Name: משלוח פנים-עורקי של תאי גזע עצביים למוח עכברוש ועכבר: יישום איסכמיה מוחין (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-26T13:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 53 s
Description: למדו שיטת משלוח תוך-עורקי של תאי גזע עצביים למוח לאחר שבץ איסכמי בעכברושים ועכברים. השיטה מאפשרת הפצה רחבה של התאים והישרדותם עד 30 יום, ומציעה פוטנציאל טיפולי משמעותי לשיקום מוחי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה היה נתמך על ידי הבאים: פרס AHA 14SDG20480186 עבור LC, בנושא חדשנות צוות של אוניברסיטת שאנש של הרפואה הסינית 2019-QN07 עבור BZ, ו קנטאקי חוט השדרה והראש פגיעה מחקר אמון גרנט 14-12A עבור KES ו-LC.

<ol><li>Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stroke+research+in+2017%3A+surgical+progress+and+stem-cell+advances%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet.+Neurology%22%5BJournal%5D)">Stroke research in 2017: surgical progress and stem-cell advances.</a> The Lancet. Neurology. 17, 2-3 (2018).</li>
<li>Bliss, T., Guzman, R., Daadi, M., Steinberg, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+transplantation+therapy+for+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Cell transplantation therapy for stroke.</a> Stroke. 38, 817-826 (2007).</li>
<li>Boese, A. C., Le, Q. E., Pham, D., Hamblin, M. H., Lee, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+stem+cell+therapy+for+subacute+and+chronic+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Neural stem cell therapy for subacute and chronic ischemic stroke.</a> Stem Cell Research & Therapy. 9, 154(2018).</li>
<li>Kokaia, Z., Llorente, I. L., Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Customized+Brain+Cells+for+Stroke+Patients+Using+Pluripotent+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Customized Brain Cells for Stroke Patients Using Pluripotent Stem Cells.</a> Stroke. 49, 1091-1098 (2018).</li>
<li>Savitz, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+Stem+Cells+the+Next+Generation+of+Stroke+Therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Are Stem Cells the Next Generation of Stroke Therapeutics.</a> Stroke. 49, 1056-1057 (2018).</li>
<li>Wechsler, L. R., Bates, D., Stroemer, P., Andrews-Zwilling, Y. S., Aizman, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+Therapy+for+Chronic+Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Cell Therapy for Chronic Stroke.</a> Stroke. 49, 1066-1074 (2018).</li>
<li>Muir, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+trial+design+for+stem+cell+therapies+in+stroke%3A+What+have+we+learned%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochemistry+International%22%5BJournal%5D)">Clinical trial design for stem cell therapies in stroke: What have we learned.</a> Neurochemistry International. 106, 108-113 (2017).</li>
<li>Guzman, R., Janowski, M., Walczak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-Arterial+Delivery+of+Cell+Therapies+for+Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Intra-Arterial Delivery of Cell Therapies for Stroke.</a> Stroke. 49, 1075-1082 (2018).</li>
<li>Misra, V., Lal, A., El Khoury, R., Chen, P. R., Savitz, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-arterial+delivery+of+cell+therapies+for+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+and+Development%22%5BJournal%5D)">Intra-arterial delivery of cell therapies for stroke.</a> Stem Cells and Development. 21, 1007-1015 (2012).</li>
<li>Argibay, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraarterial+route+increases+the+risk+of+cerebral+lesions+after+mesenchymal+cell+administration+in+animal+model+of+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Intraarterial route increases the risk of cerebral lesions after mesenchymal cell administration in animal model of ischemia.</a> Scientific Reports. 7, 40758(2017).</li>
<li>Kelly, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplanted+human+fetal+neural+stem+cells+survive%2C+migrate%2C+and+differentiate+in+ischemic+rat+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Transplanted human fetal neural stem cells survive, migrate, and differentiate in ischemic rat cerebral cortex.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 101, 11839-11844 (2004).</li>
<li>Chen, L., Swartz, K. R., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel+microport+technique+for+applications+in+cerebrovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Vessel microport technique for applications in cerebrovascular research.</a> Journal of Neuroscience Research. 87, 1718-1727 (2009).</li>
<li>Fischer, U. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+passage+is+a+major+obstacle+for+intravenous+stem+cell+delivery%3A+the+pulmonary+first-pass+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+and+Development%22%5BJournal%5D)">Pulmonary passage is a major obstacle for intravenous stem cell delivery: the pulmonary first-pass effect.</a> Stem Cells and Development. 18, 683-692 (2009).</li>
