ייצור המוני של Aedes aegypti מהונדסים גנטית עבור מהדורות שדה בברזיל

ניתן להשיג את השליטה במצרית באמצעות חרקים המכילים שינוי גנטי הגורם למות צאצאיהם. כאשר הזכרים משתחררים, הם מזדווגים ואילו צאצאים נקבות שנוצרו מההזדווגות הללו ימותו. ניתן להשיג שליטה באוכלוסייה על ידי שחרור מתמיד של זכרים עקרים גנטית.

ניתן לשלוט בגן הגורם למוות על ידי הוספת נוגדן לתזונה, המאפשר לחרקים עם השינוי הגנטי לשרוד. להשיג דיכוי אוכלוסייה של aegypti. באמצעות קו יתושים מהונדס גנטית, יש לשחרר מספר רב של יתושים זכרים.

זה דורש שימוש בטכניקות גידול המוני כדי להשיג את המספר המרבי של יתושים זכרים באיכות ובכושר הגבוהים ביותר האפשריים. ניתן לחלק את הגידול ההמוני של OX 5 1 3 A לשלושה תחומים עיקריים, ייצור ביציות, ייצור זכרים והופעתם והתבגרותם של זכרים לפני השחרור. זוהי סכימה של המתקן האחורי המשמש לייצור OX 5 1 3 A.Males ב- Moscamed בברזיל, ביצים באיכות גבוהה מיוצרות ללא הרף בחדר מושבת ייצור הביצים.

ביצים אלה מגודלות לאחר מכן לגור באזור הייצור הזכרי, שם הגור ממוין לאחר מין. לגברים מסופק אזור ייעודי לעבודות בקרת איכות. לאחר מכן הזכרים מוכנסים למכשירי שחרור ומאפשרים להם לצאת ולהתבגר לפני השחרור.

הטכניקות המוצגות בסרטון זה ישימות לאזורי ייצור הביציות והגברים. כדי להשיג ביצים לייצור זכרים, אנו משתמשים בהזנת ממברנה מלאכותית באמצעות דם בעלי חיים מבית מטבחיים מקומי. החומרים הנדרשים לתהליך זה הם ביופילם וצלחת אנין בגודל של כ-10 סנטימטרים רבועים עם דפוס דריכה מוגבה.

בצד אחד, מעט דם ופופים מלאים בכ-250 גרם גרגירי חיטה. מערכת האכלת הצלחות משתמשת בפרפורם כממברנה ליתושים להאכיל דרכה כדי לעודד האכלה. הפראם נשדד על עור אנושי.

לאחר מכן נמתח הפראם בזהירות כדי להפחית את עוביו. לאחר מכן מכוסה צד התבנית של לוחית האלומיניום בפרפורם משלושה צדדים, תוך הקפדה לא לפגוע בפרפורם וגם לאטום היטב את הקצוות. לאחר מכן מוסיפים דם דרך הצד הפתוח של הצלחת והפרפורם.

המזין מלא עד כשליש בדם. לאחר מכן הביופילם נאטם בזהירות במקומו כדי למנוע מהדם לברוח. לאחר מכן מניחים את צלחות הזנת הדם על החלק העליון של כלובי המבוגרים.

את הפופים מחממים במיקרוגל למשך 10 שניות ומניחים על הצלחת כדי לחמם את הדם. במידת הצורך ניתן לחמם את הפוף כל 10 עד 15 דקות. אתר מיקום FU מסופק שלושה ימים לאחר הזנת הדם.

אתר מיקום השחלה הוא נייר סינון בתוך מיכל פלסטיק עגול מלא למחצה במים. הנח את אתר המיקום הנגדי בכלוב הבוגרים כדי שהנקבות יוכלו להטיל את ביציהן. יומיים לאחר מכן, הסר את נייר הביצה והניח על נייר סופג לייבוש בתנאים פנימיים.

כשהן יבשות מוציאים את הביצים מהנייר. בעזרת מכחול מברישים בעדינות את הביצים למגש גדול, נזהרים לא לפגוע בביצים. על ידי צחצוח חזק מדי, הביצים מועברות דרך מסננת כדי להסיר חרקים מתים ופסולת אחרת כדי לסייע במניעת היווצרות עובש.

