שיטת השתלת איון כדי Omentum העכבר

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום השתלת איון כגון השתלת איון לאומנטום. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות לכיוון טיפול בסוכרת מסוג I מכיוון שהומנטום מתגלה מחדש כאתר ערך פוטנציאלי להשתלת איון. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי איים מבודדים מעורבבים עם הידרוג'ל ואת התערובת ממוקמת לתוך כיס omentum של עכבר סוכרתי.

התחל בהכנת שדה אספטי באזור הניתוחי עם חומר סטרילי כגון וילונות וכלים חד פעמיים. מניחים את המכשירים הכירורגיים הסטריליים בשדה האסטרטיק. בחר את איי התורם תחת הסטריאו-מיקרוסקופ באמצעות קצה פיפטה של 200 מיקרוליטר.

עבור כל בעל חיים, לאסוף 450 כדי 500 איונים ולהעביר צינור סטרילי 1.5 מיליליטר הצמד העליון עם 100 microlitres של CMRL 10 66 בינוני. מניחים את הצינור על קרח עד מוכן להשתלה. ברגע שהאיונים נקצרו, הפשיר מטריצת קרום מרתף הידרוג'ל על קרח.

שקל ותייג את כל עכברי הנמען הסוכרתי. לאחר הרדמה של העכבר הראשון על פי פרוטוקול שאושר על ידי המוסד, לבדוק את עומק ההרדמה על ידי מתן קמצוץ בוהן. אם אין רפלקס נסיגה, רמת ההרדמה נכונה לניתוח.

לנהל משחה וטרינר לעיניים כדי למנוע יובש בזמן בהרדמה. ספוגית הבטן עם 70% אתנול. ואז לגלח את השיער מאתר הניתוח.

מכסים את החיה עם וילון סטרילי, ולחטא את האזור עם קרצוף יוד. לאחר שימוש במספריים עיניים כדי ליצור חתך של 4 עד 5 ס"מ לאורך קו האמצע של הבטן, להזיז את המעיים לצד שמאל לכסות עם גזה ספוגה מלוחים כדי למנוע התייבשות במהלך הליך הניתוח. לאחר מכן השתמש במטליות כותנה כדי לחשוף את הקיבה באופן מלא ולאתר את האומנטום מתחת לקיבה.

בשלב זה, הידרוג'ל צריך להיות מופשר לחלוטין. לסובב את הצינור המכיל את איונים ב 200 פעמים g במשך 30 שניות. לאחר הספין, הסר את העל-טבעי.

לאחר מכן שאפו 50 מיקרוליטרים של ההידרוגל הוסיפו אותו לצינור המכיל את האיים ומערבבים בעדינות הימנעות מהיווצרות בועות. לאחר מכן השתמש בשני זוגות מדפים כדי להרים את הקצוות של omentum בעדינות להעלות אותו כדי ליצור חריץ בין קיר הקיבה לבין המעיים. בשלב זה של הניתוח, אדם שני יש צורך לשוכך את תערובת הידרוג'ל איון resuspended עם קצה פיפטה 200 מיקרוליטר ולספק אותו לתוך החריץ.

ודא כי התערובת ממוקמת היטב החריץ על ידי בעדינות להעלות או להוריד את הקצוות של omentum. משלימים את מיקום התערובת תוך שלוש דקות לפני שההידרוגל מתגבש. לאחר ערכות הידרוג'ל, מקפלים את האומנטום כדי לכסות את השתל.

האומנטום ידבק בקיר הקיבה שמסביב כשההידרוגל יתגבש. כאשר הידרוג'ל הוא מוצק לחלוטין, להשתמש במטליות כותנה כדי למקם מחדש את המעיים בחלל הבטן דואג לא לגעת באתר של השתלה. הבא לוותר על 200 microliters של אנטיביוטיקה מתאימה לתוך חלל הבטן כדי למנוע זיהום.

ואז להשתמש 4 O תפר כדי לסגור את הבטן. בדרך כלל אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו כי האתרים של omentum בעכברים הוא קטן ומעייף להעריך. מניחים את העכבר לתוך כלוב התאוששות מחומם עד שהוא חוזר באופן מלא שיקום חיצוני.

למחרת וכל יום לאחר מכן במשך שבוע אחד, להזריק אנטיביוטיקה כמו טיפול מונע לאחר הניתוח. כמו כן, למדוד את רמת הגלוקוז בדם שאינו בצום מדגם דם וריד הזנב באמצעות מד גלוקוז בדם פעם ביום לאחר ההשתלה. בעת השתלה לאומנטום, השתלת איון עשויה להיות פונקציה מאוחרת ולא להגיע לרמת גלוקוז נורמלית לחלוטין בדם במשך שבועיים עד שלושה שבועות.

הרקמה המושתלת אוחזרה מהעכבר המתת דם 14 יום לאחר ההשתלה. כאן השתל נראה כאשכול של גרעינים לאחר הכתמת DAPI. הפונקציונליות של הרקמה המושתלת מתגלה על ידי כתמי שפעת חיסונית בנוגדנים נגד אינסולין.

כתמי H&E מראים את הרקמות המושתלות מוקפות באדיפוזיטים של האומנטום. לאחר השליטה, טכניקה זו יכולה להיעשות בשעה אחת אם היא מבוצעת כראוי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור גם את אומנטום העכבר הוא שביר.

בעקבות הליך זה, שיטות אחרות כמו בשימוש בתיכון שונים, ביצועי MB בכל זה יענה על שאלות מסוימות כמו התפשטות של איון vascuolization ואת הביצועים. לאחר התפתחות זו, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בהשתלה שלהם לחקור את הטיפול בסוכרת מסוג I ביותר מקטע אחד. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה צריך הבנה טובה של איך להשתיל את איונים כדי omentum בעכבר.