<li>Misra, V., Ritchie, M. M., Stone, L. L., Low, W. C., Janardhan, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+therapy+in+ischemic+stroke%3A+role+of+IV+and+intra-arterial+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Stem cell therapy in ischemic stroke: role of IV and intra-arterial therapy.</a> Neurology. 79, 207-212 (2012).</li>
<li>Muir, K. W., Sinden, J., Miljan, E., Dunn, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+delivery+of+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">Intracranial delivery of stem cells.</a> Translational Stroke Research. 2, 266-271 (2011).</li>
<li>Boltze, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Dark+Side+of+the+Force+-+Constraints+and+Complications+of+Cell+Therapies+for+Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">The Dark Side of the Force - Constraints and Complications of Cell Therapies for Stroke.</a> Frontiers in Neurology. 6, 155(2015).</li>
<li>Huang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+noncontact+speckle+contrast+diffuse+correlation+tomography+of+cerebral+blood+flow+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroimage%22%5BJournal%5D)">Noninvasive noncontact speckle contrast diffuse correlation tomography of cerebral blood flow in rats.</a> Neuroimage. 198, 160-169 (2019).</li>
<li>Wong, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuation+of+Cerebral+Ischemic+Injury+in+Smad1+Deficient+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Attenuation of Cerebral Ischemic Injury in Smad1 Deficient Mice.</a> PLoS One. 10, 0136967(2015).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficiency+of+telomerase+activity+aggravates+the+blood-brain+barrier+disruption+and+neuroinflammatory+responses+in+a+model+of+experimental+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Deficiency of telomerase activity aggravates the blood-brain barrier disruption and neuroinflammatory responses in a model of experimental stroke.</a> Journal of Neuroscience Research. 88, 2859-2868 (2010).</li>
<li>Walker, T. L., Yasuda, T., Adams, D. J., Bartlett, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+doublecortin-expressing+population+in+the+developing+and+adult+brain+contains+multipotential+precursors+in+addition+to+neuronal-lineage+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The doublecortin-expressing population in the developing and adult brain contains multipotential precursors in addition to neuronal-lineage cells.</a> The Journal of Neuroscience. 27, 3734-3742 (2007).</li>
<li>Progatzky, F., Dallman, M. J., Lo Celso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+seeing+to+believing%3A+labelling+strategies+for+in+vivo+cell-tracking+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Interface+Focus%22%5BJournal%5D)">From seeing to believing: labelling strategies for in vivo cell-tracking experiments.</a> Interface Focus. 3, 20130001(2013).</li>
<li>Bertrand, L., Dygert, L., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+Ischemic+Stroke+and+Ischemia-reperfusion+in+Mice+Using+the+Middle+Artery+Occlusion+Technique+and+Visualization+of+Infarct+Area%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2017).</li>
<li>Leda, A. R., Dygert, L., Bertrand, L., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Microsurgery+Infusion+Technique+for+Targeted+Substance+Delivery+into+the+CNS+via+the+Internal+Carotid+Artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Mouse Microsurgery Infusion Technique for Targeted Substance Delivery into the CNS via the Internal Carotid Artery.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2017).</li>
<li>Chua, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-arterial+injection+of+neural+stem+cells+using+a+microneedle+technique+does+not+cause+microembolic+strokes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Intra-arterial injection of neural stem cells using a microneedle technique does not cause microembolic strokes.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 31, 1263-1271 (2011).</li>
<li>Potts, M. B., Silvestrini, M. T., Lim, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Devices+for+cell+transplantation+into+the+central+nervous+system%3A+Design+considerations+and+emerging+technologies%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Neurology+International%22%5BJournal%5D)">Devices for cell transplantation into the central nervous system: Design considerations and emerging technologies.</a> Surgical Neurology International. 4, 22-30 (2013).</li>
<li>Duma, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+intracerebroventricular+%28ICV%29+injection+of+autologous%2C+non-engineered%2C+adipose-derived+stromal+vascular+fraction+%28ADSVF%29+for+neurodegenerative+disorders%3A+results+of+a+3-year+phase+1+study+of+113+injections+in+31+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Biology+Reports%22%5BJournal%5D)">Human intracerebroventricular (ICV) injection of autologous, non-engineered, adipose-derived stromal vascular fraction (ADSVF) for neurodegenerative disorders: results of a 3-year phase 1 study of 113 injections in 31 patients.</a> Molecular Biology Reports. 46, 5257-5272 (2019).</li>
</ol>