ולספירה מדויקת יותר של ביצים לפי משקל, הביצים המיובשות מוגדרות לאליקוטים של גרם אחד. זה שווה ערך ל-100,000 ביצים. באמצעות סולם אנליטי למיכלי פלסטיק קטנים, ניתן לאחסן את הביצים במיכלים אלה בתנאים פנימיים עד שישה שבועות.

לבקיעת ביצים, צנצנות מוגדרות על ידי הוספת מים מבושלים, איטום המכסה ומתן אפשרות להתקרר. זה מפחית את החמצן במים להשראת בקיעת הביצים. גרם אחד של ביצים מתווסף לצנצנת והמכסה נאטם מחדש.

למשך שעה מעבירים את תכולת הצנצנת למגש עם שני ליטר מים ומשאירים למשך הלילה. בתנאים מגזריים. יום לאחר הבקיעה, הזחלים מועברים מהמגש דרך מסננת נירוסטה בדרגה 200.

קוטר החורים במסננת הוא בערך 0.075 מילימטרים. לאחר מכן מכניסים את הזחלים לכוס של שני ליטר. ואז מכסים את הכוס עד שני ליטר מים.

מניחים את הכוס על ערבוב מגנטי ומוסיפים פרעוש מגנטי גדול. הגדר את מהירות הערבוב כדי לערבב כראוי את הזחלים, אך לא מהר מדי. מכיוון שהדבר עלול לגרום לערבוב נזקים, יש לבצע זחלים לזמן המינימלי האפשרי כדי לסייע במניעת נזק לבקרת איכות.

קצב הבקיעה נקבע לאחר בקיעת הביצים בהגרלה למשך שעה וגם למחרת, שלושה, מיל אחד מונחים על פיסת נייר סופג לבנה עם ספוג סופג. מתחת לנייר הסופג יש רשת של ריבועים המשמשים לספירה. ספרו את מספר הביצים שבקעו ולא בקעו משלושה ריבועי רשת שונים.

קל לזהות ביצה שבקעה. מכיוון שמכסה הביצה חסר בחלק העליון של הביצה, היינו מצפים לשיעור בקיעה של כ-80 עד 90%המספר הממוצע של זחלים למיל משמש לחישוב נפח המים שיש להוסיף לכל מגש. כדי לקבל את המספר הרצוי של זחלים למגש, קחו שלוש מנות של מיל אחד כל אחת והניחו בצלחות פטרי נפרדות.

הוסף עוד 10 עד 20 מיל מים כדי לפזר את הזחלים לספירה קלה יותר. ספרו את הזחלים באמצעות רקע שחור מכיוון שהזחלים לבנים למראה, וזה מקל על הספירה. מומלץ להשתמש בדלפק, פיפטה ויד יציבה.

המספר הכולל של הזחלים למיל, הנפח המתאים של מים וזחלים מחולקים לאחר מכן לכוסות. היזהר לקחת את הזחלים מאותו מקום בכוס. בכל פעם מוסיפים את הזחלים למגשים שמולאו מראש במים.

במגשים יש את התרופה טטרציקלין בריכוז של 30 מיקרוגרם למיל. יש לייעל את צפיפות הזחלים במגש לעומק, שטח הפנים וגודל הבוגרים. מצאנו שהצפיפות האופטימלית היא בין אחד לשלושה זחלים למיל.

אנו משתמשים במזון דגי פתיתים להאכלת זחלים. מזון הדגים נמעך בבלנדר. כדי לקבל אבקה דקה עקבית, כל שלב בחיים דורש כמויות מזון שונות במקצת.

אז הדיאטה עברה אופטימיזציה לכל יום ונעשה שימוש במשקל ספציפי לכל מגש כדי להפחית את העבודה. עיצבנו ובנינו כפות נפח המחלקות את כמות המזון הנדרשת בקלות וביעילות. הזכרים מתחילים להופיע ביום השביעי, ועד היום השמיני, כ-70% מהזכרים כבר אכלו.

