Name: מודל השתלת הינדימבה הטרוטופית חלקית בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-09T14:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: למד את מודל השתלת הינדימבה ההטרוטופית בחולדות לחקר תגובות חיסוניות ושימור רקמות. הפרוטוקול הניתוחי המפורט מסייע לאימון מנתחים ולהערכת השתלות VCA לטווח קצר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי משרדו של עוזר שר ההגנה לענייני בריאות באמצעות תוכנית המחקר הרפואי בהנחיית הקונגרס תחת פרס מס '. W81XWH-17-1-0680. דעות, פרשנויות, מסקנות והמלצות הן של המחברים ואינן בהכרח מאושרות על ידי משרד ההגנה.

כל בעלי החיים קיבלו טיפול הומני בהתאם למדריך NIH לטיפול ושימוש בחיות מעבדה. הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC-protocol 2017N000184) והמשרד לבדיקת שימוש בבעלי חיים (ACURO) אישרו את כל הפרוטוקולים של בעלי חיים. חולדות לואיס זכר מלידה (250-400 גרם) שימשו לכל הניסויים.
1. ניתוח
<ol><li>תירדים את חולדות לואיס באמצעות שאיפת איזופלוריין. לגרום להרדמה עם 5% איזופלוראן בתא האינדוקציה, ולשמור על הרדמה עם 1.5-3% שאיפת איזופלוראן דרך חרוט נשימה.</li>
	<li>יש למרוח חומר סיכה לעיניים לפני הניתוח בהליכי הישרדות. מגלחים את האתר הכירורגי, מטפלים בקרם דפילטורי, משפשפים ווילונות עם וילונות סטריליים.</li>
	<li>אשר הרדמה מלאה עם בדיקת צביטת הבוהן לפני ההסתה באופן קבוע במהלך ההליך. נטר את קצב הלב והנשימה לאורך כל ההליך. לכל הניתוחים, יש לשמור על תנאים סטריליים באמצעות מכשירים סטריליים, אספקה, וילונות וכפפות. עיין בטבלת החומרים לקבלת רשימת הכלים המשמשים להליכים.</li>
</ol>2. רכש חלקי של זכות תורם
<ol><li>לעשות פירוק היקפי של העור מעל הקרסול בשליש הדיסטלי של הרגל.</li>
	<li>שלד וצרוב את העורק הספני ואת הענף הסופי של העורק הפופליטי באמצעות מלקחיים דו קוטביים. לצרוב ולחתוך את הגסטרוקנמיוס, סולאוס, טיביאליס, שרירי עצם הירך עד לעצם הטיבית נחשפת.</li>
	<li>בצע 2.5 ס"מ קיסם בקמט מפשעתי ימין. לנתח את כרית השומן מפשעתי ולנטרל אותו distally לחשוף את כלי הירך. השתמש מפסק fishhook כדי לתפוס את הרצועה המעשרתית ואת מלקחיים הידוק להחזיק את כרית השומן מפשעתית distally. הערה: כרית השומן המ מפשעתי כלולה בקציר הגפה החלקית.</li>
	<li>לנתח את כלי הירך, להתאים אישית ענפי מרפי (ענפים בטחוניים שריריים עמוקים הממוקמים בדרך כלל באמצע הדרך בין הרצועה המגינית לענף האפיגסטרי), וליגת עם 8-0 קשרי ניילון.</li>
	<li>הפריניזציה החולדה התורמת עם 100 IU / קילוגרם הפרין, מוזרק בווריד גב הפין באמצעות מחט 27.5 G.</li>
	<li>השלם את רסיס העור סביב הירך.</li>
	<li>לצרוב את שרירי הזרוע ואת שרירי gluteus superficialis באמצעות מלקחיים דו קוטביים. לצרוב ולחתוך את העצב הסיאטי באורך הירך האמצעי. לחשוף את עצם הירך בסמיכות ברמה של פסגת הירך האחורית. הערה: שרירי אדקטור ושרירי הארבע ראשי נשארים מחוץ לרכש. הפדיקור המנומנם נשמר.</li>
	<li>כלי הירך ליגייט עם 8/0 קשרי ניילון ברמה של הרצועה המגינית. בצע עורקים על עורק הירך ממש מתחת לקשירה ולהרחיב כדי לאפשר החדרה של אנגיו-קטטר 24 G.</li>
	<li>לצרוב ולחתוך את השריר הנותר מתחת לפדיקור, לחשוף את הצד האחורי של עצם הירך.</li>
	<li>חותכים את השוקה ועצם הירך באמצעות חותך עצם קרוב ומנוצל ככל האפשר, בהתאמה (באורך בינוני).</li>
	<li>לשטוף את אחורי חלקית עם 2 מ"ל של תמיסת מלח הפרין (100 IU / mL) כדי להשיג זרימה ורידית ברורה. יש לאחסן על הקרח בגאזה סטרילית עד להעברת מיקרו-כלי דם(איור 1).</li>
	<li>בעוד החיה נמצאת תחת הרדמה כללית, לבצע המתת חסד על ידי דממה עד החיה מראה שום סימן של חיים (אין תנועה נשימתית ואין פעימות לב).</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62586/62586fig01.jpg"> איור 1: עכברוש שנקטף חלקית. אנגיוקט 24 גרם מוכנס לעורק הירך, מוכן להעברת מיקרו-וסקולרית הטרוטופית. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62586/62586fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.</a>
