Name: הדמיית תהודה מגנטית משופרת ניגודיות דינמית של דגם orthotopic סרטן לבלב עכבר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-18T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 24 s
Description: חקור הדמיית תהודה מגנטית משופרת ניגודיות דינמית של דגם orthotopic סרטן לבלב עכבר. שיטה זו מאפשרת הערכת מיקרו-וסקולטורה ותגובה לטיפולים בסרטן הלבלב.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים לג'פרי סלרס על הסיוע במידול עכברים אורתוטופיים של סרטן הלבלב. עבודה זו נתמכה על ידי פרסי פיילוט של יוזמת מחקר מהמחלקה לרדיולוגיה ב-UAB ומענקי NIH 2P30CA013148 ו-P50CA101955.

כל ההליכים אושרו על ידי הוועדה המוסדית הטיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטת אלבמה בבירמינגהם. דוגמנות 1. Orthotopic גידול עכבר הלבלב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קווי תרבות סטנדרטיים אנושיים תא לבלב הסרטן במדיום של הנשר שונה Dulbecco (DMEM) בתוספת 10% בסרום שור עוברי. לשמור את כל התרבויות על 37 מעלות צלזיוס באווירת humidified עם 5% CO 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש 8-10 עכברים בשבוע ישן-נקבה חמורה בשילוב immunodeficient. הנח כלובי חיות באור 12 שעות ומחזור חושך 12 שעות בRT (21 ± 2 מעלות צלזיוס) ו -60% לחות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי את כל בעלי החיים באמצעות אוורור עם 2% מisoflurane מעורבב עם חמצן (2 L / min) בכל ניתוח. אשר את עומק ההרדמה על ידי רפלקס קמצוץ הבוהן. בעלי חיים מקום על כרית חימום (37 ° C) כדי לשמור על טמפרטורת הגוף. החל משחת עיני וטרינרית על עיניים כדי למנוע יובש ואילו בהרדמה. ו160 #; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסיר את השיער ברבע השמאלי העליון של הבטן של כל עכבר, ולתת תרופה לשיכוך כאבים (carpofen, 5 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף של תת עורי) לאזור. החל תמיסה פולידין על העור החשוף. הכן מכשירי ניתוח autoclaved. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך 1 סנטימטר בעור הצפק באמצעות קשתית מספריים ישר. הוצא בעדינות את הלבלב מהבטן באמצעות פינצטה כירורגית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס 28 מחט G של מזרק 0.5 מיליליטר אינסולין לתוך הזנב של לבלב ולאחר מכן להחדיר לאט פתרון של 2.5 מיליון תאי סרטן לבלב אנושיים ב -30 μl של DMEM. ודא שבועה קטנה נוצר בראש הלבלב על ידי הפתרון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח בעדינות את הלבלב בחזרה לתוך הבטן באמצעות פינצטה כירורגית. סגור את הצפק והעור בשכבה 1 עם 2 קטעו 5-0 תפרי Prolene, ולאחר מכן לסיים את ההרדמה. אל תחזרו לבעלי חיים שעברו ניתוח לחברה של בעלי חיים אחרים, עד שהתאושש לחלוטין.60; הסר תפרים בניתוח שלאחר 7 ~ 10 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תן מנה נוספת של התרופה לשיכוך כאבים (carpofen, 5 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף של תת עורי) בשעה 24 שעות לאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק גודל גידול ע&quot;י מישוש אזור הניתוח תוך שימוש בשתי אצבעות. גידולים בדרך כלל מרגישים צפופים וקופצניים יותר מאשר הרקמות ואיברים הסמוכים. בדרך כלל זה לוקח ~ 1-2 שבועות כדי להתחיל להרגיש גידול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג בעלי חיים מדי יום בחיפוש אחר סימנים של מחלה. כאשר בעלי חיים מופיעים (התנהגויות נורמליות חוסר טיפוח והימנעות) חולים, אנחנו נסתיימו באמצעות נקע בצוואר הרחם בזמן הרדמה. </li></ol> 2. תהודה מגנטית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל MRI כאשר גודל גידול הוא כ 5-7 מ&quot;מ בקוטר בבדרך כלל 2 ~ 4 שבועות לאחר השתלת תאים. השתמש בסורק MR המוקדש להדמית חיה קטנה או סורק MR קליני מצוידים בסליל ייעודי להדמיה של בעלי חיים קטנים. הערה: השתמשנו בסורק MR חיה קטנה 9.4T עם שילוב של מהוד נפח H 1/ משדר ומקלט סליל פני השטח (30 מ&quot;מ קוטר) (הברוקר BioSpin קורפ, Billerica, MA). סליל משטח מספק יותר יחס אות לרעש (SNR) 14. