Name: לטווח ארוך רעילות מבחן קטלני עם לסרטן הארטמיה franciscana /em (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 40 s
Description: למדו פרוטוקול לבדיקת רעילות קטלנית לטווח ארוך ב-Artemia franciscana. שיטה זו מאפשרת הערכת איכות סביבתית בחומרים כימיים ופסולת תעשייתית לאורך 14 יום.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

הופק על ידי Loredana Manfra של מכון המחקר להגנה על הסביבה (Ispra-מחלקת ניטור איכות הסביבה) ו פדריקה Savorelli של הסוכנות האזורית לאיכות הסביבה (Emilia-Romagna, איטליה). התייחסות חברי עבור קבוצת המשנה העבודה על הארטמיה לסרטן בקבוצת שיטות ביולוגיות - מים מלוחים / מים מליחים ומשקעים של ועדת UNICHIM על איכות המים (המכון הפעלה תקינה טכנית במגזר כימי). Videography ועריכה על ידי מרקו Pisapia של Ispra (יחידת האינטרנט). תיאום הפקה של אנה מריה קיקרו אריקה Magaletti של Ispra (מחלקת ניטור איכות הסביבה). אנו רוצים להודות הסוכנות האזורית לאיכות הסביבה של אמיליה, רומניה, פררה סניף, קבוצת שיטות ביולוגיות - מים מלוחים / מליחיםמים ומשקעים של ועדת UNICHIM על איכות המים לוסיאנה Migliore, Tor Vergata האוניברסיטה (רומא) על שיתוף הפעולה, Rossella Boscolo ו מאסימו Gabellini של Ispra (החוג למניעת הקלה של השפעות) על התמיכה הכספית, פאביו Matassa של לונדון בית הספר לשפות ברומא על התמיכה הלשונית שלהם.

<ol><li>Togulga, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Short-Term+Toxicity+of+Two+Toxicants+to+Artemia+Nauplii%5BTitle%5D)+AND+%22Tr.+J.+of+Zoology%22%5BJournal%5D)">The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii.</a> Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).</li>
<li>Persoone, G., Wells, P. G. Artemia in aquatic toxicology: a review. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPersoone%2C+G+%22Artemia+Research+and+its+Applications.+Morphology%2C+Genetics%2C+Strain+characterization+Toxicology%22">Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterization Toxicology</a>. Sorgeloos, P. , Universita Press. Belgium. 259-275 (1987).</li>
<li>Nunes, B. S., Carvalho, F. D., Guilhermino, L. M., Stappen, G. V. an <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+genus+Artemia+in+ecotoxicity+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Envir.+Poll%22%5BJournal%5D)">Use of the genus Artemia in ecotoxicity testing.</a> Envir. Poll. 144, 453-462 (2006).</li>
<li>APAT IRSA-CNR. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Metodi+analitici+per+le+acque+Manuali+e+Linee+guida+29%2F2003%22">Metodi analitici per le acque Manuali e Linee guida 29/2003</a>. Terzo Metodo, 8060(2003).</li>
<li>Sorgellos, P., Wielen, C. R. emiche-V. anD. er, Persoone, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+Artemia+nauplii+for+toxicity+tests+%C3%A2%E2%82%AC%E2%80%9C+a+critical+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotox.+Env.+Saf%22%5BJournal%5D)">The use of Artemia nauplii for toxicity tests â€“ a critical analysis.</a> Ecotox. Env. Saf. 2, 249-255 (1978).</li>
<li>Savorelli, F., Palazzi, D., Gorbi, G., Invidia, M., Sei, S., Magaletti, E., Manfra, L., Gelli, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Set+up+of+a+standard+methodology+for+14-day+bioassay+on+Artemia+franciscana+and+A.+parthenogenetica%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Amb%22%5BJournal%5D)">Set up of a standard methodology for 14-day bioassay on Artemia franciscana and A. parthenogenetica.</a> Biol. Amb. 21, 27-36 (2007).</li>
<li>Brix, K. V., Cardwell, R. D., Adams, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+toxicity+of+arsenic+to+the+Great+Salt+Lake+brine+shrimp%2C+Artemia+franciscana%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotox.+Environ.+Saf%22%5BJournal%5D)">Chronic toxicity of arsenic to the Great Salt Lake brine shrimp, Artemia franciscana.</a> Ecotox. Environ. Saf. 54, 169-175 (2003).</li>
<li>Brix, K. V., Deforest, D. K., Cardwell, R. D., Adams, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Derivation+of+a+chronic+site-specific+water+quality+standard+for+selenium+in+the+Great+Salt+Lake%2C+Utah%2C+USA%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Toxicol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Derivation of a chronic site-specific water quality standard for selenium in the Great Salt Lake, Utah, USA.</a> Environ. Toxicol. Chem. 23, 606-612 (2004).</li>
<li>Qualitá dell'acqua - Determinazione della tossicitá letale a 14 giorni con Artemia franciscana (Crustacea: Anostraca). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Commissione+UNICHIM+%22Qualit%C3%A1+dell%27acqua%22+Gruppo+di+Lavoro+%22Metodi+Biologici%22+Sottogruppo+%22Acque+salate%2Fsalmastre+e+sedimenti%22%22">Commissione UNICHIM "Qualitá dell'acqua" Gruppo di Lavoro "Metodi Biologici" Sottogruppo "Acque salate/salmastre e sedimenti"</a>. , UNICHIM. (2010).</li>
<li>Varo, I., Navarro, J. C., Amat, F., Guilhermino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+of+cholinesterases+and+evaluation+of+the+inhibitory+potential+of+chlorpyrifos+and+dichlorvos+to+Artemia+salina+and+Artemia+parthenogenetica%5BTitle%5D)+AND+%22Chem%22%5BJournal%5D)">Characterisation of cholinesterases and evaluation of the inhibitory potential of chlorpyrifos and dichlorvos to Artemia salina and Artemia parthenogenetica.</a> Chem. 48, 563-569 (2002).</li>
</ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

