSCs). רקמת אשך xenografting מתרבה פיתוח testis ו spermatogenesis של מינים שונים התורמות בעכברים הנמענים.

נבט השתלת ורקמות testis Xenografting ב עכברים

בסרטון זה, אנו מדגימים השתלה של שתלי רקמת סרטן ערמונית שמקורם בבני אדם לתוך קפסולת הכליה של עכבר מושתל מדוכא חיסון. טכניקה זו יכולה לשמש כדי להעריך את התקדמות הגידול ולפתח אסטרטגיות טיפוליות חדשניות.

גידול בקפסולה כליה Xenografting: טכניקה ליצירת מודל ניסיוני של בעלי חיים להערכת סרטן הערמונית

סרטון זה מדגים את הליך הבידוד של תאי סרטולי מצינוריות זרע של עכברים, מרכיב באשכים. עיכול אנזימטי ושטיפות חוזרות ונשנות מקדמים את שחרורם של תאי סרטולי לתמיסה, אשר ניתן לגדל בתרבית נוספת לצורך התרבות וצמיחה.

בידוד תאי סרטולי בקרה חיסונית מצינוריות זרע עכבר

כדי לפענח את המנגנונים המולקולריים שבבסיס המוקדם סרטן ערמונית ייזום, רומן ומערכות מודל אדם חדשניים וגישות הם זקוקים נואשים. הפוטנציאל של טרום ערמונית ואברי המין סינוס mesenchyme (UGSM) כדי לגרום לאוכלוסיות תאי גזע pluripotent כדי ליצור אפיתל ערמונית אנושי הוא כלי רב עוצמה במחקר ניסיוני ערמונית.

היווצרות של האפיתל ערמונית אנושי באמצעות רקומבינציה של רקמות ואברי מין מכרסם mesenchyme סינוס ותאי גזע אנושיים

פרוטוקול זה מתאר את הנתיחה והטיפוח של אשכים שלמים וציסטות בקו הנבט מגלמים של Drosophila melanogaster. שיטה זו מאפשרת תצפית מיקרוסקופית על זרע הזרע ex vivo. יתר על כן, אנו מתארים בדיקה פרמקולוגית של השפעת המעכבים על שלבים ספציפיים של התפתחות תאי נבט באשכים גולמים.

אקס תרבות Vivo של דרוזופילה גלמי אשך וציסטות נבט אונליין רווק בן: Dissection, הדמיה, ותרופתי טיפול

תאי Sertoli הראשי נדרשים ללימוד זכות testis-אימוניות, הולך אותות בזמן דלקת או זיהום, וניצול של נכסי immunoprotective שלהם. כאן אנו מתארים פרוטוקול אנזים המבוסס עבור בידוד של תאי Sertoli העיקרי נקיים במיוחד ותאי peritubular מן אשכי חולדה.

תאי בידוד של תאי Sertoli ו Peritubular מן חולדת האשכים

לכאן, אנו מציגים פרוטוקול עבור הדור הניתן להתרבות של אורגנואידים האשך של חזירי עם ארכיטקטורת רקמה ספציפית בראש באמצעות מערכת התרבות הזמינה מסחרית למיקרוגל.

הדור של מבנה האשך של פורצין עם הארכיטקטורה הספציפית ביותר באמצעות התרבות של המיקרוגל

כאן, ארבע שיטות ליצירת אורגנואידים אשכים מתאי אשכים מורין ילודים ראשוניים מתוארים כלומר, מטריצה חוץ תאית (ECM) וסביבות תרבות 2D ותלת-מיוד ללא ECM. טכניקות אלה יש יישומי מחקר מרובים והם שימושיים במיוחד ללימוד פיתוח האשכים ופיזיולוגיה במבחנה.

אקסטרה סלולר מבוסס מטריצה ודור נוסף ללא מטריקס סלולרי של אורגנואידים אשכים Murine

מאמר זה מתאר הליך שלב אחר שלב ליצירת מודל של איסכמיה/רפרפוזיה של האשכים לייצור מודל ניתן לשחזור של פיתול האשכים בחקר המנגנונים הפתולוגיים של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה באשכים.

עיגון אשך מעוות: מודל חולדה של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה של האשך

למדו את שיטת מבחן הטרטומה להערכת רב-התמיינות של תאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים בבלוטת האשכים של עכברים. שיטה זו מאפשרת אימות יכולת ההתמיינות של התאים לשלוש שכבות הנבט.

תפלצת רוחנית דור הקפסולה testis

גלה סרטונים נוספים