3. ניתוח נמען
<ol><li>לפני החתך, לגלח את החלק האחורי של הצוואר, ולנהל buprenorphine 0.01-0.05 מ"ג / קילוגרם תת עורית. מניחים את החולדה בתנוחה על כרית חימום.</li>
	<li>בצע 2.5 ס"מ קיסם בקמט מפשעתי ימין. לנתח את כרית השומן מפשעתי ולהישען אותו distally לחשוף את כלי הירך. השתמש וו כדי לבטל את הרצועה המעשרית ואת מלקחיים הידוק להחזיק את כרית השומן מפשעתית distally.</li>
	<li>לנתח את כלי הירך, להתאים אישית את ענפי מרפי, ולגבש עם קשרי ניילון 8/0.</li>
	<li>ליגת את שני כלי הדם מעל כלי האפיגסטרי באמצעות 8/0 קשרי ניילון. מניחים מהדקי קירוב בסמיכות ומרחיבים את קצות כלי השיט; יש לשטוף עם תמיסת מלח הפרין.</li>
	<li>לעשות חתך באגף השמאלי מעל הירך, וליצור כיס תת עורי עם מנהרה תת עורית לקמט מפשעתי. הערה: ההסתה נעשית מעל טווח התנועה של הירך כדי להבטיח כי החיה שומרת על תנועה אחורית נורמלית. בנוסף, שמירה על גשר עורי בין סבך השתל לאתר העברת המיקרו-כלי דם מאפשרת קיבוע טוב יותר של השתל(איור 2).</li>
	<li>מניחים את החלק הפרוקסימלי של הגפה החלקית ואת כרית השומן המשתנה דרך המנהרה התת עורית להעברת מיקרו וסקולריים. בצע anastomoses ורידים ועורקים באמצעות תפרי ניילון 10/0. הסר את שני מלחצי הקירוב, ובחן revascularization של האיבר. בצע "בדיקת חליבה" על שני כלי הדם כדי להעריך את הפטישות של כל anastomosis. הערה: שמונה עד תשעה תפרים נחוצים בדרך כלל עבור anastomosis ורידים, 6 תפרים בממוצע עבור anastomosis עורקים.</li>
	<li>לעשות קיסם עור אורך בצד המתיווך של הגפה המושתלת, ולהכניס את השתל. הסר עור עודף של השתל, ולסגור את הפצע עם תפרים נפרדים תפר ריצה באמצעות תפרים 4/0 נספג.</li>
	<li>תפרו יחד את רפידות השומן המשתנה של הגפה המושתלת ואת המטופל באמצעות שני תפרים נספגים נפרדים, וסגרו את הקמט המשרתי בסוף ממש לאחר בדיקה אחרונה של אנסטומיזים מיקרווסקולריים. הערה: רפידות שומן מפשעתיות נתפרות בחוזקה כדי להוסיף שכבת הגנה של שומן מעל anastomoses ולהבטיח מיקום מאובטח של השתל ואת הפדיקור שלה. סגירה קפדנית עדיפה על ריפוי פצעים; זה גם מונע דימום שיורית מהפצע ומקטין את הסיכון של השחתה עצמית.</li>
	<li>לפצות על אובדן נוזלים תת עורית עם 1-3 מ"ל של מלוחים על פי כמות הדימום perioperative.</li>
	<li>מניחים צווארון אליזבתני סביב צוואר החיה, ומחילים 2 תפרים רופפים על העור כדי לשמור עליו בתנוחה הנכונה.</li>
	<li>הפסיקו את שאיפת האיזופלוראן, ועקבו אחר החיה ברציפות על משטח התחממות עד להכרה מלאה ואמבולטורית.</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62586/62586fig02.jpg"> איור 2: תמונה פריופרטיבית לפני תחילת הגפה האוסטאומיו-עורית. גשר עורי של כ 1 ס"מ נשמר בין חתך קמט מפשעתי לבין תחילת השתל מעל הירך. השתל ממוקם מתחת לגשר, שמירה על יציבות להעברת מיקרווסקולרי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62586/62586fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.</a>
4. טיפול לאחר הניתוח
<ol><li>לפקח על החיה פעמיים ביום במשך 72 שעות, ולאחר מכן פעם ביום עד יום לאחר הניתוח (POD) 7, ולאחר מכן פעמיים בשבוע. הערה: יש להתאים את הניטור למצב החיה והשתל (עיניים חיוורות עשויות לדרוש נוזלים משלימים, כתמי פורפירין כאינדיקטור לכאב בעלי חיים, צבע / טמפרטורה של שתל חריג), ויש לדון בטיפול נוסף עם הווטרינר. דיור יחיד נדרש לחולדות המקבל במהלך כל תקופת הלימודים כדי למנוע כל נזק לשתל.</li>
	<li>בצע משככי משכך משכך עם הזרקה תת עורית של buprenorphine ו/או תרופה אנטי דלקתית לא סטרואידים על פי הנחיות IACUC.</li>
	<li>להעריך את השתל, ולבצע בדיקה גופנית מדי יום עם תמונות באמצעות אותו מכשיר. הערה: שימוש בקרם להסרת שיער על עור השתל מועיל להערכה טובה יותר של צבע העור של ההשתלה.</li>
</ol>

