תובלת pneumococcal אנוש ניסויית

מטרת הליך זה היא לבסס הובלה ניסיונית של פנאומוקוק אנושי. זה מושג על ידי דילול וכימות החיידקים בחיסון. בשלב השני, המתנדב מחוסן דרך האף בסטרפטוקוקוס פנאומוניה.

לאחר מכן, המתנדב עובר שטיפת אף בימים השני, השביעי וה-14 לאחר החיסון. לבסוף, מיקרוביולוגיה קלאסית משמשת כדי לקבוע אם המתנדב נושא את התפוס המחוסן. בסופו של דבר, ניתן להשיג הובלה ניסיונית של פנאומוקוק אנושי בשיטה בטוחה וניתנת לשחזור זו.

היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני דגמי עגלות עכברים קיימים הוא שטכניקה זו מציעה מודל של הובלה במארח הטבעי של הפנאומוקוק האנושי. יתר על כן, שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הפנאומוקוק, כגון מהם המתאמים האימונולוגיים של הגנה? מהי ההשפעה המחסנת של הובלה, ומהי ההשפעה של לחץ המארח על הפתוגן בנישת האף-לוע?

היישומים של טכניקה זו כוללים את השימוש בה כשיטה לבחירת חיסונים חדשים נגד פנאומוקוק. אנו מתכננים להשתמש במניעת הובלה כתחליף לחסינות הנגרמת על ידי חיסון. המדגימות את הטכניקה הקלינית יהיו האחות אנג'י רייט והאחות האחראית דיוויד שו.

30 דקות לפני התור המתוכנן לחיסון המתנדב באמצעות צינור מלאי חיסון שנלקח מהמקפיא במינוס 80 מעלות צלזיוס. לאחר מכן סובב את החיסון במיקרו צנטריפוגה למשך שלוש דקות ב-17,000 פעמים. G, בזמן שהצינור מסתובב, חממו כמה צלחות אגר דם באינקובטור של 37 מעלות צלזיוס.

לאחר מכן מוציאים את סאטה המרק מחיסון הצנטריפוגה, ושוטפים את הגלולה במיליליטר אחד של מי מלח. חזור על שלב הצנטריפוגה והכביסה. בצע ערכת דילול לריכוז החיסון הרצוי, ולאחר מכן כמת את כמות החיידקים בחיסון בשיטה דמוית קילומטר ומיסרה.

המושבות הגדולות ייראו למחרת. קח את החיסון למתנדב שצריך לשבת בנוחות בתנוחת שכיבה למחצה. לאחר מכן באמצעות קצות סינון P 200 וסטריליים.

משכו 100 מיקרוליטר של החיסון לתוך קצה הפרפה, והכניסו את הקצה ממש לתוך חלל האף. הוצא לאט את החיסון אל רירית האף בתנועה סיבובית. אל תניח את קצה הפיפטה רחוק מדי לאחור, אחרת החיסון יזרום במורד הגרון.

חזור על החיסון עבור הנארי השני כדי למנוע כניסת חיידקים לזרם הדם. היזהר לא לשבש את הרירית עם הפיפטה. לאחר מכן בקש מהמתנדב להישאר במצב שכיבה למחצה למשך 10 דקות כדי לאפשר לחיידקים להתפזר על פני הרירית.

לאחר מתן החיסון למתנדבים, חזור על כימות החיידקים במעבדה. לאחר מכן סמן את השפופרת עם התאריך ומינון החיסון, ואחסן את החיסון במינוס 80 מעלות צלזיוס. לפני תחילת שטיפת האף, בקש מהמתנדב לשבת בנוחות כשהראש מוטה לאחור 30 מעלות מהאנך.

לאחר מכן בקשו מהמתנדב לקחת נשימה עמוקה תוך כדי דחיפה של הלשון למעלה ואחורה כנגד תקרת הפה. בקש מהמתנדב לאותת כאשר עמדה זו מושגת. כעת שטפו את חלל האף ארבע פעמים עם 20 מיליליטר מי מלח, ושחררו חמישה מיליליטר של מי מלח בכל פעם לחלל האף הקדמי.

בקש מהמתנדב להישען מיד קדימה ולנשוף במהירות דרך האף לתוך קערת נייר כסף כדי להוציא את הנוזל לאחר כל שטיפה של חמישה מיליליטר מי מלח. לאחר שטיפת חלל האף עם ארבעת 20 מיליליטר, משוך את כל הדגימות שנאספו יחד בצינור צנטריפוגה. כעת צנטריפוגה את דגימות שטיפת האף המתנדבות למשך 10 דקות ב-3, 345 פעמים G.הסר את הסופין ואחסן אותו כמיליליטר אחד בצינורות einor מסומנים במינוס 80 מעלות צלזיוס.

הוסף 100 מיקרוליטר של מדיום STGG לגלולה וערבב היטב, ולאחר מכן קבע את הנפח הכולל בצינור. הצלחת הבאה, טיפה של 20 מיקרוליטר של הכדור התלוי על צלחת אגר דם המכילה גנטמיצין ופסים את כל הצלחת. אם שטיפת האף היא לאחר חיסון, השתמש ב-10 מיקרוליטר של ה-STGG המכיל את הגלולה המושהה.

לכימות חיידקים בשיטת מיילים ומיסרה, הוסיפו עוד 800 מיקרוליטר של STGG לצינור שטיפת האף וערבבו היטב. לאחר מכן צלחו 25 מיקרוליטר מתמיסת תאי חיידקי STGG על צלחת אגר דם אחרת ו -25 מיקרוליטר על צלחת אגר שוקולד, תוך פסים של כל שתי הצלחות. לאחר מכן הקפיאו את החיידקים הנותרים בשני בקבוקוני קריו במינוס 80 מעלות צלזיוס.

דגרו על צלחות של 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה ב-5% פחמן דו חמצני. למחרת, בדוק את הלוחות לאיתור פנאומוקוק ופתוגנים נשימתיים פוטנציאליים אחרים. צלחות אגר דם, מחוסנות בשטיפות אף יכולות להיות קשות לקריאה.

התמונה הזו מציגה דוגמה של צלחת שקל לקרוא עם פנאומוקוק שנראה בבירור. צלחת זו, לעומת זאת, מכילה צמחייה משותפת רבה המקשה על הקביעה אם פנאומוקוק נוכחים בכל פגישה. המתנדבים התבקשו לתאר תסמינים בדרכי הנשימה העליונות אם הם קיימים, והודגשה השוואה בין נשאים ללא נשאים.

מתוך 145 האנשים שחוסנו לאחרונה בפנאומוקוק, 28 התלוננו על תסמינים כפי שמסוכם בטבלה זו. שמונה מהמתנדבים הללו היו נושאי מטוסים, 20 לא. כל התלונות נבדקו על ידי ועדת הבטיחות החיצונית ולאחר חקירות מלאות.

לא יוחסו תסמינים למחלת פנאומוקוק. התסמינים השכיחים ביותר היו כאב גרון, אף סתום ומחלה דמוית שפעת. בזמן ניסיון הליך זה, חשוב שתהיה תוכנית בטיחות יסודית מאוד, המכסה כל שלב בשיטה, במיוחד לבטיחות המתנדבים.

לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להקים עגלת פנאומוקוק אנושית ניסיונית, ולזהות עגלה באמצעות שטיפת אף.