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן חומר ניגוד MRI מבוסס על גדוליניום להזריק ~ 0.1-0.2 mmol / קילוגרם לכל בעלי חיים ב~ 0.1-0.2 מיליליטר PBS (נאגר מלוח פוספט). הערה: השתמשנו gadoteridol, והזרקתי 0.2 mmol / קילוגרם ב0.15 מיליליטר PBS על פני תקופה של 15 שניות (0.1 מיליליטר / sec). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכין צינור מיקרו-polyethelene (אורך: 7.62 מ&quot;מ, קוטר פנימי: 0.28 מ&quot;מ, קוטר חיצוני: 0.64 מ&quot;מ). הכנס מחט G 30 (אורך 12.7 מ&quot;מ) לקצה אחד של הצינור, ומחט 30 G בוטה קצה (אורך מ&quot;מ 9.5) לקצה השני. חבר מזרק 1 מיליליטר המכיל חומר ניגוד MR למחט הקצה הקהה, ולאט לדחוף את המזרק כדי למלא את כל הצינור עם חומר ניגוד MR. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים בעלי חיים באמצעות אוורור עם ~ 1 - 2% מisoflurane מעורבב עם החמצן (2 L / min) לאורך הכנה והדמיה. אשר את העומק של anesthesia על ידי רפלקס קמצוץ הבוהן. החל משחת עיני וטרינרית על עיניים כדי למנוע יובש ואילו בהרדמה. להרחיב את זנב וריד באמצעות מנורת חום לפני החדרת מחט. תפוס את אמצע מחט 30 G באמצעות מלקחיים קלי, ולהכניס אותו לתוך וריד הזנב. קלטת שני הזנב וצינור על גבי פיסת פלסטיק או נייר קרטון (רוחב x 100 מ&quot;מ אורך 10 מ&quot;מ) כדי לשמור על ישר הזנב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה במצב שכיבה במיטת בעלי חיים מצוידים במחזור מים חמים (או אוויר חם) כדי לווסת את טמפרטורת גוף במהלך הדמיה. הגדר את הטמפרטורה על המיטה עד 37 מעלות צלזיוס. הכנס בדיקה טמפרטורה רקטלית כדי לפקח על טמפרטורת הגוף במהלך הדמיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל לוח פלסטיק orthogonally כפוף לאזור הבטן. ודא שהגידול ממוקם מאחורי הקצה העליון של הלוח, ולאחר מכן משוך את הלוח מעט (~ 2 מ&quot;מ) כדי להבטיח את הגידול נתפס על ידי הדירקטוריון. הדבק את הלוח למיטה של ​​בעלי חיים בתקיפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קלטת transduce כרית נשימהr (SA Instrument, Inc., סטוני ברוק, ניו יורק) באזור החזה כדי לפקח על נשימה של בעלי החיים במהלך הדמיה. מניחים סליל פני השטח בחלק העליון של אזור הגידול, ואת הקלטת אותו למיטה של ​​בעלי חיים בתקיפות. לדחוף את המיטה של ​​בעלי החיים לתוך סורק MR למקם את אזור הגידול במרכז סליל נפח (הקוטר הפנימי: 72 מ&quot;מ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע כוונון התאמה ועבור שניהם המקלט והמשדר, ואחרי shimming. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתחיל עם רצף MR אנטומיים כדי לאתר את הגידול. השתמש ברצף ספין הד טורבו (T2W) T2 המשוקלל כדי להשיג תמונות ציריות עם הפרמטרים הרכישה הבאות. זמן החזרה (TR) / זמן הד (TE) = 3,000 / 34 אלפיות שנייה, 128 x 128 מטריצה, שדה 30 x 30 מ&quot;מ מבט, מספר ממוצע = 1, אורך רכבת הד = 4, ו -20 מ&quot;מ 1 רציף פרוסות עבות ב מצב interlaced כדי לכסות את האזור כולו גידול (סה&quot;כ זמן סריקה: 1.6 דקות). הערה: מאחר שגידולים בלבלב orthotopic קשים יותר מאשר להיות ממוקמים תת עורית אלה, locali הקונבנציונליתמונות זר שיש ברזולוציה נמוכה יותר לא יכולות להיות שימושיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכוש תמונות משוקללות T1 (T1W) עם זוויות להעיף שונות כדי לאחזר מפת T1. לשם כך, השתמש בשיפוע הד גישת זווית multiflip עם הפרמטרים הבאים: זמן החזרה (TR) / זמן הד (TE) = 115/3 אלפיות שנייה, 128 x 128 מטריצה, שדה 30 x 30 מ&quot;מ מבט, מספר ממוצע = 4, ~ 5-7 פרוסות רציפות 1 מ&quot;מ עבות במצב interlaced כדי לכסות את אזור הגידול, ושבע זוויות שני של 10, 20, 30, 40, 50, 60, ו -70 (זמן סריקה כולל לכל זווית להעיף: 1 דקות). הערה: עם זאת, גישת זווית multiflip היא יעילה רק כאשר הומוגניות שדה B1 היא גבוהה. אם לא, ניתן לקבל מפות T1 עם גישת TR מרובה במקום 15. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכוש תמונות T1W לפני ואחרי הזרקת ניגוד MR גדוליניום מבוססת. השתמש באותם פרמטרים הרכישה וגיאומטריה למיפוי T1 אבל עם הזווית להעיף הקבוע של 30. קידוד ליניארי השתמש כדי להבטיח מצב יציב כאשר מרכז k-המרחב מתקבל, especially כאשר TR קצר וזווית להעיף תואר נמוך משמשים. לרכוש 5 תמונות בסיס לפני זריקת ניגוד. לאחר מכן לרכוש 40 תמונות לאחר הזרקה לעומת (סה&quot;כ זמן סריקה: 45 דקות). השתמש משאבת מזרק כדי להזריק חומר ניגוד בקצב קבוע (0.01 מיליליטר / sec). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח נשימה של בעלי החיים באופן רציף, ולהתאים את ריכוז isoflurane לשמור על קצב הנשימה ל50-100 נשימות לדקה. מעקב אחר טמפרטורת גוף של בעלי חיים ברחבי הדמיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שסיימתי את DCE-MRI, תוריד את המחט ובדיקות אחרות, והמקום חי בכלוב ריק מיטות עם מגבות נייר. לעסות בעדינות את אזור הבטן התחתון. הכלוב צריך להיות ממוקם חצי תחת מנורת חום כדי לאפשר לבעלי החיים לנוע פנימה והחוצה משיפוע החום כפי שהוא מתאושש. אל תשאיר חיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור על כיבה sternal. </li></ol> 3. עיבוד תמונה וניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> regi גידול מגזר<html> בתמונות T2W. בתמונות T2W, עוצמת האות באזור גידול היא בהירה יותר מזה של רקמות הסובבות, כך גבול הגידול יכול להיות שמסומן באופן ידני. הערה: ניתן להשתמש בטכניקות פילוח אוטומטיות למחצה כגון thresholding הגלובלי או contouring הפעיל 16,17, אבל עוצמת רקע אחיד צריכה להיות מתוקנת במיוחד כאשר נעשה שימוש בסליל פני השטח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת מפות T1 וצפיפות פרוטון. בתמונות T1W רכשו עם רצף הד שיפוע, בהנחה שזמן ההד (TE) הוא הרבה פחות מT2 * ערך, ערך פיקסל נקבע על ידי <img alt="משוואת 1" fo:content-width="3in" src="/files/ftp_upload/52641/52641eq1.jpg" /> בי S 0 הוא צפיפות פרוטון, T 1 הוא זמן הרפיה T 1 מתמיד, TR הוא זמן החזרה, וθ הוא זווית להעיף. משוואה (1) ניתן לכתוב מחדש ל 641eq2.jpg &quot;/&gt; כאשר S (θ) / sinθ מוחלף בY, ו- S (θ) / tanθ מוחלף בX. משוואה (2) היא משוואה ליניארית, והמדרון וליירטו ניתן להשתמש כדי לאחזר 0 ערכי T1 ו- S, בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חישוב ריכוז ניגוד MR בתמונות DCE-MR. כאשר חומר ניגוד MR מבוסס גדוליניום מוזרק, קבוע זמן הרפיה 1 T משתנה לאורך זמן. אז, משוואה (1) ניתן לכתוב מחדש ל <img alt="משוואה 3" fo:content-width="3in" src="/files/ftp_upload/52641/52641eq3.jpg" /> T 1 (t) קשור עם ריכוז ניגוד MR, C (t), כדלקמן, <img alt="משוואה 4" fo:content-width="3in" src="/files/ftp_upload/52641/52641eq4.jpg" /> שבו r 1 הוא relaxivity אורך חומר ניגוד MR של. אז, על ידי שילוב של משוואות (3) ו- (4), ריכוז ניגוד MR נקבע על ידי <img alt = fo &quot;5 משוואה&quot;: = src תוכן רוחב &quot;3in&quot; = &quot;/ קבצים / ftp_upload / 52641 / 52641eq5.jpg&quot; /&gt; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכמת את הפרמטרים pharmacokinetic של p MR ניגוד סוכן. C (t) מציג ריכוז ניגוד MR בפלזמת דם בזמן t לאחר ייזום הזרקת ניגוד. P C (t) נקרא פונקצית קלט עורקים (AIF). אם AIF זמין, הפרמטרים pharmacokinetic חומר ניגוד MR של יכולים להיות מחושבים על ידי <img alt="משוואה 6" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/52641/52641eq6.jpg" /> כאשר t C (t) הוא ריכוז ניגוד MR ברקמות יעד, עמ &#39;v הוא דם השבר נפח פלזמה, דואר v הוא נפח תאי extravascular השבר, וK טרנס הוא קבוע העברת נפח. קבוע שטף שיעור, ep k, שווה לטראן Ks מחולק בדואר v. אם AIF אינו זמין, אז מודל התייחסות האזור ניתן להשתמש במקום 18,19. מודל אזור ההתייחסות מבוסס על מודל Kety-מוגבל זרימה 20 ומשתמש בריכוז ניגוד באזור התייחסות להסיר את הצורך בAIF כדלקמן, <img alt="משוואה 7" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/52641/52641eq7.jpg" /> כאשר t C, החזר על ההשקעה (t), K טראנס, החזר על השקעה, ודואר v, החזר על ההשקעה הם ריכוז לעומת זאת, העברת נפח קבועה, ושבר extravascular-תאי נפח, בהתאמה, באזור של עניין (ROI), ואילו t C, RR (T), K טראנס, RR, ודואר v, RR הם אלה באזור ההתייחסות. שריר ליד חוליות עמוד שדרה הוא לעתים קרובות נבחר כאזור ההתייחסות, ודואר v, RR ברשות עכבריתשריר ravertebral הנחה הוא להיות קבוע ב0.08 21. השתמשנו במודל אזור ההתייחסות. </li></ol>