הארטמיה הוא אחד היצורים הבדיקה הערך הרב ביותר עבור בדיקות ecotoxicity מחקר שנעשה עד כה מאפשר לנו לקבוע כי אפשר לקיים מספר אפשרויות הקשורות לשימוש הארטמיה ב טוקסיקולוגיה Ecotoxicology. המאפיינים שהופכים את האורגניזם למין מתאימים bioassays הם: פיזור גיאוגרפי רחב, הסתגלות גבוהה לתנאי סביבה קשים וחומרים מזינים שונים, תרבות מעבדה פשוטה יחסית ותחזוקה, עמידות מניפולציה, מחזור חיים קצר, ייצור צאצאים גדול ואת קיומה של כמות ניכרת של מידע על מינים מסוימים. הביקורת נגד השימו...

הופק על ידי Loredana Manfra של מכון המחקר להגנה על הסביבה (Ispra-מחלקת ניטור איכות הסביבה) ו פדריקה Savorelli של הסוכנות האזורית לאיכות הסביבה (Emilia-Romagna, איטליה). התייחסות חברי עבור קבוצת המשנה העבודה על הארטמיה לסרטן בקבוצת שיטות ביולוגיות - מים מלוחים / מים מליחים ומשקעים של ועדת UNICHIM על איכות המים (המכון הפעלה תקינה טכנית במגזר כימי). Videography ועריכה על ידי מרקו Pisapia של Ispra (המדעית המייעצת שירותי תיעוד). תיאום הפקה של אנה מריה קיקרו אריקה Magaletti של Ispra (מחלקת ניטור איכות הסביבה). אנו רוצים להודות הסוכנות האזורית לאיכות הסביבה של אמיליה, רומניה, סניף פרארה Biologקבוצת שיטות iCal - מים מלוחים / מים מליחים ומשקעים של ועדת UNICHIM על איכות המים על שיתוף הפעולה, Rossella Boscolo ו מאסימו Gabellini של Ispra (החוג למניעת הקלה של השפעות) על התמיכה הכספית, ובית הספר בלונדון של שפות ברומא על התמיכה הלשונית שלהם. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר מוצר </td></tr><tr><td> Dodecyl סודיום סולפט </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> L4390 </td></tr></tbody></table> נספח התקשורת אצות צריך להיות מוכנים באמצעות ריאגנטים איכות אנליטיות. ליטר של פתרון מזין מוכן ידי המסת 300 גר &#39;3 Nano, 30 גר&#39; גר &#39;קרן היסוד PO 4 ו -20 של 2 Cl 4 NH במים מזוקקים. ארבעת הפתרונות הראשונים (A, B, C, D) של מינרלים מוכנים כדלקמן: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליטר של פתרון &quot;&quot; המכיל 30 גרם של ZnSO 4 H 2 O, 25 גרם של CuSO 4 5 H 2 O, 30 גרם של COSO 4 7 H 2 O ו - 20 גרם של MnSO 4 H 2 O במים מזוקקים; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליטר של פתרון &quot;B&quot; המכילה 50 גרם של FeCl 3 • 6 H 2 O במים מזוקקים; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליטר של פתרון &quot;C&quot;, המכיל 25 גרם של Na 2 מו 4 • 2 H 2 O במים מזוקקים; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליטר של פתרון &quot;D&quot; המכיל 50 גרם די Na 2 EDTA • 2 H 2 O במים מזוקקים. </li></ul> ליטר של הפתרון הסופי של מינרלים (פתרון &quot;E&quot;) מתקבל על הוספת aliquots של הנ&quot;ל פתרונות מים מזוקקים. לפי הסדר הבא של בנוסף מומלץ: 100 מ&quot;ל של