In Vivo Bioluminescence Imaging of Human Neural Progenitor Cells in a Mouse Brain

doi:10.3791/32126

Encyclopedia of Experiments
Neuroscience

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Encyclopedia of Experiments Neuroscience

In Vivo Bioluminescence Imaging of Human Neural Progenitor Cells in a Mouse Brain

הדמיית ביולומינסנציה in vivo של תאי אב עצביים אנושיים במוח עכבר

Protocol

412 Views

01:49 min

August 13, 2025

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Transcript

נתחיל עם עכבר חסר חיסון שהוזרק למוח שלו תאי אב עצביים אנושיים מהונדסים גנטית, או NPCs.

תאים אלה מבטאים לוציפראז, אנזים המייצר אור.

הזרקת לוציפרין, המצע ללוציפראז, תוך צפקית לעכבר.

להרדים את העכבר, ואז למרוח חומר סיכה עיניים על עיניו כדי למנוע ייבוש ולגלח את ראשו להדמיה.

מקם את העכבר במצב שכיבה בתוך תא הדמיה עם תנאים מוגדרים מראש להדמיה.

לוציפרין מסתובב בזרם הדם ונכנס לרקמת המוח על ידי מעבר דרך תאי אנדותל, ומגיע ל-NPCs המושתלים.

בתוך התאים, לוציפרין מגיב עם לוציפראז ומייצר אור ביולומינסנצינטי.

מערכת ההדמיה לוכדת את האותות הביולוגיים הללו הנפלטים מאתר השתלת ה-NPC.

האותות הביולוגיים האלה מאשרים את ההשתלה המוצלחת של ה-NPCs האנושיים לתוך מוח העכבר.

הזרקו את הלוציפרין תוך צפק, ולאחר חמש דקות הרדימו בעלי חיים עם אספקת איזופלורן רציפה. לגלח את בעלי החיים הרדומים באזור הראש באמצעות מכונת גילוח שיער קונבנציונאלית. הנח את החיה בתא ההדמיה, והתחל לצלם 15 דקות לאחר הזרקת הלוציפרין על ידי לחיצה על Acquire בלוח הבקרה.