Name: Electroporation האזור Subventricular ילודים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-02-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 6 s
Description: למדו טכניקת אלקטרופורציה באזור תת-חדרי בגורים לתיוג ומניפולציה גנטית של תאי גזע עצביים. שיטה זו מאפשרת חקר מהיר ויעיל של נוירוגנזה ודינמיקת התפתחות תאי עצב.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים ממשרד ההגנה (פרס פיתוח רעיון, W81XWH-10-1-0041, א.ב.), CT תאי גזע המענק (א.ב.), והמכון לאומי לבריאות NRSA 10668225 (DMF). החומר זה מבוסס על העבודה הנתמכת בחלקו על ידי מדינת קונטיקט במסגרת התכנית לקונטיקט לתאי הגזע למחקר המענקים. התוכן שלה הוא באחריות בלעדית של הכותבים ואינם מייצג בהכרח את עמדתה הרשמית של מדינת קונטיקט, המחלקה לבריאות ציבור של מדינת קונטיקט או CT חידושים, Inc הממנים לא היו כל תפקיד בתכנון מחקר, איסוף נתונים וניתוח, החלטה לפרסם, או הכנה של כתב היד.

הליך זה בהתאם לדרישות ייל IACUC. מדענים צריכים לוודא שהנחיות IACUC מאושרות ואחריו על פי הדרישות המוסדיות שלהם. 1. סעיף 1. הכנת דנ&quot;א, פתרונות, וזכוכית פיפטות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צור טוהר גבוה (OD 260/280&gt; 1.80) ריכוז גבוה (מיקרוגרם / μl&gt; 2.5) אנדוטוקסין נטול ה-DNA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן תמיסת מלח 0.9% ומסנן סטרילי דרך מסנן מיקרומטר 22. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 10 צינורות Place סנטימטר אש מלוטשים ורוסיליקט זכוכית נימים (OD: 1.5 מ&quot;מ, מזהה: 1.10 מ&quot;מ) למודל PP-830-10 Narishige מחשב זכוכית פיפטה חולץ עם חוט kanthal. הגדר חולץ למשיכת צעד אחד משוקללת ב70.5 מעלות צלזיוס לשבור טיפים עם מלקחיים מעגליים ולבדוק תחת מיקרוסקופ לנתח לקצוות משוננים. טיפי שיפוע ומקום תחת מנורת UV במשך 15 דקות. pipettes משך צריך להיות מסומן ב 2 מ&quot;מ מהקצה של הקצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 0.1% משקל / נפח המהיר הירוק solutiעל ידי ערבוב פתרון סטרילי מסונן 0.9% עם מלח ירוק מהיר יבשה. </li></ol> 2. סעיף 2. הכנת בעלי חיים, זכוכית פיפטה טוענת והזרקת פלסמיד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר יום לאחר לידה בנפרד 0-1 גורים מכלובים, מקום על צלחת פטרי זכוכית מראש צוננת עד 4 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן מקום על קרח רטוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כ 5 דקות, לקבוע את המצב של הרדמה על ידי ניצול את תגובת דחק הרגל. אם אין תנועה מתרחשת, גורי בכפוף להזרקה תוך חדרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשוב לציין כי שילוב של ירוק מהיר, ה-DNA, ותמיסת מלח יכול לגרום לאידוי מהיר, התגבשות, ומצור על pipettes זכוכית. לכן, לייצר פתרון מניות ו1-2 μl aliquot על parafilm מייד לפני זריקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשאוב נפח aliquoted כל עם הכוס טפטפה משך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את הראש של הגור בין אגודל ואצבע המורה של היד הדומיננטית פחות שלך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל מנורהד להחזיק את הראש של גור, ממש מחוץ לאלומת אור. במידת צורך, לשים מלח על ראש כדי להפחית את כמות האור מוחזר על ידי גור. חדרי הלב עכשיו צריכים להיות מוארים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם היד הדומיננטית שלך, הכנס את המחט לתוך חלל רוחב הקרוב אליך (האיור 1A ו-1B). במקום הזרקה צריך להיות כ מרחק שווה מהתפר והעין ו2 מ&quot;מ לרוחב כדי תפר sagittal lambdoid. הכנס משכתי פיפטה לסימן המ&quot;מ 2 עבור P0 גור, שאמור להבטיח חדירה לתוך חלל הרוחב. בצירוף מקרים, אתה עשוי לראות חזרה של מילוי CSF לתוך פיפטה משחרור לחץ תוך גולגולתי. כדי להפחית את לחץ תוך גולגולתי, המסייע בהזרקה של פלסמיד, לשחרר את האחיזה שלך על ראש pup.Step 2.8. להזריק כ -0.5 μl של פלסמיד לתוך חדר לב לרוחב באמצעות הזרקת אוויר בלחץ (Picospritzer, פארקר). </li></ol> 3. סעיף 3. Electroporation ושחזור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Seלא המתח של הגנרטור electroporation במשך 5 פולסים מרובעים, 50 msec / דופק של 100 וולט, עם 950 מרווחי msec. הסגולי המרחבי של electroporation פלסמיד מוכתב על ידי הכיוון של העברת תשלום. תשומת לב צריכה להינתן למיקום נתון ההטרוגניות של אוכלוסיות תאי גזע לאורך SVZ 8. הבדלים בשיעורי התפשטות וגורל תא זוהו למקומות גחון גב וזנב מקוריים-9,10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע פלסמיד מוזרקת, לטבול אלקטרודות פינצטה לתוך PBS. צעד זה הוא למקסם את העברת תשלום וכדי למנוע כוויות שנגרמו על ידי התנגדות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את האלקטרודה החיובית על הקיר לרוחב הגב של הגור ליד אוזן ipsilateral לאתר של הזרקת פלסמיד (האיור 1C ו1D). הנח את האלקטרודה השלילית על רוחב גחון ההמיספרה נגדית לחוטמו של הגור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליזום העברה נוכחית על ידי לחיצה על רגלי הדופקמכשפת דוושה ולסחוף את האלקטרודות מהגבה לרוחב באמצעות ~ 25 ° מרווחי זווית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקום electroporated גורים על כרית חימום למשך 5 דקות. בעדינות לסובב גורים בכל 30 שניות עם גירוי קל. </li></ol>