<ol><li>Lanteiri, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feasibility%2C+reproducibility%2C+risks+and+benefits+of+face+transplantation%3A+a+prospective+study+of+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes.</a> American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).</li>
<li>Park, S. H., Eun, S. C., Kwon, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hand+transplantation%3A+current+status+and+immunologic+obstacles%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Hand transplantation: current status and immunologic obstacles.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 17 (1), 97-104 (2019).</li>
<li>Cetrulo, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Penis+transplantation%3A+first+US+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Penis transplantation: first US experience.</a> Annals of Surgery. 267 (5), 983-988 (2018).</li>
<li>Grajek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+complex+allotransplantation+of+neck+organs%3A+larynx%2C+trachea%2C+pharynx%2C+esophagus%2C+thyroid%2C+parathyroid+glands%2C+and+anterior+cervical+wall%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">First complex allotransplantation of neck organs: larynx, trachea, pharynx, esophagus, thyroid, parathyroid glands, and anterior cervical wall: a case report.</a> Annals of Surgery. 266 (2), 19-24 (2017).</li>
<li>Pribaz, J. J., Caterson, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+and+limitations+of+conventional+autologous+reconstruction+of+the+head+and+neck%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Craniofacial+Surgery%22%5BJournal%5D)">Evolution and limitations of conventional autologous reconstruction of the head and neck.</a> Journal of Craniofacial Surgery. 24 (1), 99-107 (2013).</li>
<li>Lipson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+limb+transplantation+in+the+rat.+I.+Results+with+syngeneic+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Vascularized limb transplantation in the rat. I. Results with syngeneic grafts.</a> Transplantation. 35 (4), 293-299 (1983).</li>
<li>Lipson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+limb+transplantation+in+the+rat.+II.+Results+with+allogeneic+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Vascularized limb transplantation in the rat. II. Results with allogeneic grafts.</a> Transplantation. 35 (4), 300-304 (1983).</li>
<li>Adamson, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+model+of+hindlimb+osteomyocutaneous+flap+for+the+study+of+tolerance+to+composite+tissue+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">A modified model of hindlimb osteomyocutaneous flap for the study of tolerance to composite tissue allografts.</a> Microsurgery. 27 (7), 630-636 (2007).</li>
<li>Arav, A., Friedman, O., Natan, Y., Gur, E., Shani, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+hindlimb+cryopreservation+and+transplantation%3A+a+step+toward+%22organ+banking%22%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Rat hindlimb cryopreservation and transplantation: a step toward "organ banking".</a> American Journal of Transplantation. 17 (11), 2820-2828 (2017).</li>
<li>Gok, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+ex-situ+limb+perfusion+system+for+a+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22ASAIO+Journal%22%5BJournal%5D)">Development of an ex-situ limb perfusion system for a rodent model.</a> ASAIO Journal. 65 (2), 167-172 (2019).</li>
<li>Gok, E., Rojas-Pena, A., Bartlett, R. H., Ozer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+skeletal+muscle+metabolomic+changes+associated+with+static+cold+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Rodent skeletal muscle metabolomic changes associated with static cold storage.</a> Transplantation Proceedings. 51 (3), 979-986 (2019).</li>
<li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Research.+Part+C%2C+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Research. Part C, Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li>
<li>Fleissig, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+heterotopic+hindlimb+osteomyocutaneous+flap+model+in+the+rat+for+translational+vascularized+composite+allotransplantation+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Modified heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap model in the rat for translational vascularized composite allotransplantation research.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (146), e59458(2019).</li>
<li>Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+hindlimb+allotransplantation+in+rats%3A+an+alternative+model+for+immunological+research+in+composite-tissue+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation.</a> Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).</li>
<li>Jang, Y., Park, Y. E., Yun, C. W., Kim, D. H., Chung, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vest-collar+as+a+rodent+collar+to+prevent+licking+and+scratching+during+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">The vest-collar as a rodent collar to prevent licking and scratching during experiments.</a> Lab Anim. 50 (4), 296-304 (2016).</li>
<li>Kern, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+rodent+orthotopic+forelimb+transplantation+model+that+allows+for+reliable+assessment+of+functional+recovery+resulting+from+nerve+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">A novel rodent orthotopic forelimb transplantation model that allows for reliable assessment of functional recovery resulting from nerve regeneration.</a> American Journal of Transplantation. 17 (3), 622-634 (2017).</li>
<li>Perez-Abadia, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-dose+immunosuppression+in+a+rat+hind-limb+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+International%22%5BJournal%5D)">Low-dose immunosuppression in a rat hind-limb transplantation model.</a> Transplant International. 16 (12), 835-842 (2003).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+hind-limb+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Orthotopic hind-limb transplantation in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (41), e2022(2010).</li>
<li>Fleissig, Y. Y., Beare, J. E., LeBlanc, A. J., Kaufman, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+the+rat+hind+limb+transplant+as+an+experimental+model+of+vascularized+composite+allotransplantation%3A+Approaches+and+advantages%5BTitle%5D)+AND+%22SAGE+Open+Medicine%22%5BJournal%5D)">Evolution of the rat hind limb transplant as an experimental model of vascularized composite allotransplantation: Approaches and advantages.</a> SAGE Open Medicine. 8, 2050312120968721(2020).</li>
<li>Lindboe, C. F., Presthus, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+denervation%2C+immobilization+and+cachexia+on+fibre+size+in+the+anterior+tibial+muscle+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Effects of denervation, immobilization and cachexia on fibre size in the anterior tibial muscle of the rat.</a> Acta Neuropathologica. 66 (1), 42-51 (1985).</li>
<li>Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+limb+allotransplantation+model+to+study+skin+rejection+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat.</a> Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).</li>
</ol>