טיפול בתאי גזע למחלות נוירולוגיות עדיין נמצא בשלב מוקדם של הבדיקה. בעיה אחת גדולה היא שאין שיטה מבוססת למסירה מספקת של ה scs או NSCs לתוך המוח.
למרות אקסודוגני ה scs/NSCs ניתן לזהות במוח בעקבות ורידי (IV), בתוך הצפק (IP) או הזרקת הפנימי/גרם, כל גישת מסירה יש חסרונות. האוכלוסיה הניתן לזיהוי בתוך המוח מוערך מאוד נמוך עם הזרקה היקפית (IV או IP), המייצג רק חלק קטן של התאים הוזרק או מוחדרת. גרם הזרקת תשואות התפלגות מיקוד מאוד, ואולי ישירות לגרום לפציעה במוח2,<sup ...

תא גזע (SC) תרפיה מחזיקה פוטנציאל עצום כטיפול במחלות נוירולוגיות, כולל שבץ, פגיעת ראש ודמנציה1,2,3,4,5,6. עם זאת, שיטה יעילה לספק ה scs אקסוגני למוח החולה נשאר בעייתי2,6,7,8,9,10,11,12,13. ה scs מועברת באמצעות נתיבי אספקה היקפיים, כולל הזרקת העירוי (IV) או הצפק הפנימי (IP), כפופים לסינון מעבר ראשון במחזור המיקרו, במיוחד בריאות, בכבד, בטחול ובשריר8,9,13,14, הגדלת הסיכויים להצטברות תאים באזורים שאינם מטרה. שיטת הזרקת גרם פולשנית תוצאות הנזק רקמת המוח מקומי והפצה מוגבלת מאוד של ה scs ליד האתר הזרקת2,6,8,14,15,16. לאחרונה הקמנו קטטר מבוססי שיטת הזרקה פנים-עורקים לספק נוירוסוגני ה scs (NSCs), אשר מתוארת כאן להחיל מודל מכרסם של שבץ איסכמי מוקד. אנו לגרום ארעי (1 h) איסכמיה-reperfusion פציעה באונה אחת באמצעות חוט גומי מצופה סיליקון לסגר את עורק המוח האמצעי השמאלי (MCA) בעכבר או עכברוש17,18,19. במודל זה יש לנו שנצפו באופן מיוחד כ 75-85% דיכאון של זרימת דם מוחין (cbf) בחצי הכדור הרוחבי עם דופלר לייזר או הדמיה מיוחד לייזר17,19, מניב נוירוזעיות נוירולוגיות בעקביות17,18,19.
למטרות חיסכון בזמן, הווידאו מוגדר לשחק פעמיים את המהירות הרגילה ואת ההליכים כירורגי שגרתי כגון הכנת העור וסגירת הפצע עם תפר השימוש וההתקנה של משאבת מזרק ממונע אינם מוצגים. השיטה של משלוח פנים-עורקי של NSCs מוצג בהקשר של מודל העורק האמצעי של אוטם המוח (MCAO) של שבץ ניסיוני מכרסמים. לכן, אנו כוללים את הליך השבץ הארעי של התהליך כדי להדגים מאוחר יותר כיצד הניתוח השני, הזרקת פנים-עורקים, מבוצע באמצעות האתר הכירורגי הקודם על אותה חיה. הכדאיות של משלוח המועצה לבטחון לאומי פנים-עורקי מודלים שבץ מכרסמים מומחש על ידי הערכת ההפצה והישרדות של NSCs אקסוגני. היעילות של הטיפול במועצה לבטחון לאומי להחליש מחלות מוח ותפקוד נוירולוגי, ידווחו בנפרד.