<ol><li>Kriegstein, A., Alvarez-Buylla, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+glial+nature+of+embryonic+and+adult+neural+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The glial nature of embryonic and adult neural stem cells.</a> Annual Review of Neuroscience. 32, 149-184 (2009).</li>
<li>Imayoshi, I., Sakamoto, M., Kageyama, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+methods+to+identify+and+manipulate+newly+born+neurons+in+the+adult+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Genetic methods to identify and manipulate newly born neurons in the adult brain.</a> Frontiers in Neuroscience. 5, 64(2011).</li>
<li>LoTurco, J., Manent, J. B., Sidiqi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+and+improved+tools+for+in+utero+electroporation+studies+of+developing+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">New and improved tools for in utero electroporation studies of developing cerebral cortex.</a> Cereb Cortex. 19, Suppl 1. i120-i125 (2009).</li>
<li>Tabata, H., Nakajima, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+in+utero+gene+transfer+system+to+the+developing+mouse+brain+using+electroporation%3A+visualization+of+neuronal+migration+in+the+developing+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Efficient in utero gene transfer system to the developing mouse brain using electroporation: visualization of neuronal migration in the developing cortex.</a> Neuroscience. 103, 865-872 (2001).</li>
<li>Boutin, C., Diestel, S., Desoeuvre, A., Tiveron, M. C., Cremer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+in+vivo+electroporation+of+the+postnatal+rodent+forebrain%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Efficient in vivo electroporation of the postnatal rodent forebrain.</a> PloS ONE. 3, e1883(2008).</li>
<li>Chesler, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+gene+expression+by+postnatal+electroporation+during+olfactory+interneuron+nurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Selective gene expression by postnatal electroporation during olfactory interneuron nurogenesis.</a> PloS ONE. 3, e1517(2008).</li>
<li>Platel, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NMDA+receptors+activated+by+subventricular+zone+astrocytic+glutamate+are+critical+for+neuroblast+survival+prior+to+entering+a+synaptic+network%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">NMDA receptors activated by subventricular zone astrocytic glutamate are critical for neuroblast survival prior to entering a synaptic network.</a> Neuron. 65, 859-872 (2010).</li>
<li>Alvarez-Buylla, A., Kohwi, M., Nguyen, T. M., Merkle, F. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heterogeneity+of+adult+neural+stem+cells+and+the+emerging+complexity+of+their+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Symposia+on+Quantitative+Biology%22%5BJournal%5D)">The heterogeneity of adult neural stem cells and the emerging complexity of their niche.</a> Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology. 73, 357-365 (2008).</li>
<li>Fernandez, M. E., Croce, S., Boutin, C., Cremer, H., Raineteau, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+electroporation+of+defined+lateral+ventricular+walls%3A+a+novel+and+rapid+method+to+study+fate+specification+during+postnatal+forebrain+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Development%22%5BJournal%5D)">Targeted electroporation of defined lateral ventricular walls: a novel and rapid method to study fate specification during postnatal forebrain neurogenesis.</a> Neural Development. 6, 13(2011).</li>
<li>de Chevigny, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-7a+regulation+of+Pax6+controls+spatial+origin+of+forebrain+dopaminergic+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">miR-7a regulation of Pax6 controls spatial origin of forebrain dopaminergic neurons.</a> Nature Neuroscience. 15, 1120-1126 (2012).</li>
<li>Lacar, B., Young, S. Z., Platel, J. C., Bordey, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+and+recording+subventricular+zone+progenitor+cells+in+live+tissue+of+postnatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Imaging and recording subventricular zone progenitor cells in live tissue of postnatal mice.</a> Frontiers in Neuroscience. 4, (2010).</li>
<li>Feliciano, D. M., Quon, J. L., Su, T., Taylor, M. M., Bordey, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+neurogenesis+generates+heterotopias%2C+olfactory+micronodules+and+cortical+infiltration+following+single-cell+Tsc1+deletion%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Molecular+Genetics%22%5BJournal%5D)">Postnatal neurogenesis generates heterotopias, olfactory micronodules and cortical infiltration following single-cell Tsc1 deletion.</a> Human Molecular Genetics. 21, 799-810 (2012).</li>
<li>Iguchi, T., Yagi, H., Wang, C. C., Sato, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+tightly+controlled+conditional+knockdown+system+using+the+Tol2+transposon-mediated+technique%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">A tightly controlled conditional knockdown system using the Tol2 transposon-mediated technique.</a> PloS ONE. 7, e33380(2012).</li>
</ol>