<ol><li>Ergul, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+multifocality+and+axillary+nodal+involvement+in+early-stage+breast+cancer+patients+using+18F-FDG+PET%2FCT+compared+to+contrast-enhanced+and+diffusion-weighted+magnetic+resonance+imaging+and+sentinel+node+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Radiol%22%5BJournal%5D)">Assessment of multifocality and axillary nodal involvement in early-stage breast cancer patients using 18F-FDG PET/CT compared to contrast-enhanced and diffusion-weighted magnetic resonance imaging and sentinel node biopsy.</a> Acta Radiol. , (2014).</li>
<li>Park, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+early+response+to+concurrent+chemoradiotherapy+in+cervical+cancer%3A+value+of+diffusion-weighted+and+dynamic+contrast-enhanced+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Assessment of early response to concurrent chemoradiotherapy in cervical cancer: value of diffusion-weighted and dynamic contrast-enhanced MR imaging.</a> Magn Reson Imaging. , (2014).</li>
<li>Nguyen, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prediction+of+chemotherapeutic+response+in+bladder+cancer+using+K-means+clustering+of+dynamic+contrast-enhanced+%28DCE%29-MRI+pharmacokinetic+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Prediction of chemotherapeutic response in bladder cancer using K-means clustering of dynamic contrast-enhanced (DCE)-MRI pharmacokinetic parameters.</a> J Magn Reson Imaging. 10, (2014).</li>
<li>Teo, Q. Q., Thng, C. H., Koh, T. S., Ng, Q. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Contrast-enhanced+Magnetic+Resonance+Imaging%3A+Applications+in+Oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Oncol+%28R+Coll+Radiol%29%22%5BJournal%5D)">Dynamic Contrast-enhanced Magnetic Resonance Imaging: Applications in Oncology.</a> Clin Oncol (R Coll Radiol). , (2014).</li>
<li>Zhang, X., Pagel, M. D., Baker, A. F., Gillies, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducibility+of+magnetic+resonance+perfusion+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Reproducibility of magnetic resonance perfusion imaging.</a> PLoS One. 9 (2), e89797(2014).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+adenocarcinoma%3A+a+pilot+study+of+quantitative+perfusion+and+diffusion-weighted+breath-hold+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Abdominal+imaging%22%5BJournal%5D)">Pancreatic adenocarcinoma: a pilot study of quantitative perfusion and diffusion-weighted breath-hold magnetic resonance imaging.</a> Abdominal imaging. , (2014).</li>
<li>Derosier, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+Treatment+with+TRA-8+Anti+Death+Receptor+5+Antibody+and+CPT-11+Induces+Tumor+Regression+in+an+Orthotopic+Model+of+Pancreatic+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Combination Treatment with TRA-8 Anti Death Receptor 5 Antibody and CPT-11 Induces Tumor Regression in an Orthotopic Model of Pancreatic Cancer.</a> Clin Cancer Res. 13 (18), 5535s-5543s (2007).</li>
<li>Derosier, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRA-8+anti-DR5+monoclonal+antibody+and+gemcitabine+induce+apoptosis+and+inhibit+radiologically+validated+orthotopic+pancreatic+tumor+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">TRA-8 anti-DR5 monoclonal antibody and gemcitabine induce apoptosis and inhibit radiologically validated orthotopic pancreatic tumor growth.</a> Mol Cancer Ther. 6 (12), 3198-3207 (2007).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+therapy+evaluation+of+combined+anti-death+receptor+5+antibody+and+gemcitabine+in+orthotopic+pancreatic+tumor+xenografts+by+diffusion-weighted+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Early therapy evaluation of combined anti-death receptor 5 antibody and gemcitabine in orthotopic pancreatic tumor xenografts by diffusion-weighted magnetic resonance imaging.</a> Cancer Res. 68 (20), 8369-8376 (2008).</li>
<li>Klein, S., Staring, M., Murphy, K., Viergever, M. A., Pluim, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((elastix%3A+a+toolbox+for+intensity-based+medical+image+registration%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Med+Imaging%22%5BJournal%5D)">elastix: a toolbox for intensity-based medical image registration.</a> IEEE Trans Med Imaging. 29 (1), 196-205 (2010).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+therapy+evaluation+of+combined+cetuximab+and+irinotecan+in+orthotopic+pancreatic+tumor+xenografts+by+dynamic+contrast-enhanced+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Early therapy evaluation of combined cetuximab and irinotecan in orthotopic pancreatic tumor xenografts by dynamic contrast-enhanced magnetic resonance imaging.</a> Mol Imaging. 10 (3), 153-167 (2011).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antagonistic+effects+of+anti-EMMPRIN+antibody+when+combined+with+chemotherapy+against+hypovascular+pancreatic+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22M+Mol+Imaging+Biol%22%5BJournal%5D)">Antagonistic effects of anti-EMMPRIN antibody when combined with chemotherapy against hypovascular pancreatic cancers.</a> M Mol Imaging Biol. 16 (1), 85-94 (2014).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+combination+therapy+targeting+DR5+and+EMMPRIN+in+pancreatic+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Dual combination therapy targeting DR5 and EMMPRIN in pancreatic adenocarcinoma.</a> Mol Cancer Ther. 11 (2), 405-415 (2012).</li>
<li>Moyher, S. E., Vigneron, D. B., Nelson, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+coil+MR+imaging+of+the+human+brain+with+an+analytic+reception+profile+correction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Surface coil MR imaging of the human brain with an analytic reception profile correction.</a> J Magn Reson Imaging. 5 (2), 139-144 (1995).</li>
<li>Voigt, T., Nehrke, K., Doessel, O., Katscher, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T1+corrected+B1+mapping+using+multi-TR+gradient+echo+sequences%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">T1 corrected B1 mapping using multi-TR gradient echo sequences.</a> Magn Reson Med. 64 (3), 725-733 (2010).</li>
<li>Liu, H., Liu, Y., Zhao, Z., Zhang, L., Qiu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+background+distribution-based+active+contour+model+for+three-dimensional+lesion+segmentation+in+breast+DCE-MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+physics%22%5BJournal%5D)">A new background distribution-based active contour model for three-dimensional lesion segmentation in breast DCE-MRI.</a> Medical physics. 41 (8), 082303(2014).</li>
<li>Sarkar, S., Das, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multilevel+image+thresholding+based+on+2D+histogram+and+maximum+Tsallis+entropy--a+differential+evolution+approach%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Image+Process%22%5BJournal%5D)">Multilevel image thresholding based on 2D histogram and maximum Tsallis entropy--a differential evolution approach.</a> IEEE Trans Image Process. 22 (12), 4788-4797 (2013).</li>
<li>Yankeelov, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+pharmacokinetic+analysis+of+DCE-MRI+data+without+an+arterial+input+function%3A+a+reference+region+model%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Quantitative pharmacokinetic analysis of DCE-MRI data without an arterial input function: a reference region model.</a> Magn Reson Imaging. 23 (4), 519-529 (2005).</li>
<li>Cardenas-Rodriguez, J., Howison, C. M., Pagel, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+linear+algorithm+of+the+reference+region+model+for+DCE-MRI+is+robust+and+relaxes+requirements+for+temporal+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">A linear algorithm of the reference region model for DCE-MRI is robust and relaxes requirements for temporal resolution.</a> Magn Reson Imaging. 31 (4), 497-507 (2013).</li>
<li>Tofts, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+kinetic+parameters+from+dynamic+contrast-enhanced+T%281%29-weighted+MRI+of+a+diffusable+tracer%3A+standardized+quantities+and+symbols%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Estimating kinetic parameters from dynamic contrast-enhanced T(1)-weighted MRI of a diffusable tracer: standardized quantities and symbols.</a> J Magn Reson Imaging. 10 (3), 223-232 (1999).</li>
<li>Yankeelov, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+a+reference+region+model+with+direct+measurement+of+an+AIF+in+the+analysis+of+DCE-MRI+data%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Comparison of a reference region model with direct measurement of an AIF in the analysis of DCE-MRI data.</a> Magn Reson Med. 57 (2), 353-361 (2007).</li>
<li>Cao, R. Y., Amand, T., Ford, M. D., Piomelli, U., Funk, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Murine+Angiotensin+II-Induced+Abdominal+Aortic+Aneurysm+Model%3A+Rupture+Risk+and+Inflammatory+Progression+Patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The Murine Angiotensin II-Induced Abdominal Aortic Aneurysm Model: Rupture Risk and Inflammatory Progression Patterns.</a> Front Pharmacol. 1 (9), (2010).</li>
<li>Parker, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimentally-derived+functional+form+for+a+population-averaged+high-temporal-resolution+arterial+input+function+for+dynamic+contrast-enhanced+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Experimentally-derived functional form for a population-averaged high-temporal-resolution arterial input function for dynamic contrast-enhanced MRI.</a> Magn Reson Med. 56 (5), 993-1000 (2006).</li>
<li>Tseng, W., Leong, X., Engleman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+mouse+model+of+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic mouse model of colorectal cancer.</a> J Vis Exp. (10), 484(2007).</li>
<li>Bhullar, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+true+orthotopic+gastric+cancer+murine+model+using+electrocoagulation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Surg%22%5BJournal%5D)">A true orthotopic gastric cancer murine model using electrocoagulation.</a> J Am Coll Surg. 217 (1), 64-70 (2013).</li>
</ol>

