January 28th, 2012
המבחן זנב ההשעיה הוא תוקף של הליך ניסיוני כדי להעריך את היעילות של טיפולים תרופתיים נגד דיכאון בעכברים. עכברים מושעים על ידי הזנבות שלהם במשך שש דקות להימלט הקשורות התנהגויות מוערכים. אנו מתארים הליכים המשמשים בביצוע הבדיקה ההשעיה הזנב.
מבחן השעיית הזנב הוא מבחן התנהגותי נפוץ המשמש לחיזוי יעילות נוגדת דיכאון של מניפולציות ניסיוניות שונות. סרט זה מדגים את ההליכים של בדיקה זו. בדיקת מתלי הזנב מאומתת לעכבר ואינה מומלצת למכרסמים גדולים יותר.
במבחן מתלי הזנב עכברים תלויים בזנבותיהם. העכבר נשאר תלוי במשך שש דקות. התנהגויות הנבדק מתועדות במהלך תקופה זו.
בתום תקופת הבדיקה של שש דקות, הסרט מוסר מזנבו של הנבדק. לאחר סיום הבדיקה, ההקלטות החזותיות מועברות למחשב או לצג וידאו. לצורך ניתוח, צופה מודד את הזמן שעכבר מבלה במאבק במהלך כל שש הדקות.
תרכובות עם תכונות נוגדות דיכאון מגדילות את משך הזמן שאני מבלה במאבק. זה בא לידי ביטוי בתקופות קצרות יותר של חוסר תנועה. לדוגמה, דיווחנו כי התרופה המייצבת את מצב הרוח ליתיום, השימושית קלינית כתרופה משלימים נגד דיכאון, הפחיתה את זמן חוסר התנועה במבחן השעיית הזנב.
שלום, שמי שון מהמעבדה של ד"ר טוד גולד במחלקה לפסיכיאטריה בבית הספר לרפואה של אוניברסיטת מרילנד בבולטימור. היי, אני שאנטל מאותה מעבדה. בסרטון זה אנו הולכים להראות לכם כיצד לבצע ולצבור את מבחן מתלי הזנב.
בדיקת השעיית זנב משמשת להערכת היעילות הפוטנציאלית של טיפולים נוגדי דיכאון. אז בואו נלך למעבדה ונראה לכם איך להריץ את הניסוי. למרות שאינו נדרש, אנו משתמשים בתיבת מתלי זנב שתוכננה במיוחד.
למבחן זה. תיבת המתלים האחורית שלנו מחולקת לארבעה תאים, כל אחד מהם שמור לעכבר יחיד. המחיצות מונעות מהעכברים להתבונן זה בזה במהלך הבדיקה.
עם זאת, ניתן להשתמש במדף או במבנה אחר כדי להשעות את העכברים. מידות תיבת הבדיקה של מתלי הזנב נבחרות כדי למנוע מהעכברים להגיע ולהיאחז בקצוות. לפני תחילת הניסוי, חתוך מספיק שברי סרט וסמן את הקטע שישמש להדבקה לזנב.
במעבדה שלנו, נשתמש בשברי סרט בגודל 17 סנטימטרים. יש לסמן שני סנטימטרים מקצה שבר הקלטת הזה ולהשתמש בו כדי להיצמד לזנב. אנו מניחים את הזנב באמצע החלק הזה של שני סנטימטרים.
מקם את תיבת הבדיקה של מתלי הזנב ואת מצלמת הווידאו. לפני הכנסת בעלי החיים, יש לנקות היטב את הקופסה בתמיסת עיקור לנטרול הריחות שנותרו מהנושאים הקודמים. במעבדה שלנו, אנו משתמשים בשתי קופסאות מתלי זנב שונות, זהות בכל היבט מלבד הצבע.
עבור עכברים לבקנים, קופסה אפורה כהה מספקת ניגודיות טובה להקלטות וידאו. עבור זני עכבר בצבע כהה יותר, קופסה לבנה מתאימה. הפעל את מכונת הרעש הלבן.
זה אמור להסוות כל צלילים לסירוגין. הכניסו את העכברים לחדר ההליכים כדי להתאקלם. יש לשמור על התנאים בחדר קבועים וללא רעשים, שינויים ברמות האור ושיבושים אפשריים אחרים.
תקופה זו היא בדרך כלל לפחות שעה. לאחר סיום תקופת ההתאקלמות, ניתן להמשיך במבחן על מנת למנוע מזני עכברים מסוימים לטפס על זנבותיהם. במהלך בדיקת מתלי הזנב, אנו משתמשים בגלילי פלסטיק שאנו מניחים מעל הזנבות.
צילינדרים אלה מונחים בבסיס זנבם במהלך הבדיקה. במעבדה שלנו אנו משתמשים בגלילי פלסטיק באורך של ארבעה סנטימטרים, בקוטר של סנטימטר אחד ובמשקל של 1.5 גרם. אם משתמשים בגלילי פלסטיק למניעת טיפוס, יש להניח אותם על הזנבות לפני הנחת הסרט.
אנו מורחים סרט על קצה הזנב כששניים עד שלושה מילימטרים מהזנב נשארים מחוץ לקלטת. הדביקו את הקלטת לזנבות העכברים בכלוב הביתי שלהם. השתמש בקצה המסומן של הסרט וודא שהסרט נדבק לזנב ובחזרה על עצמו.
לאחר הנחת הסרט, הצמידו כל עכבר לדפנות הכלוב על מנת למנוע הסתבכות של הסרט המחובר לבעלי חיים שונים. השלם תהליך זה במהירות. אחרת, העכברים יהיו נתונים ללחץ מיותר.