הנקבות אוכלות מאוחר יותר מזכרים, אך עדיין יש שיעור משמעותי של נקבות ביום השמיני. מיון ה-Pube הזכר מתבצע בימים השמיני והתשיעי. כדי לשחזר את המספר המרבי האפשרי של PPE זכר, מסננים את תכולת המגש ומניחים בכד מוכן למיון הצלחת.

מפריד משתמש בהבדלים המורפולוגיים והגדלים בין זחלים לגור זכר ונקבה כדי להפריד ביניהם. המכשיר מורכב משני לוחות זכוכית מקבילים. ניתן להזיז את הצלחת החיצונית קדימה ואחורה באמצעות ארבעה ברגי כוונון.

ברגי הכוונון מאפשרים לכוון את הצלחת החיצונית בזווית, כך שניתן ליצור מרווח בצורת טריז בין הלוחות המתחדדים כלפי מטה. מפריד הצלחות מוגדר עם מיכל מתחתיו כדי לתפוס את המים. הזחלים והפיפי ממגש מוזגים לחלק העליון של מפריד הצלחות בין לוחות הזכוכית.

האפיפיור הנשי גדול יותר מהאפיפיור הזכר והן נפרדות מעליהן. לזחלים יש צורה שטוחה דקה יותר מהערווה הזכרית, והם נפרדים למטה על ידי שטיפה במים והתאמת הזווית ניתן להפריד בין הזחלים לבין הזכר והנקבה באמצעות שטיפה מתמשכת והתאמת זווית הצלחת. באמצעות ברגי הכוונון התחתונים, ניתן לשטוף את הזחלים לתוך מיכל.

המיכל עם הזחלים מוסר ואז מניחים מיכל חדש מתחת למפריד הצלחות. לאחר מכן ניתן לשטוף את הזכר לתוך המיכל החדש. היזהר לא לאפשר לנקבת פוי כלשהי להישטף עם הזכרים.

הסר את המיכל עם קקי זכר והחלף באחד טרי. ולבסוף, ה- PPE הנשי נשטף למיכל הטרי. הגורים הזכרים מבוקרים באיכות לזיהום נקבי.

לאחר המיון, נלקחות שלוש מנות של 500 גורים זכרים ומספר הנקבות הקיימות נספר לאחור במיקרוסקופ. ניתן לזהות נקבות על ידי התבוננות בצורת אונת איברי המין. אונת איברי המין הנשית קטנה ומעוגלת בהרבה מהזכר.

אם יש יותר מ-1% נקבות, יש לפנות לאצווה ולבדוק שוב. הגור הזכר הממוין מוקצה למכשירי שחרור כדי לצאת ולהתבגר לפני השחרור לשדה. תוצאות מלמעלה משישה חודשים של מיון זכר ונקבה.

פופי מראים כי זיהום נקבות בממוצע היה 0.02%שיעור זיהום זה מייצג רק 400 נקבות המשוחררות מדי חודש. גרף זה מציג את נתוני הגלמים הממוצעים של זכרים ונקבות לאורך תקופת ייצור של שישה חודשים. הגולם של הזכר בעיקר ביום השמיני והנקבות ביום התשיעי.

גודל הגור נמדד והושווה באמצעות רוחב בית החזה של הצ'לו שנמדד על ידי צילום תמונות של גור צף במים ושימוש בגרייקו כסולם. הזכרים קטנים באופן עקבי מהנקבות עם מעט מאוד חפיפה בגודלם, מה שמראה שפרמטרי גידול עקביים הושגו ממתקן ייצור הביציות. שטח של כ-19 מ"ר, למעלה מ-4 מיליון ביצים בשבוע הופקו מאזור הייצור של הזכרים.

בממוצע נוצרו 571,000 זכרים בשבוע. יעילות הייצור מביצה לגור זכר ממוין הייתה בסביבות 26%אובדן מסוים של זכרים התרחש במהלך הגיחון, והמספר הכולל של זכרים ששוחררו בשבוע היה בממוצע 543,000.