מחקר השוואתי של שיטות שיגור תרופות אל האוזן הפנימית עכבר: Bullostomy Versus הזרקת Transtympanic

שתי גישות מיקרו-כירורגיות להעברת תרופות מקומיות לאוזן הפנימית מתוארות כאן ומושוות במונחים של השפעה על פרמטרי שמיעה, ציטוארכיטקטורה של השבלול וביטוי סמנים דלקתיים.

המטרה הכוללת של עבודה זו היא לתאר ולהשוות שתי גישות מיקרו-כירורגיות להעברת תרופות מקומיות לאוזן הפנימית במונחים של השפעה על פרמטרי שמיעה וסמני ציטו-ארכיטקטורת שבלול. הליכים אלה יכולים לסייע לנו לענות על שאלות מפתח בתחום השמיעה, במיוחד בפיתוח מחקרים פרו-כימיים בבעלי חיים. היתרון העיקרי של טכניקות אלה הוא שהן זעיר פולשניות.

וזה מאפשר לחומר להגיע באופן דידקטי לאוזן הפנימית. היישום של טכניקות אלה משתרע לטיפול באובדן שמיעה, מכיוון שההליכים המיקרו-כירורגיים שלו מתאימים ללידה יבשה באוזן התיכונה. הדגמה שקטה של שיטה זו היא קריטית, מכיוון שקשה ללמוד בולוסטומיה והזרקה טרנסטימפנית והן דורשות ידע אנטומי והכשרה כירורגית.

כדי להתחיל, הנח אטם אוזניים באוזן הנגדית של עכבר מורדם כדי לקבל תגובות חד-אוזניות בעיקר. לאחר מכן, הנח את העכבר במצב שכיבה על כרית חימום בתוך תא הנחתת קול. הנח את אלקטרודת המחט התת-עורית החיובית מנירוסטה בקרקפת בין האוזניים מעל קודקוד הגולגולת.

הנח את אלקטרודת הייחוס באזור הפרוטיד מתחת לאפרכסת. לאחר מכן הנח את האלקטרודה הקרקעית באזור הגב, הזנב או הגפה האחורית. בדוק את העכבה החשמלית באלקטרודות החיוביות והשליליות.

ודא שהעכבה נמוכה משלושה קילואוהם. הנח את הרמקול הממולא מראש במרחק קבוע מול האוזן שנבחרה, כאשר מרכז הרמקול מיושר עם תעלת השמע החיצונית. ודא שאין מכשולים בין הרמקול לאוזן, ושהאפרכסת פתוחה לחלוטין.

חבר את פלט תחנת העבודה הדיגיטלית לאנלוגית לרמקול שנבחר. כאן משתמשים ברמקולים חופשיים. חבר מגבר עם רעש נמוך ויחס אות לרעש טוב לכניסה האנלוגית לדיגיטלית.

לאחר מכן התחל בתהליך העברת גירויים אקוסטיים לתעלת השמע החיצונית באמצעות גירויים מוגדרים מראש או אותות חדשים שתוכננו עם התוכנה המתאימה. הצג את הגירויים החל בעוצמה גבוהה והפחתת העוצמה בצעדים של 5 עד 10 דציבלים ברמת לחץ קול. רשום את התגובה החשמלית ב-10 אלפיות השנייה הראשונות לאחר הגירוי, כאשר תגובות ABR מעוררות מופיעות בשש עד שמונה אלפיות השנייה.

השתמש בתוכנה כדי לקבוע את סף ה- ABR כמתואר בחלק הכתוב של הפרוטוקול. לאחר מתן הרדמה על פי פרוטוקולים מאושרים, יש לבדוק כי הושג מישור כירורגי של הרדמה בהיעדר תגובה לצביטה בבוהן והצגת נשימה סדירה. השתמש בקוצץ כדי להסיר את הפרווה במשטח הגחון של הצוואר ולהגן על העיניים מפני קרטיטיס בקרנית בעזרת ג'ל מבוסס הידרוקסי-פרופיל-מתיל-צלולוז.

הנח את העכבר באזור הניתוח הסטרילי במצב שכיבה. נקו את העור בתמיסת חיטוי על בסיס פובידון-יוד וכסו בווילון סטרילי. לאחר שימוש באזמל לביצוע חתך אורך של שני סנטימטרים מהלסת התחתונה לעצם הבריח, הסתכל דרך המיקרוסקופ הניתוחי וזהה את הבלוטות התת-לסתיות.