למחברים אין גילויים.

מודלים להשתלת גפיים אורתוטופיים במכרסמים תוארו בספרות15,16,17; עם זאת, הם דורשים תיקון עצבים, חיבור מחדש של השרירים, אוסטאוסינתזה מושלמת של עצם הירך, אשר יכול להיות צעד קשה מאוד. מודלים אלה קשורים גם עם שיעור תחלואה ותמותה גבוה יותר במכרסמים14, במיוחד בטווח הקצר מעקב כמו התאוששות של פונקציה נורמלית של אחורי מושתל יכול לקחת כמה חודשים18. עם זאת, הם מאפשרים הערכה ארוכת טווח של תפקוד ...

במהלך שני העשורים האחרונים, VCA התפתח כטיפול מהפכני עבורחוליםהסובלים עיוות חמור כולל פנים 1 , קטיעות הגפיים העליונות2,הפין3,ופגמים מורכבים אחרים ברקמה4,5. עם זאת, ההשלכות של דיכוי חיסוני לכל החיים עדיין מעכבות יישום רחב יותר של ניתוחי שחזור מורכבים אלה. מחקר בסיסי חיוני לשיפור אסטרטגיות נגד דחייה. הגדלת זמן שימור VCA חיונית גם כדי לשפר את לוגיסטיקת ההשתלה ולהגדיל את מאגר התורמים (כמו תורמי VCA חייבים למלא יותר קריטריונים מאשר תורמי איברים מוצקים, כולל גוון העור, גודל אנטומי, מין). בהקשר זה, השתלות גפי חולדה נמצאים בשימוש נרחב במחקרים על הדחייה החיסונית של allografts6,7, פרוטוקולי אינדוקציהסובלנות חדשנית 8, ומחקרי שימור9,10,11. לפיכך, מודלים VCA אלה הם מרכיב מפתח לשלוט במחקר תרגום VCA.
מדפים אוסטאומיו-עוריים תוארו בספרות כמודלים אמינים לחקר VCA בחולדות8,12,13,14. למרות השתלות אורתוטופיות בכל הגפיים מאפשרות הערכה ארוכת טווח של תפקוד השתל, זהו הליך גוזל זמן הקשור לתחלואה גבוהה יותר לאחר הניתוח ושיעורי תמותה14. לעומת זאת, מודלים להשתלת גפיים הטרוטופית אינם פונקציונליים, אך מאפשרים מחקרים לשחזור ב- VCA. תוצאות לאחר הניתוח ניתן לצפות באופן אמין לפני תחילתו של מחקר השתלת VCA חולדה. מחקר זה מדווח על מודל השתלת דש אוסטאוטומיו-עורית חלקית בחולדה הכולל תוצאות וסיבוכים אפשריים תכופים שיכולים להתעורר תוך ניתוחית ולאחר הניתוח במהלך תקופת מעקב של שלושה שבועות.