<table><tbody><tr><td>20 גרם מחט</td><td>בקטון & Dickinson</td><td>BD PrecisionGlide 305175</td><td>הכנת קטטר הזרקה</td></tr><tr><td>26 גרם מחט</td><td>Becton & Dickinson</td><td>BD PrecisionGlide 305111</td><td>הכנת קטטר הזרקה</td></tr><tr><td>27 גרם מחט</td><td>Becton & Dickinson</td><td>BD PrecisionGlide 305136</td><td>הכנת קטטר הזרקה</td></tr><tr><td>4-0 תפר NFS-2 עם מחט</td><td>הנרי שיין בריאות בעלי חיים</td><td>56905</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>6-0 תפר ניילון</td><td>Teleflex/Braintree Scientific</td><td>104-s</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>Accutase</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>7922</td> להב <td>תמיסת ניתוק תאים</td></tr><tr><td></td><td>Bard-Parker</td><td>10</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>מעבדת בופרנורפין-SR</td><td>ZooPharm</td><td>בופרנורפין-SR Lab&reg;</td><td>משככי כאבים (0.6-1 מ"ג/ק"ג על פני 3 ימים)</td></tr><tr><td>ללא סידן/מגניסום PBS</td><td>VWR</td><td>02-0119-0500</td><td>NSC dissociation</td></tr><tr><td>נוגדן DCX</td><td>Millipore</td><td>AB2253</td><td>צביעה חיסונית</td></tr><tr><td>נוגדן GFAP</td><td>Invitrogen</td><td>180063</td><td>צביעה חיסונית</td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>הנרי שיין בריאות בעלי חיים</td><td>50562-1</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>נימה MCAO לעכבר</td><td>ניתוח</td> <td>Doccol</td><td>702223PK5Re</td></tr><tr><td>נימה MCAO לחולדה</td><td>Doccol</td><td>503334PK5Re</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>MRE010 קטטר</td><td>Braintree Scientific</td><td>MRE010</td><td>הכנת קטטר הזרקה</td></tr><tr><td>MRE025</td><td>קטטר Braintree Scientific</td><td>MRE025</td><td>הכנת קטטר הזרקה</td></tr><tr><td>MRE050 קטטר</td><td>Braintree Scientific</td><td>MRE050</td><td>הכנת קטטר הזרקה</td></tr><tr><td>Nu-Tears משחה</td><td>NuLife Pharmaceuticals</td><td>Nu-Tears משחה</td><td>לטיפול בעיניים במהלך ניתוח</td></tr><tr><td>S& מלקחיים T - טיפים SuperGrip JF-5TC כלי מדע עדינים בזווית</td><td></td><td>00649-11</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>S& מלקחיים T - טיפים SuperGrip JF-5TC Straight</td><td>Fine Science Tools</td><td>00632-11</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>Superglue</td><td>Pacer Technology</td><td>15187</td> הכנת משאבת <td>מזרק קטטר הזרקה</td></tr><tr><td></td><td>קנט Scientific</td><td>GenieTouch</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>Tuj1 נוגדן</td><td>Millipore</td><td>MAb1637</td><td>צביעה חיסונית</td></tr><tr><td>דו-רכיבית 5 דקות אפוקסי</td><td>Devcon</td><td>20445</td><td>הכנת קטטר הזרקה</td></tr><tr><td>מספריים קפיצי Vannas</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-08</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>מהדקי כלי דם</td><td>Fine Science Tools</td><td>00400-03</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ</td><td>Zeiss Zeiss</td><td>Axio Imager 2</td><td>מיקרוסקופיה</td></tr></tbody></table>

