הדמיית דינמיקת סידן בתאי שיער בקו הרוחב של דג זברה זחל

קח זחל דג זברה טרנסגני משותק המותקן בתא זלוף.

הזחל מבטא מדדי סידן מקומיים בקרום בתאי השיער של הנוירומה, מרכיב במערכת הקו הרוחבי המזהה תנועת מים.

תאי השיער מורכבים מצרורות שיער אפיקליים ואזורים פרה-סינפטיים בסיסיים, היוצרים סינפסות עם נוירונים אפרנטיים להעברת אותות.

תחת מיקרוסקופ קונפוקלי, השתמש בהגדלה נמוכה כדי למקם פיפטה של סילון נוזל ליד הזחל.

הגדל את ההגדלה כדי לאתר תורן עצבי, מקם מחדש את הפיפטה בקרבתו ועבור

להדמיה פלואורסצנטית.

לספק פולסים נוזליים כדי להסיט צרורות שיער, ולפתוח תעלות מכניות לזרם קטיון אפיקלי, כולל יוני סידן.

אינדיקטורים פלואורסצנטיים חלשים נקשרים לסידן, וגורמים לעלייה מקומית בקרינה.

זרם הקטיונים מפריד את התא, ומפעיל כניסת סידן דרך תעלות מגודרות מתח בקדם-סינפסה הבסיסית, שם הוא נקשר לאינדיקטורים ומגביר את הקרינה באופן מקומי.

דמיין את הדינמיקה של הסידן האפיקלי והבסיסי בזמן אמת.

בהליך זה, מילוי חוזר של 10 מיקרוליטר של מאגר עצבי למחט סילון נוזלים שבורה כהלכה באמצעות קצה טעינת ג'ל. טען את התמיסה באופן שווה לקצה ללא בועות. לאחר מכן הכנס את המחט למחזיק הפיפטה המחובר למיקרומניפולטור הממונע.

הנח את תא הזלוף לתוך מתאם תא עגול על המיקרוסקופtagה. הזיזו את הבמה הממונעת כך שהזחל יהיה במרכז שדה הראייה. לאחר מכן, סובב את מתאם התא העגול כך שציר ה-A-P של הזחל מיושר בערך עם מסלול מחט סילון ה