<table><tbody><tr><td>24 GA אנגיוקטטר</td><td>BD Insyte Autoguard</td><td>381412</td><td></td></tr><tr><td>תפר 4-0 תפר מונופילמנט שחור שאינו נספג</td><td>Ethicon</td><td>1667</td><td>משמש לתפירת הצווארון האלקטרוני לחלק האחורי של הצוואר</td></tr><tr><td>4-0 תפר מצופה Vicryl Plus אנטיבקטריאלי</td><td>Ethicon</td><td>VCP496</td><td></td></tr><tr><td>Adson רקמות מלקחיים, 11 ס"מ, 1 x 2 שיניים עם פלטפורמת קשירה</td><td>ASSI ASSI</td><td>. </td><td></td></tr><tr><td>ATK26426 מיתרים דו קוטביים</td><td>ASSI</td><td>228000C</td><td></td></tr><tr><td>מונופילמנט פוליאמיד שחור USP 10-0, 4 מ"מ 3/8C</td><td>AROurgical</td><td>T04A10N07-13</td><td>משמש לביצוע האנסטומוזות המיקרו-וסקולריות</td></tr><tr><td>בופרנורפין HCl</td><td>Pharmaceutical, Inc</td><td>42023-179-01</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מרחיבים</td><td>כלים מדעיים עדינים (FST)</td><td>18131-12</td><td></td></tr><tr><td>מספריים לניתוח 15 ס"מ, ידית עגולה בקוטר 8 מ"מ, להב מחודד דק ישר 7 מ"מ, דוגמת ליפשולץ</td><td>אסי</td><td>אסי. </td><td></td>SAS15RVL</tr><tr><td>מיקרו מהדקים כפולים 5.5 x 1.5 מ"מ</td><td>כלים מדעיים עדינים (FST)</td><td>18040-22</td><td></td></tr><tr><td>צווארון אליזבתני</td><td>Braintree Scientific</td><td>EC-R1</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים באורך 13.5 ס"מ, ידית שטוחה, רוחב 9 מ"מ קצוות ישרים קוטר 0.1 מ"מ (x2)</td><td>אסי</td><td>אסי. JFL31</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט מיקרו Halsey</td><td>כלים מדעיים עדינים (FST)</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת שטיפה למנעול הפרין, USP, 100 יחידות/מ"ל</td><td>BD PosiFlush</td><td>306424</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Patterson וטרינרי</td><td>14043-704-06</td><td></td></tr><tr><td>תכשיטנים מלקחיים דו קוטביים נון סטיק 11 ס"מ, קצה מחודד ישר, קוטר קצה 0.25 מ"מ</td><td>ASSI</td><td>ASSI. </td><td></td>BPNS11223</tr><tr><td>כוכב בודד נשאר אלסטי</td><td>CooperSurgical</td><td>3314-8G</td><td>משמש לנסיגת הרצועה המפשעתית לדיסקציה של כלי הירך</td></tr><tr><td>מחזירי כוכב בודד לשמירה עצמית</td><td>CooperSurgical</td><td>3301G</td><td></td></tr><tr><td>המוסטטים מיקרו-יתושים</td><td>כלים מדעיים עדינים (FST)</td> <td>13010-12</td><td>משמשים לנסיגת כרית השומן המפשעתית דיסטלית</td></tr><tr><td>מחזיק מחט, ידית עגולה 15 ס"מ, קוטר 8 מ"מ, לסת מעוקלת סופר קוטר קצה 0.2 מ"מ, ללא מנעול</td><td>אסי</td><td>אסי. B1582</td><td></td></tr><tr><td>תפר ניילון מונולפילמנט שחור 8-0, 6.5 מ"מ 3/8c</td><td>אתילון</td><td>2808G</td><td>משמש לקשירת ענפים נלווים על כלי הירך</td></tr><tr><td>קיזוז ציפורני עצם</td><td>כלים מדעיים עדינים (FST)</td> <td>16101-10</td><td></td></tr><tr><td>S& מהדקי כלי דם T 5.5 x 1.5 מ"מ</td><td>כלים מדעיים עדינים (FST)</td><td>00398-02</td><td></td></tr><tr><td>מספריים וולטון</td><td>כלים מדעיים עדינים (FST)</td><td>14077-09</td><td></td></tr></tbody></table>