המחברים אין גילויים שיבצעו.

כאן אנחנו פירוט הטכניקה של electroporation SVZ יילודים, טכניקה במהירות ובאופן עמיד לתייג ולטפל בתאי גזע SVZ וצאצאיהם. ישנם מספר יתרונות שיש electroporation בהשוואה לשיטות אחרות. ראשית, מאחר תיוג המוקד של תאים, אחד הוא מסוגל להבחין סלולריות השפעות אוטונומיות אוטונומיות ולא תא. מניפולציה שנייה, תוך שימוש במערכות גנטית מושרות מאפשרת להשוות תופעות לפני או אחרי שילוב הסינפטי. יתר על כן, אפשר לעקוף את השימוש בפלסמידים מרובים electroporating Cre עכברים מבטאים עם פלסמידים המכילים אתרי lox...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם המגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות (אופציונלי) </td></tr><tr><td> אבובי ורוסיליקט מלוטשים כבדים </td><td> מכשיר סאטר </td><td> BF150-110-10 </td><td></td></tr><tr><td> Dual-שלב הזכוכית micropipette פולר </td><td> Narishige </td><td> PC-10h </td><td></td></tr><tr><td> גרין המהיר </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 0521192205 </td><td></td></tr><tr><td> ECM 830 Wave הכיכר פולסה גנרטור </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 45-0052 </td><td></td></tr><tr><td> Tweezertrodes </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 45-0488 </td><td></td></tr><tr><td> מקור אור בסיבים אופטי </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 12-562-36 </td><td></td></tr><tr><td> הלוגן טונגסטןמנורה </td><td> USHIO אמריקה, Inc </td><td> 1002247 </td><td></td></tr><tr><td> Picospritzer השני </td><td> פארקר מכשירים </td><td> 052-0312-900 </td><td></td></tr></tbody></table>