למחברים אין ניגודי אינטרסים להצהיר עליהם.

יש לנו הצגנו שיטות מפורטות של מודלים גידול בלבלב orthotopic באמצעות עכברי immunodeficient, DCE-MRI של גידולי בטן בעכברים, וכימות של הפרמטרים שלו קינטית. בדוגמנות גידול בלבלב orthotopic, יש לנקוט בזהירות בעת החדרת מחט לתוך הזנב של לבלב. אם מוצלח, תאים יועברו לראש לבלב יצירת בועה קטנה. בעת החלת לוח פלסטיק orthogonally כפוף, זה קריטי כדי לוודא שהגידול ממוקם מתחת לקצה העליון של הלוח. כיוון שהגידול בלבלב הוא קרוב לסרעפת, הלוח עשוי להיות לא תוכל להחזיק אותו בחוזקה, במיוחד כאשר גודל הגיד...

המטרה הכוללת של שיטה זו היא ליישם הדמיה ניגודיות המשופרת דינמית בתהודה מגנטית (DCE-MRI) לxenografts גידול בלבלב בעכברי orthotopic. DCE-MRI הוא שיטה לא פולשנית להעריך microvasculature ברקמות יעד על ידי ניטור השינוי של ניגוד MR על פני תקופה מסוימת של זמן לאחר הזרקה. DCE-MRI נוצל כדי לאבחן גידולים ממאירים וכדי להעריך את תגובת גידול לטיפולים שונים 1-4. DCE-MRI כמותי הציג שחזור גבוה 5. כדי לכמת את הפרמטרים pharmacokinetic חומר ניגוד MR של ברקמות יעד, את כל תמונות DCE-MR נרכשו בנקודות זמן שונות ומפת T1 שהושגו לפני הזרקה לעומת זאת יש coregistered 6. עם זאת, בשל תנועות נשימה וperistaltic באזור הבטן, DCE-MRI כמותי יש לו יישום מוגבל לגידולים במערכת העיכול. מודלים גידול בלבלב Orthotopic כבר נוצלו כדי להעריךתגובת לבלב-גידול הבא טיפולי כימותרפיה ו7,8 ביולוגיים. מודלים גידול Orthotopic נחשבים עדיף על מודלים תת עורית קונבנציונליים, מאז מייקרו-הסביבה באתר הגידול המקורי באו לידי ביטוי ותגובת גידול ובכך אדם לטיפול ניתן לחזות בצורה מדויקת יותר. עם זאת, לבלב העכבר ממוקם ברבע העליון השמאלי של הבטן, DCE-MRI כך כמותי של xenografts גידול בלבלב בעכברי orthotopic לא יושם בקלות. הקמנו פרוטוקול של DCE-MRI של גידולי בטן בעכברים על ידי תיקון הגידולים תוך שימוש בלוח פלסטיק orthogonally כפוף למניעת העברת תנועה מאזור החזה 9. הלחץ המופעל על ידי הפורום היה מקומי באזור הבטן, ולא הביא בקשיים נשימה. טכניקת coregistration תמונה אוטומטית אומתה לDCE-MRI של אברי בטן במצב חופשית-נשימה, אבל זה מבצע effectively רק כאשר אזורי היעד לנוע באיטיות ובאופן קבוע 10. קצב נשימה של בעלי חיים הוא משתנה במהלך הדמיה, איפוק כל כך פיזי באזור הבטן יהיה צורך לאחזר פרמטרים pharmacokinetic אמין במודלים של עכברי גידול בלבלב orthotopic. יש לנו בהצלחה ונרשמת הפרמטרים pharmacokinetic חומר ניגוד MR של בxenografts גידול בלבלב orthotopic באמצעות לוח פלסטיק orthogonally הכפוף בDCE-MRI 11-13. כאן אנו מציגים את ההליך מפורט של מודלים גידול בלבלב orthotopic, DCE-MRI של xenografts הגידול בעכברים, והכימות של פרמטרים pharmacokinetic.