פתרון &quot;D&quot;, 10 מ&quot;ל של פתרון &quot;C&quot;, 10 מ&quot;ל של פתרון &quot;B&quot; ו - 10 מ&quot;ל של פתרון &quot;&quot;. שלושה initiaאני פתרונות (F, G, H) של ויטמינים מוכנים כדלקמן: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליטר של פתרון &quot;F&quot; המכיל 100 מ&quot;ג של ביוטין במים מזוקקים; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליטר של פתרון &quot;G&quot;, המכיל 10 גרם של תיאמין במים מזוקקים; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליטר של פתרון &quot;H&quot; המכיל 100 מ&quot;ג של cobalamin במים מזוקקים. </li></ul> ליטר של הפתרון הסופי של ויטמינים (פתרון &quot;אני&quot;) מתקבל על הוספת 10 מ&quot;ל של שלושת הפתרונות הראשונים למים מזוקקים. ליטר של מדיה אצות מכינים על ידי המסת 1 מ&quot;ל של פתרון מזין, 1 מ&quot;ל של תמיסת מינרלים האחרון (פתרון &quot;E&quot;) ו - 1 מ&quot;ל של תמיסת ויטמין האחרון (פתרון &quot;אני&quot;) במי ים. האחרון זה ניתן לקבל גם באמצעות המסת חומרים כימיים המוכרים איכות אנליטיות או ניסוח זמינים מסחרית במים מזוקקים או דה מיונן. תערובות מלח ליצירת מים מלוחים אידיאלי זמינים באופן מסחרי, למשל, את תערובות האוקיינוס ​​מיידיות. זה recommended באמצעות מי ים עם מליחות של 30 (± 2) PSU וטמפרטורה של 20 (± 1) ° C.

לטווח ארוך רעילות מבחן קטלני עם לסרטן הארטמיה franciscana</em

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

פעילויות המחקר שלנו למקד את השימוש בשיטות ביולוגיות לצורך הערכה של איכות הסביבה, תוך התייחסות מיוחדת מים מלוחים / מים מליחים ומשקעים. הבחירה של אינדיקטורים ביולוגיים חייב להיות מבוסס על ידע מדעי אמין, אולי, על זמינותם של נהלים אחידים. במאמר זה, אנו מציגים פרוטוקול סטנדרטי המשמש לסרטן ימית הארטמיה להעריך את רעילות של כימיקלים ו / או של מטריצות הסביבה הימית. המדענים מציעים כי ארטמיה (הארטמיה) הוא המועמד המתאים לפיתוח המבדק תקן ניצול ברחבי העולם. מספר מאמרים פורסמו על ההשפעות הרעילות של כימיקלים שונים על toxicants ארטמיה (הארטמיה). היתרון הגדול של לסרטן זה ללימודים רעילות הוא הזמינות הכללית של ציסטות יבשים אלה יכולים לשמש מיד בבדיקת וטיפוח קשה לא דרש <sup&gt; 1,2. ציסטה על בסיס מבחני רעילות הם זולים, זמינים באופן רציף, פשוטה ואמינה והם ולכן התשובה חשובה לצרכים שגרתיים של ההקרנה רעילות, דרישות ניטור תעשייתיים או למטרות רגולטוריות 3. השיטה המוצעת כרוך בתמותה כנקודת הסיום. המספרים של ניצולי נספרו ואחוז מקרי מוות חושבו. הזחלים נחשבו מתים אם הם לא מפגינים כל תנועה פנימית או חיצונית במהלך כמה שניות של התבוננות 4. הליך זה היה בדיקה סטנדרטית חומר ייחוס (Dodecyl נתרן גופרתי), כמה תוצאות מדווחים עבודה זו. מאמר זה מלווה בסרטון המתאר את ביצוע בדיקות רעילות פרוצדורלי, מראה את כל השלבים הקשורים בפרוטוקול.