electroporation האזור subventricular ילודים

Neonatal Subventricular Zone Electroporation

תאי גזע עצביים (NSCs) קו רוחב חדרי לב לאחר הלידה ולהצמיח סוגי תאים רבים הכוללים נוירונים, האסטרוציטים, ותאי ependymal 1. הבנת המסלולים המולקולריים האחראים למל&quot;ל התחדשות עצמית, מחויב, וההתמיינות היא קריטית לרתימת הפוטנציאל הייחודי שלהם כדי לתקן את המוח ולהבין טובים יותר את הפרעות במערכת עצבים מרכזיות. קודם שיטות למניפולציה של מערכות יונקים נדרשו זמן מאמץ רב ויקר של הנדסה גנטית ברמת החיים השלמה 2. לכן, הרוב המכריע של מחקרים בחן את הפונקציות של מולקולות המל&quot;ל במבחנה או בחסרי חוליות. הנה, אנחנו מדגימים את הטכניקה הפשוטה ומהירה כדי לתפעל NPCs יילודים המכונה האזור electroporation subventricular יילודים (SVZ). טכניקות דומות פותחו לפני עשור כדי ללמוד NSCs העוברי וסייעו מחקרים על cortical פיתוח 3,4. לאחרונה זה יושם ללמוד המוח הקדמי המכרסם לאחר לידת 5-7. טכניקה זו מביאה לתיוג חזק של SVZ NSCs וצאצאיהם. לפיכך, לאחר לידת SVZ electroporation מספק עלות וזמן חלופי יעילה להנדסה גנטית של יונקי המל&quot;ל.

תוצאות ילודות subventricular אזור electroporation בתיוג של כמעט כל גליה הרציפה עם האזור הגבה, לרוחב גב, ורוחב subventricular בעקבות התנועה &quot;הגורפת&quot; של האלקטרודה פינצטה (האיור 1E) רדיאלי. עם זאת, electroporation ניתן להתאים לדרישה של הניסוי המתאים אך לא מטאטא את האלקטרודה ושימוש במיקום ואורינטציה מסוימים כמפורט בוידאו. לדוגמה, מאז גליה רדיאלי dorsally המקומית שונה מאלה רירית סעיף הרוחב של חדר, אחד יכול לבחור electroporate אזור אחד 9,10 בלבד. יי...

אנחנו מדגימים את טכניקה פולשנית המכונית electroporation האזור subventricular ילוד. הטכניקה מורכבת של הזרקת DNA פלסמיד לתוך חדרי לב לרוחב של גורים ילודים ויישום זרם חשמלי כדי לספק ולתפעל גנטיים תאי גזע עצביים

Electroporation האזור Subventricular ילודים

Neural stem cells (NSCs) line the postnatal lateral ventricles and give rise to multiple cell types which include neurons, astrocytes, and ependymal ...

מטרת הליך זה היא לתייג ולתפעל גנטית את המרכיבים המולקולריים של תאי גזע עצביים באזור תת-חדרי. זה מושג על ידי החדרת פיפטת זכוכית עמוסה ב- DNA לחדר הצדדי של P zero P.השלב השני הוא הוצאת DNA לנוזל עמוד השדרה המוחי של החדר הרוחבי. הזרם הבא מוחל על ה-P.זה מאפשר העברת DNA לתאי גזע עצביים המצפים את החדרים הצדדיים.בסופו של דבר, שילוב של טכניקות מולקולריות, כולל אימונוהיסטוכימיה, ביולוגיה מולקולרית, מיקרוסקופיה ואלקטרופיזיולוגיה, משמשים להמחשת שינויים בגורל, התפשטות, נדידה והתבגרות של תאי גזע עצביים באזור תת-חדרי. אלקטרופורציה של אזור תת-חדרי בילודים יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הנוירוגנזה, כגון אילו מסלולים מולקולריים אחראים לוויסות ההתפשטות, ההתמיינות, הנדידה וההתבגרות של תאי גזע עצביים וצאצאיהם. היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון עכברים טרנסגניים, הוא שהיא מאפשרת תיוג מהיר וחזק של תאי גזע נוירונים של SVZ בצורה חסכונית בזמן וחסכונית.ראשית, ודא שה-DNA ל-electro purate הוא בעל טוהר וריכוז גבוהים ונטול אנדוטוקסין. משוך צינורות נימי זכוכית סיליקה BO מלוטשים באש של 10 סנטימטר לתוך פיפטות. כאן משתמשים בחולץ פיפטות PP 8 30 ghhi PC 10 המוגדר למשיכת משיכה משוקללת בצעד אחד ב-70.5 מעלות צלזיוס לאחר משיכת הפיפטה, השתמש במלקחיים עגולים כדי לשבור את הקצה.לאחר מכן בדוק את הפיפט

neonatal-subventricular-zone-electroporation

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation של E16 עוברים עכברוש

בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation E15 של עוברי עכברים

ב electroporation ברחם מאפשר למסירה גן מהירה באופן מרחבית, ובזמן שבשליטת במערכת לפתח את העצבים המרכזית (CNS). כאן אנו מתארים וישימה מאוד בפרוטוקול electroporation ברחם, שניתן להשתמש בהם כדי לספק בונה ביטוי עובריים לתוך מערכת העצבים המרכזית מספר תחומים, כולל diencephalon telencephalon, ואת הרשתית.