מודל השתלת הינדימבה הטרוטופית חלקית בחולדות

Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats

הקצאות מרוכבים וסקולריים (VCA) מייצגות את אפשרות השחזור המתקדמת ביותר עבור חולים ללא אפשרויות כירורגיות אוטולוגיות לאחר פגם מורכב ברקמה. השתלות פנים ויד שינו את חייהם של מטופלים מעוותים, והעניקו להם איבר חברתי אסתטי ותפקודי חדש. למרות התוצאות המבטיחות, VCA עדיין לא מתפקד כראוי עקב תחלואה חיסונית לכל החיים וסיבוכים זיהומיים. החולדה היא מודל חייתי אידיאלי למחקרי ויוו החוקרים מסלולים אימונולוגיים ומנגנוני דחייה של השתלים. חולדות נמצאות בשימוש נרחב גם בטכניקות שימור שתלים מרוכבים חדשניים, כולל זלוף ומחקרי הקפאה. מודלים המשמשים ל- VCA בחולדות חייבים להיות ניתנים לשחזור, אמינים ויעילים עם תחלואה ותמותה נמוכות לאחר הניתוח. הליכי השתלת גפיים הטרוטופיים עומדים בקריטריונים אלה וקלים יותר לביצוע מאשר השתלות גפיים אורתוטופיות. שליטה במודלים מיקרוכירורגיים של מכרסמים דורשת ניסיון מוצק במיקרו-כירורגיה ובטיפול בבעלי חיים. להלן הוא דיווח מודל אמין לשחזור של השתלת דש אוסטאומיו-עורית הטרוטופית חלקית בחולדות, התוצאות לאחר הניתוח, ואת האמצעים למניעת סיבוכים פוטנציאליים.

במחקר יחיד מפעיל זה, 30 השתלות גפיים חלקיות הטרוטופיות סינגני בוצעו. הצלחה הוגדרה ביום 21 לאחר הניתוח כהיעדר כישלון VCA או סיבוכים הדורשים המתת חסד. ההתפתחות הרגילה של השתל מיוצגת באיור 3. משך הזמן הממוצע לרכש חלקי של גפיים ושתלים בנמען היה 35 ו-105 דקות, בהתאמה; זמן האיסכמיה הממוצע היה 105 דקות. במהלך המעקב, שני סוגים של סיבוכים התרחשו(טבלה 1)- מוקדם או מאוחר. חלקם נזקקו להמתת חסד, אחרים חולצו, כולם נדונו עם וטרינרי הצוות(לוח 2). מחקר זה מדווח על הניסיון וה...

מאמר זה מציג פרוטוקול השתלת דש אוסטאומיו-עורית הטרוטופית חלקית בחולדות ותוצאותיו הפוטנציאליות במעקב אמצע הטווח.

Vascularized composite allotransplantations (VCA) represent the most advanced reconstruction option for patients without autologous surgical possibilities ...