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>Invitrogen</td><td>11965-118</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>מעבדות הרלן</td><td>BT-9501</td><td></td></tr><tr><td>מוצרי בטדין</td><td>פרדו</td><td>67618-153-01</td><td></td></tr><tr><td>5-0 תפרי פרולן</td><td>Ethicon</td><td>8720H</td><td></td></tr><tr><td>9.4T MR סורק</td><td>Bruker Biospin Corporation</td><td>BioSpec 94/20 USR</td><td></td></tr><tr><td>Gadoteridol</td><td>Bracco Diagnostics Inc</td><td>NDC 0270-1111-03</td><td></td></tr><tr><td>צינור מיקרו-פוליאתלן</td><td>יישומים אסטרטגיים, Inc</td><td>#PE-10-25</td><td></td></tr><tr><td>30 G מחט קצה קהה</td><td>יישומים אסטרטגיים, Inc</td><td>89134-194</td><td></td></tr><tr><td>מערכת ניטור ושער</td><td>SA מכשירים, Inc</td><td>דגם 1030</td><td>זוהי מערכת תואמת MR למדידת דירוג רסירטורי וטמפרטורת גוף של בעלי חיים קטנים בו זמנית.</td></tr><tr><td>משאבת מזרק</td><td>New Era Pump Systems, Inc.</td><td>NE-1600</td><td></td></tr></tbody></table>

הדמיית תהודה מגנטית משופרת ניגודיות דינמית של דגם orthotopic סרטן לבלב עכבר

Dynamic Contrast Enhanced Magnetic Resonance Imaging of an Orthotopic Pancreatic Cancer Mouse Model

הדמיית תהודה מגנטית משופרת בניגודיות דינמית (DCE-MRI) שימשה באופן מוגבל עבור השתלות גידול לבלב אורתוטופיות עקב חפץ תנועת נשימה חמור באזור הבטן. מודלים של גידולים אורתוטופיים מציעים יתרונות על פני תת עוריים, מכיוון שהם יכולים לשקף את המיקרו-סביבה הראשונית של הגידול המשפיעה על אספקת הדם, ניאו-וסקולריזציה ופלישת תאי הגידול. לאחרונה הקמנו פרוטוקול של DCE-MRI של השתלות גידול לבלב אורתוטופיות במודלים של עכברים על ידי אבטחת גידולים עם לוח פלסטיק מכופף אורתוגונלי כדי למנוע העברת תנועה מאזור החזה במהלך ההדמיה. הלחץ של לוח זה היה ממוקם באזור הבטן, ולא גרם לקשיי נשימה של בעלי החיים. מאמר זה מדגים את ההליך המפורט של מידול גידול לבלב אורתוטופי באמצעות בעלי חיים קטנים ו-DCE-MRI של השתלות הגידול. מוצגת גם שיטת כימות של פרמטרים פרמקוקינטיים ב-DCE-MRI. ההליך המתואר במאמר זה יסייע לחוקרים ליישם DCE-MRI עבור מודלים אורתוטופיים של עכברי סרטן מערכת העיכול.

תאי גידול בלבלב אנושיים לגדול בהצלחה בלבלב עכבר יצירת גידולים מוצקים. איור 1 מציג צילומים () לבלב נורמלי שבו פתרון תאים סרטניים מוזרק, ו- (ב) עכבר נציג נושאת xenograft גידול בלבלב orthotopic (MIA פאקא-2 ). גידול ממוקם ברבע העליון השמאלי של בטן, בסמוך לטחול. זה בדרך כלל לוקח 2-4 שבועות לגידולים לגדול עד 5 - 7 מ&quot;מ קוטר לאחר השתלת תאים. Motion של xenografts גידול בלבלב orthotopic היה משמעותי מד...

מטרת פרוטוקול זה היא ליישם הדמיית תהודה מגנטית משופרת בניגודיות דינמית (DCE-MRI) עבור השתלות גידול לבלב אורתוטופי בעכברים. DCE-MRI היא שיטה לא פולשנית לניתוח מיקרו-כלי דם ברקמת מטרה, ושימושית להערכת תגובת כלי הדם בגידול לאחר טיפול חדשני.

Dynamic contrast enhanced magnetic resonance imaging (DCE-MRI) has been limitedly used for orthotopic pancreatic tumor xenografts due to severe ...