מחקר זה עוסק בפיתוח סטנדרטיזציה של פרוטוקול מתודולוגית חשוב לקבוע לטווח ארוך (14 יום) רעילות קטלני המופעל על ידי חומרים כימיים, שפכים תעשייתיים או ביוב דגימות סביבתיות נוזליים על לסרטן מים מלוחים,<em&gt; הארטמיה franciscana</em&gt;.

פעילויות המחקר שלנו מתמקדות בשימוש בשיטות ביולוגיות להערכת איכות הסביבה, תוך התייחסות מיוחדת למי מלח/מי מעמקים...

אנחנו לורה מנפרה ופדריקה סלי, חוקרות מהמכון הגבוה להגנת הסביבה ומחקר, ISRA, מהמחלקה של מעבדה לניטור איכות הסביבה של פיטופלנקטון, אקו-טוקסיקולוגיה ואקולוגיה. פעילויות המחקר שלנו מתמקדות בשימוש בשיטות ביולוגיות להערכת איכות הסביבה, תוך התייחסות מיוחדת למי מלח, מים מליחים ומשקעים. המחקר האחרון שלנו עוסק בפיתוח ותיקוף של פרוטוקול מתודולוגי בעל ערך לקביעת רעילות קטלנית ארוכת טווח של 14 ימים המופעלת על ידי חומרים כימיים, פסולת תעשייתית, שפכים, או דגימות סביבתיות נוזליות על סרטן מי המלח artia Franciscan.סרטון זה מתאר את ביצוע בדיקת רעילות פרוצדורלית. הבדיקה שלנו כוללת חשיפה של זחלי artia לטווח של ריכוזי חומרים או לדגימה לבדיקה, במטרה לקבוע את רמות הריכוז או הדילול שיגרמו למותם של 50% מהאורגניזמים שנחשפו לאורך 14 ימים, תוך עמידה בתנאים המוגדרים בשיטה זו. במידה ויהיה צורך והדבר יתאפשר, ניתן יהיה לקבוע גם את הפרמטרים הבאים.רמת הריכוז הגורמת למותם של 20% מהאורגניזמים החשופים היא רמת הריכוז הגבוהה ביותר שנותחו ולא קבעה שיעור תמותה גבוה יותר מזה של הביקורת השלילית, רמת הריכוז הנמוכה ביותר שנבדקה שקבעה לאחר 14 ימים שיעור תמותה גבוה יותר מזה של הביקורת השלילית. לצורך ביצוע הבדיקה, הצוות שלנו נזקק לזחליים של Franciscan בני פחות מ-48 שעות בשלב שני או שלישי, שהושגו מביצים שבקעו לאחרונה. ניתן להשתמש במי מלח סינתטיים כמים לדילול, על ידי המסה של ריאגנטים באיכות אנליטית מוכרת או פורמולציה זמינה מסחרית במים מזוקקים או דה-יוניים.לאחר שקיטור למשך 48 שעות וסינון במסננים בעלי נקבוביות של לפחות 0.45, ניתן לשמר את הדילול למשך מקסימום 30 יום בחושך. בטמפרטורה של ארבע מעלות צלזיוס, יש להזין את אורגיזמי הבדיקה מיקרואצות Ella Ter, הגדלות באופן מעריכי בצפיפויות שבין 1.3*10⁶ ל-2.0*10⁶ תאים למילליליטר. החומר הייחוס בבדיקה זו הוא sodium dodecyl sulfate.בנוסף לציוד המעבדה הרגיל, תזדקקו גם למכלי הבדיקה הבאים, הכוללים ביכריות זכוכית בורוסיליקט של 100 מיליליטר, בקבוק של 500 מיליליטר להכנת תמיסת הסטנדרט, שישה בקבוקים של 100 מיליליטר להכנת תמיסות הבדיקה, צלחות פטרי מקוצצות מזכוכית או פולימר בקוטר של 5 סנטימטר עם מכסים נשלפים לשימוש להפעלת הציסטות ולהעברת ה-artia מכלית הבקיעה למכלי הבדיקה. פיפטות פסטור מזכוכית, שקצותיהן עוגלו באמצעות להבה, להעברת ה-noli, או פיפטות פלסטיק חד-פעמיות של 3 מיליליטר שניתן לחתוך להעברת ה-artia, מיקרופיפטות ופיפטות מדורגות להכנת תמיסות הבדיקה. שישה משורבבים מדורגים של 50 מיליליטר להעברת תמיסות הבדיקה מהבקבוקים למכלי הבדיקה לצורך יצירת אורגניזמי הניסוי.48 שעות לפני הבדיקה, הניחו 20 milligrams של ציסטות בתוך צלחת פטרי המכילה 12 milliliters של מי דילול. החזיקו את הצלחת בטמפרטורה של 25 degrees ובעוצמת תאורה של 4,000 lumens למטר רבוע למשך שעה אחת. לאחר 24 שעות, העבירו את הלרבות הבוקעות לצלחת פטרי חדשה המלאה במי ברז סינתטיים.בצע את ההעברה באמצעות המיקרוסקופ תוך שימוש במקור אור, כך שהזחלים הפוטוטרופיים הבוקעים ינדדו לעבר קרן האור. השתמש בפיפט פסטורי מזכוכית לביצוע ההעברה, תוך הבטחה שאתה מעביר רק את הזחלים הצעירים ולא את הציסטות עצמן או זחלים שעדיין נמצאים בתוך קרומים. הנח את הצלחת המכילה את הזחלים בתא תרמוסטטי חשוך למשך 24 שעות נוספות בטמפרטורה של 25 degrees.