בתעתיק במבחנה תקרת של mRNA בלוציפראז Gaussia ואחריו transfection Cell הלה

18.4K צפיות

צוטט 13 פעמים

08:55 דק׳

26 במרץ 2012

10.3791/3702-v

26 במרץ 2012

18.4K צפיות
 , 

שיטה זו מתארת סינתזה in vitro בתפוקה גבוהה של mRNA עם כיסוי (capped) וללא כיסוי (uncapped), מפלסמיד ליניארי המכיל את הגן של לוסיפראז Gaussia (GLuc). ה-RNA מטוהר, וחלק מה-RNA ללא הכיסוי עובר תהליך כיסוי אנזימטי באמצעות אנזים הכיסוי של נגיף ה-Vaccinia. בשלב הסופי, ה-mRNA מוחדר (transfection) לתאי HeLa, ותעליל התרבית של התאים נבדק לפעילות לוסיפראז.

גלה סרטונים נוספים

כapping של RNA

Chapters in this video

0:05

כותרת

1:33

טרנסקריפציה *in vitro* באמצעות ערכה לסינתזת RNA בנבכיות גבוהה של T7

3:29

חסימת RNA (Capping) באמצעות מערכת החסימה של *Vaccinia*

4:17

טרנספקציה של תאי HeLa באמצעות ערכת *Trans*IT לטרנספקציית mRNA

6:08

בדיקות ללוסיפראז של *Gaussia* (GLuc) ולוסיפראז של *Cypridina* (CLuc)

7:20

תוצאות מייצגות

8:36

סיכום

Related Videos