המטרה הכללית של הליך זה היא ליישם דימות תהודה מגנטית עם הגברת ניגודיות דינמית, או D-C-E-M-R-I, על קסנוגרפטים של גידולי לבלב ORTHOTOPIC בעכברים. דבר זה מושג תחילה על ידי הוצאת הלבלב מהבטן, ולאחר מכן על ידי עירוי איטי של תאי סרטן לבלב אנושיים לזנב הלבלב. לאחר מכן הלבלב מוחזר לבטן, וכאשר הגידול מגיע לקוטר של חמישה עד שבעה מילימטרים, מניחים לוח פלסטיק וסליל שטח מעל מסת הרקמה.בסופו של דבר, ניתן להדמיות את המיקרו-וסקולריזציה של הגידול השגור (xenograft) באמצעות D-C-E-M-R-I. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קונבנציונליות כגון D-C-M-R-I של גידול שגור תת-עורי, הוא שדגמים אורתוטופיים של גידולי לבלב מאפשרים הערכה של הסביבה המיקרוסקופית של הגידול הראשוני, כולל אספקת דם של נאו-וסקולריזציה ופלישת תאי גידול. ההליך יודגם על ידי שרון סמואל, עמיתת מחקר, ומרי וורן, טכנאית מחקר, שתיהן מהמעבדה שלנו.התחילו בהנחת נקבת עכבר ים מסוג skid valve בת שמונה שבועות, תחת הרדמה, על משטח חימום, לאחר אישור רמת הסדציה המתאימה באמצעות צביטה באצבע. לאחר מכן, הסירו את הפרווה מהרבע השמאלי העליון של בטן החיה והחדירו תרופה משככת כאבים לעור באמצעות מספרי iris ישרים. בצעו חתך של one centimeter בעור ובפריטונאום והרימו בעדינות את הלבלב דרך החתך.לאחר מכן, השתמש במזרק אינסולין של 0.5 מיליליטר, המצויד במחט בכיול (gauge) 28, כדי להזריק באיטיות 2.5 מיליון תאי סרטן לבלב אנושיים ב-30 µL של DMEM אל זנב הלבלב. ודא שהתמיס יוצר בועית (bleb) קטנה בראש הלבלב. לאחר מכן, החזר בעדינות את הלבלב אל תוך הבטן וסגור את הפריטונאום ואת העור בשכבה אחת באמצעות שתי תפרים בודדים של פרולין 5-0.בדקו את גודל הגידול מדי יום באמצעות מישוש של אזור הניתוח בעזרת שתי אצבעות. הגידולים מרגישים בדרך כלל דחוסים ובעלי מרקם גבשושי יותר מאשר הרקמות והאיברים שסביבם. עקבו מדי יום אחר סימני מחלה בבעלי החיים.כאשר הגידול מגיע לקוטר של חמישה עד שבעה מילימטרים, הכניסו מחט חדה בכיול 30 gauge לקצה אחד של צינור פוליאתילן מיקרוסקופי וקצה של מחט קהה בכיול 30 gauge לקצה השני. חברו מזרק של נפח one milliliter המכיל חומר ניגוד ל-MRI שהוכן טרי לקצה המחט הקהה, ולחצו באיטיות על הבוכנה כדי למלא את הצינור כולו. לאחר מכן, הרחיבו את ורידי הזנב של החיה תחת מנורת חימום והשתמשו בפינצטת Kelly כדי לתפוס את גוף המחט החדה בכיול 30 gauge.החדירו בזהירות את המחט לאחד מוורידי הזנב המורחבים והדביקו באמצעות סרט דביק הן את הזנב והן את הצינור לחתיכת פלסטיק בגודל 10 על 100 מילימטר כדי לשמור על הזנב ישר. לאחר מכן, הניחו את העכבר בשכיבה על הגב בתוך מיטת בעלי חיים המצוידת במים חמים במחזוריות כדי לווסת את טמפרטורת הגוף של בעל החיים במהלך הדימות. בשלב זה, החדירו גם חיישן טמפרטורה רקטלי.כאשר בעל החיים נמצא במיקום הנכון, הצמד לוח פלסטיק כפוף בצורה אורתוגונלית לאזור הבטן, תוך וידוא שהגידול ממוקם מאחורי הקצה העליון של הלוח, ולאחר מכן משוך את הלוח למטה כ-two millimeters כדי להבטיח שהגידול נתפס בחוזקה. הדבק את הלוח למיטת בעל החיים. לאחר מכן, הדבק חיישן רפידת נשימה לאזור החזה כדי לנטר את נשימתו של בעל החיים במהלך ההדמיה. כעת הנח את סליל השטח (surface coil) על החלק העליון של אזור הגידול, והדבק אותו היטב למיטת בעל החיים.לאחר מכן, דחפו את מיטת בעל החיים אל תוך סורק ה-MR עד שאתר הגידול יימצא במרכז סליל הנפח. בצעו MRI המשוקלל ל-T2 כדי לאתר את הגידול, ולאחריו MRI המשוקלל ל-T1 עם זוויות היפוך שונות לצורך מיפוי T1. לאחר מכן, עבור הדמיית D-C-E-M-R-I, בצעו MRI המשוקלל ל-T1 עם זווית היפוך קבועה באופן רציף לפני, במהלך ואחרי הזרקת חומר הניגוד ל-MRI המבוסס על גדוליניום.יש לנטר את נשימת בעל החיים וטמפרטורת גופו באופן רציף במהלך ההדמיה. בסיום ההדמיה, יש להוציא את המחט ואת הפרובים האחרים ולהניח את בעל החיים תחת מנורת חימום תוך כדי עיסוי עדין של אזור הבטן התחתונה עד להתעוררותו. ניתן ליישם בהצלחה D-C-E-M-R-I עבור קסנוגרפטים של גידולי לבלב אורתוטופים.בשימוש במודל אזור הייחוס, למשל, מפות ניגודיות אלו מציגות את אזור הגידול בסולם צבעים דקה אחת לפני הזרקת חומר הניגודי ל-MR. ובדקות 5 ו-40 לאחר מכן, כאשר הן מונחות על תמונות MR המשוקללות לפי T2 בסולם אפור. העכבר בניסוי זה נשא גרפה של גידול לבלב אנושי אורתוטופי.עקומות הגברת הניגודיות הללו חושבו כממוצע מאזור הגידול ומאזור השריר הפארא-ורטברלי. מפות kts ו-KEP אלו עבור הגידול מדגימות את קצב הכניסה (wash in) והיציאה (washout) של חומר הניגודיות. בעת ביצוע הליך TCMI זה, חשוב לוודא שהגידול ממוקם מאחורי הקצה העליון של הלוח.

dynamic-contrast-enhanced-magnetic-resonance-imaging-an-orthotopic

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

הסרטון מסביר שיטה כירורגית מדורגת להשתלה אורתוטופית של קטע גידול מתורם סרטני ללבלב של עכברים מושתלים שאינם סרטניים לצורך התפתחות סרטן הלבלב. PDAC מושתל אורתוטופית יכול ללכוד מחדש את המיקרו-סביבה הרקמתית של סרטן הלבלב האנושי מאשר מודלים תת-עוריים קונבנציונליים (SC) בצורה מדויקת יותר.