יש להכין את תמיסת הסטנדרט עבור חומר הבדיקה על ידי המסה של חצי גרם מהחומר בבקבוק נפח של 500 מיליליטר. יש למלא במים דה-יוניים או מזוקקים ולערבב עד להמסה מלאה. יש להכין את התמיסות בעת השימוש, אלא אם כן אינו ידוע אם החומר יציב בתמיסה.במקרה זה, ניתן להכין את תמיסת הסטנדרט עד יומיים לפני הבדיקה. יש להכין את בקרת השלילה בבקתלה של 200 מיליליטר על ידי הוספת כמות נאותה של תרחיף אצות למי דלילול, כך שיתקבל צפיפות של 10⁵ תאים למיליליטר. יש להכין את תמיסות הבדיקה בבקתלות של 100 עד 500 מיליליטר על ידי הוספת תמיסת הסטנדרט למי הדלילול בכמות המצוינת, כדי לקבל את הריכוזים הרצויים לבדיקה.להאכלת האורגניזמים, יש להשתמש בתרחיף מיקרואצות מסוג duna teta, ולהוסיפו בעת הכנת תמיסות הבדיקה עד להשגת צפיפות של 10⁵ תאים למליליטר. לפני התחלת העבודה, אנו ממליצים להקפיד על סדר ההוספה הבא: דליל, מים, תרחיף אצות, ולאחר מכן תמיסת סטנדרט. העבירו כמויות שוות של 50 milliliters של תמיסות הבדיקה אל מכלי הבדיקה באמצעות משורה.הכינו שלוש חזרות לכל ריכוז עבור כל סדרת בדיקות. הכינו כלי בקרה המכיל כמות של מי מדולול השווה לנפח של תמיסות הבדיקה. העבירו נפחים שווים של כ-12 milliliters של תמיסות הבדיקה אל צלחוני הפטרי.עבור כל סדרת בדיקות, הכינו פטריית ביקורת. 48 שעות לאחר הפעלת הציסטות, ה-nly יגיעו לשלב הלרבלי השני והשלישי וכעת הםים שמיים לבדיקה. הוציאו את פטריית הפטריה שבה השתמשתם להפעלת הציסטות מהתא התרמוסטטי.העבירו כמות קטנה של זחלים אל פטריות הפטרי המכילות את תמיסות הביקורת והבדיקה. בשלב זה של הניסוי, ניתן לבצע את ההעברה באמצעות פסט פייפ (past pipe) מזכוכית, שקצתו עוגלה באמצעות להבה, ובסיוע מקור אור הממוקם באופן צדי המעודד את ה-artia להתרכז. העבירו 10 זחלים מתמיסות הבדיקה.העבירו את צלחות הפטרי למכלי הבדיקה. כמו כן, בצעו פעולה זו באמצעות הפ pipette והכיסוי של המיקרוסקופ; כסו את כוסות הבדיקה בפרפיליה, תוך השארת מרווח למעבר אוויר, ושמרו אותן בטמפרטורה של 25 מעלות לאורך כל משך הבדיקה. והשאירו אותן בתאורה של 900 לומן למטר רבוע, ביחס של 14 שעות אור ל-10 שעות חשיכה, החל מיומיים מתחילת הבדיקה.לאחר מכן, בימים ה-5, 7, 9 ו-12, יש לבחון את ה-artia תחת המיקרוסקופ ולאמת את שיעור ההישרדות שלהם. החלפת המצע והתוספת המזונית; אורגניזמים שאינם מראים תנועה כלשהי במשך כ-10 שניות ייחשבו למתים במהלך הבדיקה. עליך להחליף באופן תקופתי את תמיסות הבדיקה, ולהכינן אותן באותו היום שבו הן אמורות לשמש לבדיקה. עליך להחליף באופן תקופתי את תמיסות הבדיקה, ולהכינן אותן באותו היום שבו הן אמורות לשמש.הכינו את תמיסות הבדיקה מתמיסת הסטנדרט שהכנתם קודם לכן. בצעו את ההעברה בשיטת ARTIA באמצעות פיפט EPI PET בעל קוטר רחב מספיק כדי לא לפגוע באורגניזמים במהלך שלב זה. ניתן להשתמש בפיפט פלסטיק בקוטר שלושה מילימטרים אותו ניתן לחתוך לאחר 14 ימי חשיפה.בסיום הבדיקה, ספרו את מספר הזחלים ששרדו ודווחו על התוצאה בגיליון העבודה שלכם. חשבו את ה-lc 50 ו/או lc 20, את ה-NOEC וה-LOEC ביום ה-14 ודווחו על ערכיהם. גבולות סמך של 95% היו מתאימים, וכן שיטות החישוב.אם בסיום הבדיקה התקיימו התנאים הבאים: שיעור התמותה הממוצע בביקורות הוא 20% או פחות, וה-lc 50 לאחר 14 ימים נכלל בטווח של 8.0 milligram liter בשימוש ב-sodium doda cell sulfate. אם התנאים הללו לא התקיימו, כל הנתונים שהתקבלו עם אותה סדרת אורגניזמים ייחשבו כבלתי תקפים ויש לחזור על הבדיקה.