אנו מציגים מודל כירורגי אמין ושחזורי של השתלת אחורית הטרוטופית בחולדות. טכניקה זו אידיאלית למחקרים קצרי טווח על שימור או דחייה חיסונית ב- VCA. תיאור שלב אחר שלב יאפשר לחנכים לשלוט במהירות בניתוח.כדי להתחיל, לבצע חבטה היקפית על העור מעל הקרסול בשליש הדיסטלי של הרגל. שלד וצרוב את העורק הספני ואת הענף הסופי של העורק הפופליטי באמצעות מלקחיים דו קוטביים. לצרוב ולחתוך את gastrocnemius, סולאוס, tibialis, שרירי עצם הירך שרירים עד העצם tibial נחשף.הפוך 2.5 ס"מ חתוך בקמט מפשעתי ימין ולנתק את כרית השומן מפשעתי. השתמש במפסק קרס דגים כדי לתפוס את הרצועה המעשרית. החזק את כרית השומן מפשעתית distally עם מלקחיים הידוק ולבטל את כרית השומן כדי לחשוף את כלי הירך.לנתח את כלי הירך, להתאים אישית את ענפי מרפי, ולגבש עם קשרי ניילון 8/0. הפריניזציה של חולדת התורם על ידי הזרקת הפרין בווריד הפין תוך שימוש במחט 27.5 מד. השלם את רסיס העור סביב הירך.השתמש במלקחיים הדו קוטביים כדי לצרוב את שרירי הירך ואת שרירי gluteus superficialis, ולאחר מכן לצרוב ולחתוך את העצב הסיאטי באורך אמצע עצם הירך. לחשוף את עצם הירך בסמיכות ברמה של פסגת הירך האחורית ולכסות את כלי הירך עם קשרי ניילון ברמה של הרצועה המגינית. בצע עורקים על עורק הירך ממש מתחת לקשירה ולהרחיב כדי להכניס את אנגיוקטטר 24 מד.לצרוב ולחתוך את השריר הנותר מתחת לפדיקור כדי לחשוף את הצד האחורי של עצם הירך. השתמש בחותך העצם כדי לחתוך את השוקה בקרבת מקום ולחתוך את עצם הירך בצורה מנומרת ככל האפשר. לשטוף את אחורי החלקי עם שני מיליליטר של תמיסת מלח הפרין כדי להשיג זרימה ורידית ברורה.מניחים את החלק האחורי על הקרח בגאזה סטרילית עד להעברת המיקרו-וסקולר. לנתח את כרית השומן מפשעתי ולהישען כרית שומן מפשעתית distally לחשוף את כלי הירך. השתמש וו כדי לבטל את הרצועה המעשרית ואת מלקחיים הידוק להחזיק את כרית השומן מפשעתית distally.לנתח את כלי הירך, להתאים אישית את ענפי מרפי, ולגבש עם קשרי ניילון כפי שהודגם. ליגת את שני כלי הדם מעל כלי האפיגסטרי באמצעות קשרי ניילון. מניחים את מלחצי הקירוב בסמיכות, מרחיבים את עדשת כלי הדם, ושוטפים עם תמיסת מלח הפרין.לעשות חתך באגף השמאלי מעל הירך וליצור כיס תת עורי עם מנהרה תת עורית לקמט מפשעה. מניחים את החלק הפרוקסימלי של הגפה החלקית ואת כרית השומן המשתנה דרך המנהרה התת עורית להעברת מיקרו וסקולריים. בצע את anastomoses ורידים ועורקים באמצעות תפרי ניילון.הסר את שני מלחצי הקירוב ובחן את revascularization של האיבר. בצע בדיקת חליבה על שני כלי הדם כדי להעריך את הפטישות של כל anastomosis. לעשות קיסך עור אורך בצד המתיי של הגפה המושתלת ולהכניס את השתל.הסר את העור העודף של השתל ולסגור את הפצע עם תפרים נפרדים תפר ריצה באמצעות תפרים 4/0 נספג. תפרו יחד את רפידות השומן המשתנה של הגפה המושתלת ואת המטופל באמצעות שני תפרים נספגים נפרדים וסגרו את הקמט המגיתי לאחר הבדיקה האחרונה של אנסטומוזיס מיקרו וסקולרי. האבולוציה של המודל ההטרוטופי האחורי הייתה במעקב עד סוף המחקר.צמיחת השיער נצפתה במהלך השבוע הראשון שלאחר הניתוח, והנסיגה עורית הופיעה לאחר שבועיים. כשל הקצאה מרוכבים וסקולריים יכול להתרחש במהלך השבוע הראשון לאחר הניתוח עקב פקקת מיקרו וסקולרית. פקקת ורידים הייתה הגורם להמתת חסד מוקדמת ב -20% מהמקרים, שכולם התרחשו לפני היום החמישי לאחר הניתוח.העור נראה כחול ונעשה כהה יותר בכל יום. השחתה עצמית היא דאגה רצינית בהשתלות שטותיות ולעתים קרובות מתרחשת בין היום השני לשבע לאחר הניתוח. אם מוגבל לפחות משליש משטח השתל ומדאיג רק את העור, ניתן לדון בתפר כירורגי באמצעות תפרים שאינם נספגים עם הווטרינר של הצוות.מניעת השחתה עצמית מסתמכת על שימוש בצווארון אלקטרוני התפור לצוואר עד היום השביעי שלאחר הניתוח וניקוי כל דם או קרום על הפצעים הכירורגיים של החיה. אוטופגיה חמורה של שכבות מרובות של השתל מובילה להמתת חסד של החיה. ציסטות עור הופיעו לאחר יום לאחר הניתוח 14, לפעמים עם מרכז נמק עורי לפני פיסטולה.חשוב לוודא כי מיקום השתל לא ימנע את בעל החיים מלהיות אמבולטורי, וכי הפדיקור אינו קינק או הדוק במהלך השתל. הצוות שלנו ביצע מחקרי שימור בגפיים שנרכשו לפני ההשתלה. ההשפעות של משכי זמן שונים של אחסון קר סטטי הוערכו, כמו גם פרוטוקולי זלוף גפיים שונים.

partial-heterotopic-hindlimb-transplantation-model-in-rats

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

כאן אנו מתארים את העכברוש orthotopic איבר האחוריות, הליך ההשתלה, אשר נראה כי תקן...

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

אנו מתארים טכניקה חדשה להשתלת לב-ריאה בטנית הטרוטופית (HAHLT) בחולדות. תצורת ההשתלה מביאה לזרימת שתל טעונה חלקית, המאפשרת הערכה תפקודית ישירה. מודל זה עשוי לשמש למחקרים חריפים או כרוניים של תפקוד ומצב חיסוני של השתל המושתל.

