Name: ראיון: Antigen Presentation Glycolipid ידי CD1d ואת הפוטנציאל הטיפולי של הפעלת התא NKT (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-12-31T19:27:00.000+00:00
Duration: 18 min 8 s
Description: למדו על מנגנוני ההפעלה של תאי NKT על ידי אנטיגנים גליקוליפידיים דרך מולקולות CD1D. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לחקור תגובות חיסוניות בסרטן, אוטואימוניות וזיהומים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Khurana, A., Kronenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Method+for+Production+of+Recombinant+CD1d+Protein+in+Insect+Cells%5BTitle%5D)+AND+%2212%2F10%2F2007%29+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Method for Production of Recombinant CD1d Protein in Insect Cells.</a> 12/10/2007) Journal of Visualized Experiments. , Forthcoming.</li>
</ol>

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

ראיון: antigen presentation glycolipid ידי cd1d ואת הפוטנציאל הטיפולי של הפעלת התא nkt

Interview: Glycolipid Antigen Presentation by CD1d and the Therapeutic Potential of NKT cell Activation

Natural Killer T לתאים (NKT) הם הגורמים הקריטיים של התגובה החיסונית של סרטן, ויסות של המחלה autioimmune, אישור של גורמים מדבקים, לבין התפתחות הפלאק artheriosclerotic. בראיון זה, מיץ&#39; קרוננברג דן מאמצים במעבדה שלו כדי להבין את המנגנון שדרכו תאים NKT מופעלים על ידי אנטיגנים glycolipid. במרכז המחקרים הללו הוא CD1d - מולקולת אנטיגן הצגת המציג glycolipids לתאי NKT. הופעתו של CD1d tetramer טכנולוגיה, טכניקה שפותחה על ידי מעבדה קרוננברג, הוא קריטי עבור מיון וזיהוי של תת קבוצות של glycolipid-reactive תאים ספציפיים טי. מיץ&#39; מסביר כיצד אגוניסטים glycolipid משמשים כסוכני טיפולית להפעיל תאים NKT בחולי סרטן וכיצד tetramers CD1d ניתן להשתמש כדי להעריך את מצב האוכלוסייה תא NKT in vivo בעקבות טיפול אגוניסט glycolipid. מצב נוכחי של ניסויים קליניים מתמשך באמצעות אלה אגוניסטים נידונים כמו גם ניבוי של מיץ&#39; עבור אזורים בתחום האימונולוגיה כי יהיה המתעוררים חשיבות בעתיד הקרוב.

Natural Killer T לתאים (NKT) הם הגורמים הקריטיים של התגובה החיסונית של סרטן, ויסות autioimmunity, אישור של זיהום, לבין התפתחות הפלאק artheriosclerotic. בראיון זה, מיץ&#39; קרוננברג דן מאמצים במעבדה שלו כדי להבין את המנגנון שדרכו תאים NKT מופעלים על ידי אנטיגנים glycolipid.

ראיון: Antigen Presentation Glycolipid ידי CD1d ואת הפוטנציאל הטיפולי של הפעלת התא NKT

תאי Natural Killer T (NKT) הם גורמים קריטיים הקובעים את התגובה החיסונית לסרטן, את הוויסות של מחלות אוטואימוניות ואת סילוקם של גורמים זיהומיים...

שלום, שמי מיטשל קרוננברג ואני מהמכון לאלרגיה ואימונולוגיה בלה חויה (La Jolla Institute for Allergy and Immunology). אני למעשה הנשיא והמנהל המדעי, אך יש לי מעבדת מחקר פעילה מאוד, ועל זה נדבר, כמובן, היא על אחת הטכנולוגיות שברשותנו, שהן טטרמרים של CD 1D. מרבית העבודה במעבדה שלי עוסקת בתאי T מגיבים ל-CD 1D.תאים אלו הם ייחודיים מכיוון שהם מזהים גליקוליפידים ולא פפטידים. ענף נוסף במעבדה שלי עוסק בנושא שונה לחלוטין, מערכת החיסון הרירית והוויסות שלה. מולקולות CD1 הן מולקולות מציגות אנטיגן, ופירוש הדבר הוא שהן נקשרות לאנטיגנים, למקטעי חלבונים או למולקולות אחרות ומציגות אותם לזיהוי על ידי תאי T.כעת, קיימים למעשה שני סוגים שונים של מולקולות מציגות אנטיגן. ישנן מולקולות המחזיקות או מציגות פפטידים, וישנן מולקולות המחזיקות ליפידים וגליקוליפידים. ומולקולות ה-CD one מחזיקות ליפידים וגליקוליפידים.זהו תפקידם, והם מחזיקים או מציגים את הליפידים והגליקוליפידים הללו לתאי T. קיימים למעשה ארבעה סוגים שונים של מולקולות CD1: CD1A, B, C ו-D. למעשה, אנו מתמקדים ב-CD1D, ו-CD1D הוא ככל הנראה הנחקר ביותר, בין השאר בשל קיומם של מודלים בעכברים. CD1D מציג גליקוליפידים לסוג מסוים של תאי T הנקראים תאי natural killer T, תאי דם לבנים יוצאי דופן בעלי מאפיינים של התגובה החיסונית המולדת והנרכשת.הגליקוליפידים המוצגים יכול

interview-glycolipid-antigen-presentation-cd1d-therapeutic-potential

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

שיטה להכנת תאים חרקים להדביק אותם עם baculovirus לצורך הייצור של proteinand רקומביננטי mCD1d יצירת tetramers mCD1d.