long-term-lethal-toxicity-test-with-the-crustacean-artemia-franciscana

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

סרטון זה מציג בדיקת הישרדות לטווח קצר שבודקת טיפול ברעילות חריפה או בודקת זן גנטי לעמידות למצב רעיל. הפרוטוקול לדוגמה מציג בדיקת הישרדות לדוגמה שבה תולעים נבדקות על יכולתן להתנגד לעקה חמצונית הנגרמת על ידי פרקוואט (PQ).

ג. אלגנס בדיקת הישרדות: מבחן רעילות לטווח קצר

פרוטוקול מתואר לזיהוי in vivo של השפעות של מעכבי מיטוכונדריה באורגניזם המודל Caenorhabditis elegans ולזיהוי תרכובות משפרות פוטנציאליות. ניתן להשתמש בפרוטוקול זה כדי לסנן ספריות תרופות עבור תרכובות המווסתות את תפקוד המיטוכונדריה.

Screenable<em&gt; In vivo</em&gt; Assay עבור מיטוכונדריאלי מאפנני שימוש הטרנסגניים Bioluminescent<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

חשיפה חשיפה לרעלים סביבתיים יכולים להשפיע בחריפות פיתוח עם השפעות ארוכות טווח. פרוטוקולים מפורט ניתנים כדי להמחיש אסטרטגיה באמצעות מודל מעבדה יעילה כדי לחקור את ההשפעה של חשיפה מוקדמת עובריים ביספנול איי אנו מספקים פוריות, מבחני התנהגות לעקוב אחר האפקטיביות של הביו-מבחני שלנו החשיפה toxicant.