השתלת גידול הומוגרפט אורתוטופית: טכניקה ליצירת מודלים של עכברי גידול בלבלב

סרטון זה מתאר את הטכניקה של DCE-MRI עבור xenografts גידולי לבלב אורתוטרופיים בעכברים. DCE-MRI היא שיטה לא פולשנית לניתוח כלי דם ברקמת מטרה, ושימושית להערכת תגובת כלי הדם בגידול בעקבות טיפול חדשני. שיטה זו תסייע לחוקרים ליישם DCE-MRI עבור מודלים אורתוטופיים של סרטן מערכת העיכול בעכברים.

DCE-MRI של גידול לבלב אורתוטופי xenografts: שיטה להערכת microvasculature ברקמת גידול המטרה

סרטון זה מדגים מודל אורתוטופי של סרטן הלבלב המשתמש במטריג'ל להעברת תאים מקומית והדמיית ביולומינסנציה in vivo לניטור לא פולשני של התקדמות הגידול. המודל האורתוטופי מתאים הן למודלים סינגניים והן למודלים של קסנוגרפט, וניתן להשתמש בו בניסויים פרה-קליניים כדי לחקור את ההשפעה של טיפולים אנטי-סרטניים חדשניים על צמיחת הגידול הראשוני בלבלב וגרורות.

מודל עכבר סרטן לבלב אורתוטופי ביולומינסנטי: טכניקה לא פולשנית למעקב אחר התקדמות סרטן בעכברים

הבנה משופרת של ביולוגיה של סרטן הלבלב היא צורך קריטי כדי לאפשר הפיתוח של אפשרויות טיפוליות טובות יותר לטיפול בסרטן הלבלב. כדי לענות על צורך זה, אנו מדגימים מודל orthotopic של סרטן הלבלב המאפשר ניטור בלתי פולשני של התקדמות הסרטן...

דגם orthotopic bioluminescent של התקדמות סרטן הלבלב

הליך להשתלת תאי סרטן לבלב פלואורסצנטיים ירוקים המבטאים חלבון פלואורסצנטי (PANC-1 GFP) באופן אורתוטופי לתוך הלבלב של עכברי Balb-c Ola Hsd-Fox1nu כדי להעריך את התקדמות הגידול והגרורות מוצג כאן.

דגם פלורסנט Orthotopic עכבר של סרטן הלבלב

מאמר זה מתאר את הניצול של אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה בעכברים מהונדסים גנטית לסרטן הלבלב. המטרה העיקרית היא לספק הדרכה מפורטת של זיהוי, הערכה של הלבלב גידולים אנדוגני.

ניצול אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה על צג תחילת גידול וצמיחה מודלים מהונדס גנטית לסרטן הלבלב

אנו מתארים פרוטוקול עבור אולטרסאונד השרשה המודרכת של הלבלב הנגזר מוראן של דוטל לבלב שורות תאים ישירות לתוך אתר הגידול הטבעי. גישה זו הביא לגידולים בלבלב לגילוי על ידי סריקת אולטרסאונד בתוך 2-4 שבועות של הזרקה, והקטינה באופן משמעותי את הגידול בפרופורציה של תאים בקיר הצפק לעומת השרשה כירורגית אורתודפית.

אולטרה סאונד-הדרכה אורתודפית של הלבלב מורלין אדנוקרצינומה

בהקשר הקליני, חולים עם סרטן הלבלב מקומי יעברו כריתת לבלב ואחריו טיפול אדג'ובנטי. פרוטוקול זה שדווח כאן נועד לבסס שיטה בטוחה ויעילה של מידול תרחיש קליני זה בעכברים עירומים, באמצעות השתלה אורתוטופית של סרטן הלבלב ואחריו כריתת לבלב דיסטלית וכריתת טבור.

מודל עכבר כריתה אורתוטופי של סרטן הלבלב

אנו מציגים פרוטוקול ליצירת מודל סרטן לבלב אורתוטופי זעיר פולשני על ידי הזרקה מונחית אולטרסאונד של תאי סרטן הלבלב האנושיים וניטור לאחר מכן של צמיחת הגידול in vivo על ידי הדמיית אולטרסאונד.

יצירת קסנוגראפט אורתוטופי של תאים סרטניים בלבלב על ידי הזרקה מונחית אולטרסאונד

אלושתלים אורתוטופיים סינגניים של אדנוקרצינומה צינורית הלבלב (PDAC) משחזרים את הביולוגיה, הפנוטיפים והתגובות הטיפוליות של תת-סוגי מחלות. בשל התקדמות הגידול המהירה והניתנת לשחזור, הם נמצאים בשימוש נרחב במחקרים פרה-קליניים. כאן, אנו מראים שיטות עבודה נפוצות ליצירת מודלים אלה, הזרקת תרביות PDAC מורין סינגני לתוך הלבלב.

Syngeneic Mouse Orthotopic Allografts למודל סרטן הלבלב

פרוטוקול זה משתמש במיטה רב-תאית להדמיית תהודה מגנטית מקבילה (MRI) של עד ארבעה בעלי חיים לזיהוי גידולי אדנוקרצינומה בלבלב במודלים מהונדסים גנטית. פרוטוקול MRI רב-בעלי חיים זה מהיר וחסכוני לזיהוי ומדידת גידולים, ומקל על בחירת בעלי חיים למחקרים פרה-קליניים ומעקב לאורך זמן אחר צמיחת הגידול.

הדמיית תהודה מגנטית רב-בעלי חיים למדידות גידולים במודלים של עכברים סרטן לבלב

חקור הדמיית תהודה מגנטית משופרת ניגודיות דינמית של דגם orthotopic סרטן לבלב עכבר. שיטה זו מאפשרת הערכת מיקרו-וסקולטורה ותגובה לטיפולים בסרטן הלבלב.

הדמיית תהודה מגנטית משופרת ניגודיות דינמית של דגם orthotopic סרטן לבלב עכבר

גלה סרטונים נוספים