שיטה לייצור של חלבון רקומביננטי mCD1d בתוך תאים חרקים.

כאן אנו מתארים שיטה להפעלה והרחבת תאי NKT אדם מאוכלוסיות תאי T בתפזורת באמצעות תאי מציגי אנטיגן מלאכותיים (aAPC). השימוש בaAPC CD1d המבוסס מספק שיטה סטנדרטית ליצירת מספר רב של תאי NKT פונקציונליים.

Antigen המלאכותי הצגת תא הפעלה (aAPC) מתווכות והרחבת תאי T קטלניים טבעיים

תת-קבוצות תאים דנדריטיות נפרדות קיימות כאוכלוסיות נדירות באיברי לימפה, ולכן הן מאתגרות לבידוד במספרים ובטוהר מספיקים לניסויים אימונולוגיים. כאן אנו מתארים שיטת יעילות גבוהה ותפוקה גבוהה לבידוד של כל תת-הקבוצות העיקריות הידועות כיום של תאים דנדריטיים של טחול עכבר.

שיטת תשואה יעילה גבוהה עבור בידוד של תת תא העכבר דנדריטים

שיטה פשוטה ואמינה מתוארת כאן כדי לנתח קבוצה של פונקציות תא NK כגון degranulation, ציטוקינים וייצור chemokine בתוך תת תא NK שונה.

Flow Cytometry מבוסס Assay עבור הניטור של פונקציות תא NK

פרוטוקול לחקר אירועים המונעים על ידי FcγRIIIa על ידי נוגדנים טיפוליים בתאי הרג טבעיים אנושיים מתואר כאן. פלטפורמת גירוי מלאכותית זו מאפשרת חקירה של פונקציות אפקט במורד הזרם כגון degranulation, ייצור chemokine / ציטוקינים, ומסלולי איתות בתיווך FcγRIIIa וחלקי Fc של נוגדנים המעורבים בכריכה.

הערכה של אירועי תאי רוצח טבעי אנושי המונעים על ידי מעורבות FcγRIIIa בנוכחות נוגדנים טיפוליים

אנו מציגים שני פרוטוקולי הכתמה שונים עבור NKG2D ליגנד (NKG2DL) זיהוי בלוקמיה מיאלואידית חריפה אנושית (AML) דגימות. הגישה הראשונה מבוססת על חלבון היתוך, המסוגל לזהות את כל הליבנדים הידועים ואולי עדיין לא ידועים, בעוד הפרוטוקול השני מסתמך על תוספת של נוגדנים מרובים נגד NKG2DL.

שתי גישות ציטומטריות זרימה של גילוי משטח ליגנד NKG2D כדי להבחין בין תאי גזע לבין תת אוכלוסין בתפזורת בלוקמיה מיאלואידית חריפה

אנו מתארים פרוטוקול מהיר וחזק להעשרת תאי T (iNKT) של הרוצח הטבעי invariant מטחול העכבר ולהרחיב אותם במבחנה למספרים מתאימים למחקרי מבחנה ומחקרי ויוו.

טיהור והתרחבות של עכבר Invariant טבעי רוצח תאי T עבור במבחנה ו in vivo מחקרים

הפרוטוקול הנוכחי מראה כיצד להבדיל בין תאי CD3−/CD45+CD56+ עם ציטוטוקסיות קלה מתאי גזע פוטנציאליים מורחבים אנושיים (hEPSCs) בתנאי תרבית תלת-ממדית ודו-ממדית. זה מאפשר אימות פנוטיפי שגרתי ללא הרס של microenvironment מורכב.

יצירת תאי הרג טבעיים מתאי גזע פוטנציאליים מורחבים אנושיים

פרוטוקול זה מתאר תכנות מחדש in vivo של תאי סרטן עכבר לתאים דמויי דנדריטי מסוג 1 בתוך מיקרו-סביבת הגידול באמצעות ביטוי מאולץ של גורמי השעתוק PU.1, IRF8 ו-BATF3.

תכנות מחדש של תאי גידול לתאים דמויי תאים דנדריטיים קונבנציונליים מסוג 1

פרוטוקול זה מספק תהליך עבודה מאוזן במבחנה למדידה עקבית של ציטוטוקסיות טבעית, מתווכת קולטני אנטיגן כימריים ותלויה בנוגדנים של תאי רוצח טבעיים אנושיים, באמצעות הדמיית תאים חיים וציטומטריית זרימה.

כימות ציטוטוקסיות של תאי NK המועצמת על ידי קולטני אנטיגן כימריים ונוגדנים טיפוליים באמצעות הדמיית תאים חיים וציטומטריית זרימה

למדו על מנגנוני ההפעלה של תאי NKT על ידי אנטיגנים גליקוליפידיים דרך מולקולות CD1D. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לחקור תגובות חיסוניות בסרטן, אוטואימוניות וזיהומים.

ראיון: Antigen Presentation Glycolipid ידי CD1d ואת הפוטנציאל הטיפולי של הפעלת התא NKT

גלה סרטונים נוספים