משלוח פנים-עורקי של תאי גזע עצביים למוח עכברוש ועכבר: יישום איסכמיה מוחין

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

הטיפול בתאי גזע עצביים (למועצה לבטחון לאומי) הוא טיפול חדשני המתעוררים שבץ, פגיעה מוחית טראומטית והפרעות ניווניות. לעומת משלוח תוך גולגולתי, מינהל פנים-עורקי של NSCs הוא פחות פולשני ומייצרת התפלגות מפוזר יותר של NSCs בתוך המוח מבכיצ'ימה. יתר על כן, משלוח פנים-עורקי מאפשר את האפקט הראשון של המעבר במחזור המוח, הפחתת הפוטנציאל להשמנה של תאים באיברים היקפיים, כגון כבד וטחול, סיבוך המשויך זריקות היקפית. כאן, אנו לפרט את המתודולוגיה, בשני עכברים וחולדות, עבור המסירה של NSCs דרך העורק הראשי המשותף (עכבר) או עורק הראש החיצוני (עכברוש) לחצי הכדור השני הצלעות לאחר שבץ איסכמי. באמצעות GFP-התווית NSCs, אנו להמחיש את ההתפלגות הנרחבת השיגה לאורך האונה המסילתית מכרסם ב 1 d, 1 שבוע ו 4 שבועות לאחר משלוח פוסטימזימות, עם צפיפות גבוהה יותר או ליד באתר הפציעה האיסכמי. בנוסף להישרדות ארוכת טווח, אנו מראים עדויות על הבידול של תאים המסומנים ב-GFP ב -4 שבועות. הגישה הפנים-עורקי המתואר כאן עבור NSCs יכול לשמש גם עבור ניהול של תרכובות טיפוליות, ולכן יש ישימות רחבה לפציעה מגוונת של ה-CN ומודלים מחלות על פני מינים רבים.

GFP שכותרתו NSCs זוהו בקלות במוח האיסכמי, בעיקר בחצי הכדור השדרה, במיוחד בתוך penרומבה ולאורך שפת הפציעה (איור 6). הבוחן היה עיוור. במהלך הדמיה וניתוח
לדוגמה, ב-1 ד לאחר ההזרקה, NSCs זוהו בתוך ההיפוקמפוס של העכבר. קבוצת משנה של NSCs הראה ביטוי משותף של הסמן תא העצב הילדותי dcx ב פיתול כישור ה, אפילו בנקודת זמן מוקדמת זו (איור 6a).
ב 10 ד ' אחרי קו (7 ד ' לאחר הזרקת המועצה לבטחון לאומי), אקסוגני GFP-NSCs נצפ...

שיטה לאספקת תאי גזע עצביים, הניתנים להזרקת פתרונות או השעיות, דרך עורק הראש המשותף (עכבר) או העורק הראשי החיצוני (עכברוש) לאחר דיווח על שבץ. תאים מוזרק מופצים בהרחבה ברחבי המוח באתר וניתן לאתרם עד 30 d לאחר המסירה.