יש להתחיל את ההקלטה לפני השעיית בעלי החיים. השעו את בעלי החיים על ידי הנחת הקצה החופשי של הסרט על מוט התלייה בסדר מאוזן בין קבוצות הטיפול ובאופן שאינו חוסם את שדה הראייה של המצלמה. מכיוון שעכברים תלויים בזה אחר זה, לכל חיה יש זמן התחלה שונה במקצת לבדיקה.
הקפד להתחיל לנקד כל עכבר בדיוק בתחילת תקופת ההשעיה שלו. חשוב לא לחסום את המצלמה view. מכיוון שכל מפגש השעיית הזנב יוגדר כחסימה, תצוגת המצלמה עלולה להוביל לנתונים חסרים.
ודא שכל קצוות הקלטת מאונכים למוט המתלה באותו אורך רפיון. עבור כל נושא, הפעל את הטיימר. מבחן מתלי הזנב הוא שש דקות.
לאחר שחלפה תקופת הבדיקה של שש הדקות, הסירו את הסרט מקצה כל זנב והחזירו את העכברים לכלוב הביתי שלהם. בסיום הבדיקה, יש להקליט את פרטי הנבדק בווידאו. לאחר החזרת העכברים לחדר המושבה, יש לנקות היטב את קופסת הבדיקה ולנגב אותה בתמיסת עיקור.
כעת, לאחר שסיימנו את הבדיקות, נדון בניקוד ההתנהגויות. המשתנה היחיד שמוערך בדרך כלל בעת ניקוד מבחן השעיית הזנב הוא הזמן שבו בעלי החיים חסרי תנועה כדי להשיג זמן חוסר תנועה, נמדוד את הזמן שבו העכברים ניידים וננכה אותו מזמן הבדיקה של שש דקות. אנחנו נקבל ציון של כל שש הדקות של המבחן.
ראשית אנו מכסים את העכברים שאינם מוערכים כדי לאפשר לצופה להתמקד בחיה אחת בלבד עבור כל זמן עכבר שהושקע. נייד נמדד על ידי שעון עצר על המסך הנשלט על ידי מכשיר gamepad. כאן, כפי שאתה יכול לראות, ישנם שני שעוני עצר נפרדים על המסך הנשלטים בו זמנית.
שעון העצר הראשון סופר לאחור מ-360 שניות ומציין את משך הבדיקה לצופה. שעון העצר השני מודד את הזמן שבו הנבדקים נשארים ניידים. כפי שאתם עשויים לשים לב, שעון העצר השני מכוסה על ידי שעון העצר הראשון ורק העשרוניים של אלפיות השנייה שלו נראים לצופה.
בדרך זו, הצופה יוכל לראות אם שעון העצר סופר, אך לא יוכל לראות את זמן הניידות הכולל עד להשלמת הניקוד. אנו עושים זאת כדי למנוע מהטיית הצופים להשפיע על התוצאות. עכברים, במיוחד בתחילת הפגישה, מפגינים התנהגויות הקשורות לבריחה.
התנהגויות אלו כוללות ניסיון להגיע לדפנות המנגנון ולמוט המתלה, טלטולים חזקים של הגוף ותנועות של הגפיים הדומות לריצה. תנועות אלה מהוות בבירור ניידות. עם זאת, ככל שהבדיקה מתקדמת, התנועות הופכות עדינות יותר.
במעבדה שלנו איננו סופרים את התנועות הקטנות המוגבלות לרגליים הקדמיות, אלא ללא כל תנועה של הרגליים האחוריות כניידות. בנוסף למטוטלת זו, כמו נדנדות הנובעות מעליית המומנטום במהלך התקפי הניידות הקודמים אינן נחשבות לניידות. עכשיו בואו נראה את הניקוד של מבחן השעיית זנב בפועל.
זמן חוסר תנועה, לא זמן ניידות מדווח בדרך כלל. ניתן לחשב את זמן חוסר התנועה על ידי הפחתת זמן הניידות הכולל מזמן הבדיקה של 360 שניות. הבקיע. מבחן מתלי הזנב דורש אימון ותרגול.
חשוב לקבוע תקן מעבדה פנימי ולהכשיר צופים חדשים עד שיגיעו לרמת אמינות גבוהה. במאמר זה, אנו מסבירים כיצד לבצע ולתת ציון למבחן מתלי הזנב. בהצלחה בניסויים העתידיים שלך.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
מבחן השעיית הזנב הוא הליך התנהגותי מאושר המשמש להערכת היעילות האנטי-דיכאונית של טיפולים תרופתיים בעכברים. במהלך מבחן זה, עכברים תלויים בזנבותיהם למשך שש דקות, וההתנהגויות הקשורות לבריחה שלהם נרשמות.
The tail suspension test provides a standardized behavioral readout for evaluating antidepressant-like activity in preclinical models, supporting early-stage target validation and mechanistic de-risking of CNS-active compounds. By quantifying escape-oriented behaviors as a proxy for behavioral despair, the assay enables high-throughput screening of prospective therapeutics with predictive confidence in mood disorder indications. This assay informs go/no-go decisions in discovery pipelines by linking pharmacological modulation to quantifiable behavioral outputs relevant to antidepressant efficacy.
The tail suspension test fits within the discovery continuum from target hypothesis testing through lead identification to preclinical efficacy assessment, particularly for CNS depression indications where behavioral despair is a measurable endpoint.