ג&#39;ין אספקה ​​יעילה לתוך השטחים CNS מרובים באמצעות בתוך הרחם Electroporation

פרוטוקול זה מתאר הליך explant משופר...

לשעבר הרחם electroporation וexplants חצי כדור שלם: שיטה ניסיונית פשוטה למחקרים בהתפתחות קליפת מוח הקדומה

הגירת neuroblast היא אירוע מהותי בנוירוגנזה לאחר לידה. אנו מתארים פרוטוקול תיוג יעיל של neuroblasts ידי in vivo electroporation לאחר לידה ולאחר מכן להדמיה של ההגירה שלהם באמצעות זמן לשגות הדמיה של פרוסות מוח חריפות. אנו כוללים תיאור לניתוח כמותי של דינמיקת neuroblast ידי מעקב וידאו.

In vivo electroporation ואחרי הלידה וזמן לשגות הדמיה של neuroblast הגירה בעכבר חריפה פרוסות המוח

שטח pial הוא אזור אב ייחודי במערכת העצבים המרכזית, כי הוא מקבל תשומת לב גוברת. בזאת, אנו פירוט שיטה למניפולציה גנטית מהירה של אזור זה באמצעות אב שיטת electroporation שונה. הליך זה יכול לשמש לחקירות תאיות ומולקולרית של שושלות תאים ומסלולי איתות המעורבים בהתמיינות תאים ועל מנת להבהיר את גורלו ואת המאפיינים של תאי בת.

Electroporation שטח pial ילודים

הליך זה מראה כיצד למקד אינטרנוירונים במוח הקדמי של העכבר המתפתח באמצעות אלקטרופורציה ברחם. טכניקה זו הייתה יעילה במיוחד להשגת ביטוי גנים סלקטיבי בתת-סוגים בין-נוירונים המיועדים לשכבות השטחיות של קליפת המוח.

Electroporation תת סוג סלקטיבי של בקליפת המוח interneurons

כתב יד זה מספק פרוטוקולים המשתמשים ב electroporation ברחם (IUE) כדי לתאר את הקישוריות המבנית של נוירונים ברמת התא בודד ועל הרגישויות של נוירונים שכותרתו fluorescently. היסטולוגיה משמש כדי לאפיין הדנדריטים ותחזיות axonal. הקלטה כל התא פרוס חריפה משמשת לחקור רגישות.

ברחם Electroporation גישות לחקר רגישות של העצבית subpopulations וקישוריות תא יחיד

כפול בתוך הרחם מאפשר מיקוד אוכלוסיות תאים כי הם מופרדים באופן זמני. טכניקה זו שימושית כדי להמחיש אינטראקציות בין אוכלוסיות תאים אלה באמצעות חלבונים פלורסנט בתנאים נורמליים, אך גם לאחר ניסויים פונקציונליים כדי perturb גנים של עניין.

כפול ברחם באמצעות אלקטרופורציה ועד לאוכלוסיית היעד באופן זמני ולאוכלוסיות שאינן מופרדות

מוצג כאן פרוטוקול לביצוע מניפולציה גנטית במוח החמוס העוברי באמצעות באלקטרואידיות הרחם. שיטה זו מאפשרת מיקוד של תאי האבות העצביים בneocortex ב vivo.

ב Vivo מיקוד של תאי הצבי העצבי Neocortex חמוס על ידי באלקטרופורציה ברחם

אלקטרופורציה של אורגנואידים מוחיים של פרימטים מספקת גישה מדויקת ויעילה להחדרת שינויים גנטיים חולפים לסוגי אבות ונוירונים שונים במערכת מודל הקרובה להתפתחות ניאו-קורטקס פיזיולוגי של פרימטים (פתו). זה מאפשר את המחקר של תהליכים נוירו-התפתחותיים ואבולוציוניים והוא יכול להיות מיושם גם עבור מודלים המחלה.

מיקרו-הזרקה ממוקדת ואלקטרופורציה של אורגנואידים מוחיים פרימטים לשינוי גנטי

למדו טכניקת אלקטרופורציה באזור תת-חדרי בגורים לתיוג ומניפולציה גנטית של תאי גזע עצביים. שיטה זו מאפשרת חקר מהיר ויעיל של נוירוגנזה ודינמיקת התפתחות תאי עצב.

Electroporation האזור Subventricular ילודים

גלה סרטונים נוספים