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

שבץ מוחי הוא הגורם המוביל לתמותה ונכות ברחבי העולם. למרות תרומבוליזה והסרה כירורגית של העורק כלי הדם המוחי יכול להתבצע בחולים נבחרים, יש עדיין צורך דחוף טיפולים יעילים נגד שבץ. כאן, אנו מדגימים משלוח תוך עורקי מבוסס קטטר של תאי גזע אל חצי הכדור האיסכמי כמשטר פוטנציאלי לטיפול בשבץ.ראשית, אנו מציגים כיצד להכין את קטטר ההזרקה וווים כירורגיים. עיצבנו שני סוגים של קטטרים להזרקה תוך-עורקית. עיצוב אחד משמש להזרקה של פתרון או השעיה שאינה דורשת שטיפה של הצינור.עיצוב שני מאפשר הזרקה של תאי גזע עצביים, ואחריו סומק של נפח מת כדי לספק את הנפח המלא. כדי לבנות קבוצה של קטטרים הזרקה, תצטרך 26 מד ו 20 מחטי מד, אורך 10 עד 15 ס"מ של צנתר MRE 25 ואורך שלושה סנטימטרים של MRE 50 ו MRE 10 קטטרים. חותכים את שני טיפים מחט ללטש את קצה המתכת על נייר זכוכית כדי לפתוח מחדש את הצינור להחליק את הקצוות ולאחר מכן לשטוף עם מים מזוקקים כדי לנקות את משעמם ולשטוף את הפסולת.הדמות מראה קצה סגור של מחט 20 מד לאחר גזירת קצה המחט, אשר נפתח מחדש עם משעמם חלק לאחר ליטוש. תחת מיקרוסקופ, להכניס את המחט 20 מד לתוך סוף צינורות MRE 50. לכופף את המחט 26 מד ולאחר מכן לחדור את הצינורות מתחת לסוף קצה מחט 20 מד.לאבטח את מחט מד 26 עם דבק סופר. ואז להטביע את שני רכזות מחט צינורות אפוקסי לבנות בלוק מוצק כדי לשפר את הכוח. תצטרך גם שלושה ו

intra-arterial-delivery-neural-stem-cells-to-rat-mouse-brain

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

פרוטוקול זה מתאר שיטה שאינה ויראלי מסירת בונה גנטית באזור מסוים של המוח מכרסם החי. השיטה מורכבת הכנה פלסמיד, ייצור micropipette, ניתוח חולדה בילוד הגור, microinjection של לבנות,...

ג&#39;ין משלוח מוח החולדה אחרי לידה על ידי הזרקת Non-חדרית electroporation פלסמיד ו

הדם עצמיים הזרקה מודל של דימום intracerebral בעכברים המתואר פרוטוקול זה משתמש בטכניקת הזרקה כפולה כדי למזער את הסיכון של ריפלוקס הדם במעלה השביל מחט, אין תרופות נגד קרישת דם במערכת שאיבה, ומונע כל שטח מת צינורות להרחבה במערכת.

הזרקת דם עצמיים על דגם דימום intracerebral ספונטנית עכברים

התיכון קשירת מוחין (MCA) עורק היא טכניקה כדי ללמוד איסכמיה מוחית מוקד במודלים של בעלי חיים. בשיטה זו, עורק המוח האמצעי הוא נחשף על ידי craniotomy ו ligated על ידי צריבה. שיטה זו נותנת כרכים האוטם לשעתקו מאוד והגדילה שלאחר הניתוח שיעורי ההישרדות בהשוואה לשיטות אחרות שקיימות.

היישום של קשירת העורקים התיכון הקבע מוחין העכבר

מודלים פרה-קליניים של דימום תוך מוחי משמשים לחיקוי היבטים מסוימים של מחלה קלינית. לפיכך, ניתן לחקור מנגנוני פציעה ואסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות. בפרוטוקול זה מתוארים שני מודלים של דימום תוך מוחי, זריקות תוך-סטריאטליות (גרעיני בסיס) של דם אוטולוגי או קולגנאז.