השלכות התנהגותיות, הרבייה לטווח ארוך של חשיפה עובריים חשיפה לרעלים במינון נמוך

בעבודה זו, אנו מתארים של bioassay אקוטית, כרונית, multigenerational ללמוד את ההשפעות של לחצים יחיד ומשולבים על דגים גמבוזיים טורקיז Nothobranchius furzeri. פרוטוקול זה תוכנן כדי ללמוד היסטוריה-החיים תכונות (התמותה, צמיחה, פוריות, משקל) ומקסימום תרמי קריטי.

פרוטוקול עבור סימן ובדיקות כרונית Ecotoxicity של דגים גמבוזיים טורקיז Nothobranchius furzeri

ב פרוטוקול זה, אנחנו מדגימים כיצד להתרבות Astyanax mexicanus מבוגרים, להעלות את הזחלים, לבצע כל-הר אימונוהיסטוכימיה על פוסט-זחל דגים כדי להשוות על הפנוטיפים של השטח, מערת morphotypes.

גידול של טטרה מקסיקנית Astyanax mexicanus עבור ניתוח של Post-larval פנוטיפים ואת כולה-הר אימונוהיסטוכימיה

עוברי דג משמשים להערכת הרעילות של תרכובות כימיות. הם מפתחים מבחוץ ורגישים לכימיקלים, ומאפשרים זיהוי של שינויי פנופאיות עדינים. הניסוי דורש רק כמות קטנה של תרכובת, אשר מתווסף ישירות לצלחת המכילה עוברים, מה שהופך את מערכת הבדיקה יעילה וחסכונית.

הערכה מהירה של רעילות של תרכובות כימיות באמצעות עוברי הדגים Zebrafish

עבודה זו נועדה להעריך ולסקור את הליך הבדיקה הביולוגית של Artemia salina קטלניות, המזוהה גם כבדיקת קטלניות של שרימפס מלח. שיטה פשוטה וזולה זו נותנת מידע על הרעילות הכללית (הנחשבת להערכת רעילות ראשונית) של דגימות, כלומר, מוצרים טבעיים.

קטלניות ביואסאי באמצעות ארטמיה סלינה L.

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לתרבית נמטודות בודדות על מדיה מוצקה למעקב אחר פרמטרים פיזיולוגיים לכל החיים וכימות פלואורסצנטי. מערכת תרבית זו כוללת מחסום חומצה פלמיטית סביב בארות תולעים בודדות כדי למנוע מבעלי חיים לברוח, ומאפשרת שימוש בהתערבויות מרתיעות, כולל חיידקים פתוגניים וגורמי עקה כימיים.

תרבות ארוכת טווח של Caenorhabditis elegans בודדים על מדיה מוצקה לניטור פלואורסצנטי אורכי והתערבויות מרתיעות

המאמר מציע שיטה חדשה במבחנה להערכה מהירה ורגישה של הרעילות והרעילות האקולוגית של מזהמים, המבוססת על התנועתיות של המוציטים Mytilus galloprovincialis . השיטה נועדה לתרום לפיתוח בדיקות חשיפה טוקסיקולוגיות ואקוטוקסיקולוגיות אתיות ורגישות יותר.

בדיקה טוקסיקולוגית ואקוטוקסיקולוגית המבוססת על תנועתיות המוציטים של מולים (Mytilus galloprovincialis)

פרוטוקול זה מתאר הליך סינון תרופות בזחלי זברה 3-7 ימים לאחר ההפריה ואחריו הערכה מורפולוגית.

בדיקת מולקולות קטנות ובדיקת רעילות בזחלי דגי זברה בשלב מוקדם

למדו פרוטוקול לבדיקת רעילות קטלנית לטווח ארוך ב-Artemia franciscana. שיטה זו מאפשרת הערכת איכות סביבתית בחומרים כימיים ופסולת תעשייתית לאורך 14 יום.

לטווח ארוך רעילות מבחן קטלני עם לסרטן הארטמיה franciscana

גלה סרטונים נוספים