הפרד את שתי הבלוטות התת-לסתות בעזרת מלקחיים, משוך אותן ומקם את מקור השריר הדיגסטרי בעצב הפנים. לאחר מכן, בצע חתך במקור השריר הדיגסטרי בעזרת מספריים, ומשוך אותו בגחון, וחשוף את ההיבט המדיאלי התחתון הבסיסי של בולה התוף. לאחר מכן, השתמש במחט בגודל 27 כדי לקדוח לתוך הבולה וליצור פתח.

נקו את הדם מהאזור הקדוח בעזרת ספוג ג'לטין נספג. אתר את העורק הסטפדיה בקרום החלון העגול המחובר אליו. בעזרת קטטר בגודל 34 ומזרק מיקרו זכוכית, הזרקו לאט שלושה עד חמישה מיקרוליטר של תמיסת רכב דרך הבולוסטומיה וישירות על נישת החלון העגול כדי למלא אותה.

אטמו את הבולוסטומיה עם טיפה אחת עד שתיים של דבק רקמות. החזר את הבלוטות התת-לסתיות למקומן הראשוני, וסגור את חתכי העור בתפר כירורגי משי 5-0. מרחו חומר חיטוי על בסיס פובידון-יוד או כלורהקסידין סביב החתך כדי למנוע זיהום בפצע.

השאר את העכבר על כרית חימום עד שהוא יחזור להכרה מספקת כדי לשמור על שכיבה עצם החזה. החזירו את בעל החיים לכלוב הביתי רק לאחר שהתאושש במלואו. הנח את העכבר בתנוחת דקוביטוס לרוחב והכן באזור כירורגי ספטי מתחת לבשר השמיעה החיצוני כפי שהוצג קודם לכן.

לאחר ביצוע חתך אורכי של 0.5 ס"מ בחלק האנכי של תעלת האוזן החיצונית, אתר את קרום התוף בעזרת המיקרוסקופ הכירורגי. זהה את ה-pars flaccida העליון ב-pars tensa התחתון, המחולק לחלקים קדמיים ואחוריים על ידי ידית ה-malleus. לאחר מכן, בצע מירינגוסטומיה קטנה בחלק הזנב של ה-pars flaccida, וחתך נוסף ב-pars tensa של קרום התוף כדי לאפשר פינוי אוויר במהלך ההזרקה.

השתמש במיקרו-מזרק זכוכית המחובר לצנתר בגודל 34 כדי להזריק בעדינות 10 עד 15 מיקרוליטר של רכב דרך ה-pars flaccida, קרוב לגומחת החלון העגול, עד שהאוזן התיכונה מלאה בבירור. סגור את חתכי העור בתפר כירורגי משי 5-0 ונקה כפי שתואר קודם לכן. גרף זה מציג סף ABR בעכברי C57BL/6J זכרים בני 8 שבועות בתגובה לגירוי לחיצה לפני הניתוח ושבעה, 14 ו-28 ימים לאחר מיקרו-כירורגיה.

נתוני בולוסטומיה מוצגים בכתום, נתוני הזרקת טרנסטימפניה מוצגים בכחול, ונתונים מבעלי חיים שאינם מנותחים מוצגים באפור. גרף זה מציג את ספי ה-ABR בתגובה לגירויים של פרץ טון בטווח של שמונה עד 40 קילו-הרץ באותה תקופה לאחר מיקרו-כירורגיה. שוב, לא נצפו הבדלים משמעותיים בין גישות בולוסטומיה לגישות טרנס-טימפניות.

מחקרים מורפולוגיים מראים כי הסקאלה אינה מראה שינויים לאחר מסירת הרכב על ידי בולוסטומיה או הזרקה טרנסטימפני, מה שמצביע על כך שאף אחד מההליכים לבדו אינו גורם לנזק. בעת ניסיון הליך הבולוסטומיה, חשוב לזכור לסקור את המבנה הביקורתי והאנטומי המקיף את האוזן התיכונה והפנימית של מכרסמים. בעקבות הליכים אלה, ניתן לבצע טכניקות אחרות.

לדוגמה, דגימת ברלין למחקרים פרמקוקינטיים לאחר פיתוחה, טכניקות אלו סוללות את הדרך לחוקרים בתחום מדעי המוח השמיעתי לחקור טיפולים מקומיים פוטנציאליים במודלים של בעלי חיים, בעיקר במכרסמים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לתת תרופות באוזן התיכונה וכיצד להעריך שמיעה במכרסמים.