הזרקת Intrastriatal של עצמי בדם או קלוסטרידיאל Collagenase כמודלים Murine של Intracerebral שטף דם

מאמר זה מתאר את המתודולוגיה לניהול תקופות קצרות של היפוקסיה לסירוגין לגורי עכבר או עכברוש לאחר לידה היום 1-8. גישה זו ביעילות מעוררת רמה חזקה רקמה "תחול השפעה" על תאים עצביים בתרבית שנקצרים בתוך 30 דקות של חשיפת היפוקסיה.

משלוח<em&gt; In vivo</em&gt; חריפה לסירוגין היפוקסיה בילוד מכרסמים לתא תרבויות עצבית אב נגזרות אזור ראש Subventricular

על מנת לחקור ארגון מחדש של המוח בתנאים פתולוגיים השתמשנו במשאבות זעירות להעברת חלבון ישירה למוח תוך עקיפת מחסום הדם-מוח. לאחר מכן מוזרקים עוקבי דרכי כדי לחקור שינויים בקישוריות המוח בהשפעת החלבון.

השרשה של Miniosmotic משאבות ומשלוח של קליעים נותבים בדרכי לחקר מוח בארגון מחדש תנאי pathophysiological

תאי גזע הם מבטיחים לספקים טיפוליים לטיפול בגידולים במוח בשל הטרופיזם של הגידול הפנימי שלהם. לא פולשני אינטראנסלי תא גזע המסירה עוקף את מחסום דם מוח ומראה פוטנציאל חזק לתרגום קליני. מאמר זה מסכם את העקרונות הבסיסיים של אספקת תאי גזע אינראנסאלי במודל עכבר של גליומה.

אספקה ​​אינטראנסלית של תאים בתאי גזע כדי גליובלסטומה במודל עכבר

כאן, אנו מתארים שיטה להעברת תרופות למערכת העצבים המרכזית העכברוש על ידי שתילת קטטר לתוך החלל המותני הפנימי של עמוד השדרה. אנו מתמקדים במסירת מחלת האנטי-הגיונית, למרות ששיטה זו מתאימה גם לאספקה של שיטות טיפוליות אחרות.

משלוח פנימי של אנטי-סנס וליגונו, במערכת העצבים המרכזית של חולדה

תאי גזע נחקרים ללא הרף כטיפולים פוטנציאליים עבור אנשים עם נזק שריר הלב, עם זאת, הכדאיות והשמירה שלהם ירד בתוך רקמה פצועה יכול להשפיע על היעילות שלהם לטווח ארוך. בכתב יד זה אנו מתארים שיטה חלופית למשלוח תאי גזע במודל מורין של פגיעה בהתרככיה.

אספקה תוך-תוך-קרדיאלית מושהית של תאי גזע לאחר פציעת איסכמיה רפרציה במודל מורין

תיקון עורק התרדמה במודל עכברי לאחר הזרקה מחזיר את זרימת הדם לעורק מבלי להשפיע לרעה על פיזור החומר המוזרק. תיקון אתר ההזרקה מאפשר זריקות עוקבות דרך אותו עורק ומונע איסכמיה מוחית בזני עכברים חסרי מעגל שלם של וויליס.

הקלה על הזרקות חוזרות תוך קרוטיד במודלים של עכברים על ידי טכניקת תיקון אתר הזרקה חדשנית

למדו שיטת משלוח תוך-עורקי של תאי גזע עצביים למוח לאחר שבץ איסכמי בעכברושים ועכברים. השיטה מאפשרת הפצה רחבה של התאים והישרדותם עד 30 יום, ומציעה פוטנציאל טיפולי משמעותי לשיקום מוחי.

משלוח פנים-עורקי של תאי גזע עצביים למוח עכברוש ועכבר: יישום איסכמיה מוחין

גלה סרטונים נוספים