עכברוש Heterotopic בטן לב / השתלת ריאה בודדת בתצורה טעונה נפח

השתל המורכב של vascularized מציע יתרונות משנים חיים לנמעני ההשתלה, אך הגורמים הביולוגיים לדחיית השתל והעיקור נשארים ברורים לקוי. המודל הכירורגי מכרסם הציג כאן מציע המודל הרלוונטי קלינית של השתלת, המאפשר לחוקרים להעריך את אירועי דחייה ואסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות כדי למנוע את התרחשותן.

שונה הטרולנושא הגפיים האוסטאופהעורית מודל החולדה על השתלת ואסימטיקה מורכבת מחקר האלוגרפט

פרוטוקול זה מציג מודל חזק, לשחזור של כלי דם מרוכבים allotransplant (VCA) מכוון למחקר בו זמנית של אימונולוגיה והתאוששות תפקודית. הזמן שהושקע בטכניקה קפדנית בהשתלה אורתוטופית ירך ימין באמצע הירך האחורי עם תפורים ביד וסמיכות עצבית מניב את היכולת ללמוד התאוששות תפקודית.

לוקח את הצעד הבא: מודל השתלת גפיים אחוריות קופטציה עצבית כדי למקסם את ההתאוששות תפקודית בחולדה

אנו מתארים מודל של הטרוהנושא השתלת לב הבטן בחולדות, רומז שינויים של אסטרטגיות נוכחיות, אשר להוביל גישה כירורגית פשוטה. בנוסף, אנו מתארים מודל דחייה הרומן על-ידי הזרקה באוזן של תאים חיוניים שרירי הלב, המאפשר ניתוח נוסף השתלת אימונולוגיים בחולדות.

מודל אימונוולוגי עבור הלב הטרוולפית ושריר הלב השתלת תא בחולדות

פרוטוקול זה מתאר שיטה פשוטה ויעילה להשתלת עלוני מסתם אבי העורקים מתחת לכמוסה הכליתית כדי לאפשר מחקר של אלוראקטיביות של מסתמי הלב.

מודל פשוט להשתלת מסתם לב הטרוטופי במכרסמים

המאמר הנוכחי מתאר טכניקה שונה להשתלת לב הטרוטופית וסקולרית עם טכניקה אספטית מעודכנת, שיכוך כאבים והרדמה.

פרוטוקול השתלת לב הטרוטופי מורין מותאם לסטנדרטים עכשוויים של טכניקה אספטית, הרדמה ושיכוך כאבים

מחקר זה מדגים טכניקת השתלת לב בטן הטרוטופית הניתנת לשחזור בחולדות שמתחילים יכולים ללמוד ולבצע. בנוסף, מודל חדש של רגורגיטציה של אבי העורקים בחולדות נוצר על ידי ביצוע השתלת לב בטן הטרוטופית ופגיעה במסתם אבי העורקים של התורם באמצעות חוט מנחה לאחר הקציר.

השתלת לב בטן הטרוטופית שונה ומודל רגורגיטציה אבי העורקים החדש בחולדות

פרוטוקול השתלת כבד עזר הטרוטופי של חולדות המתואר כאן מציע כלי מחקר מעשי לחקר מנגנונים של דחיית השתלת כבד. מודל זה מסייע להקל על המכשולים הכירורגיים והלחץ של בעלי חיים של השתלת כבד אורתוטופית בחולדות.

מודל השתלת חולדה בכבד שלם עזר הטרוטופי תוך שימוש בכבד כבד למחקרי דחיית אלוגרפט

אנו מציגים מודל עכבר שניתן לשחזור של אלוטרנסלנטציה מורכבת של גפיים אחוריות לצוואר הטרוטופית. פרוטוקול סופר-מיקרוכירורגי זה, הכולל אנסטומוזות כלי דם בקוטר 0.3-0.5 מ"מ, משלב הנחיית חוטי ניילון ושרוול ורידי. הוא מספק פלטפורמה אמינה למחקרים תרגומיים על סבילות, פגיעות איסכמיה-רפווזיה, ומנגנונים אימונולוגיים באלוטרנסרפלנטציה של כלי דם מרוכב.

השתלת גפה אחורית לצוואר הטרוטופית בעכבר: מודל סופר-מיקרוכירורגי של אלוטרנספלינצ'נציה מורכבת וסקולרית

למד את מודל השתלת הינדימבה ההטרוטופית בחולדות לחקר תגובות חיסוניות ושימור רקמות. הפרוטוקול הניתוחי המפורט מסייע לאימון מנתחים ולהערכת השתלות VCA לטווח קצר.

מודל השתלת הינדימבה הטרוטופית חלקית בחולדות

גלה סרטונים נוספים