Name: בדיקת ספוט ריק בזמן אמת (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-10T12:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 39 s
Description: למדו את שיטת RT-VSA לניטור התנהגות השתנה בעכברים בזמן אמת באמצעות מצלמות וידאו. שיטה זו מספקת מידע טמפורלי, מרחבי ונפחי על אירועי השתנה ומאפשרת ניתוח התנהגותי בפאזות האור והחושך.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי R01DK119183 מענק NIH (ל- G.A. ו- MDC), פרס פרויקט פיילוט באמצעות P30DK079307 (ל- M.G.D.), פרס פיתוח קריירה של האגודה האמריקאית לאורולוגיה ומענק קרן וינטרס (ל- N.M.), ועל ידי ליבות הדמיית כליות של פיזיולוגיה של התא ואורגניזמים מודל של מרכז פיטסבורג לחקר הכליות (P30DK079307).

<ol><li>Dalghi, M. G., Montalbetti, N., Carattino, M. D., Apodaca, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+urothelium%3A+life+in+a+liquid+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">The urothelium: life in a liquid environment.</a> Physiological Reviews. 100 (4), 1621(2020).</li>
<li>de Groat, W. C., Griffiths, D., Yoshimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+control+of+the+lower+urinary+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Neural control of the lower urinary tract.</a> Comprehensive Physiology. 5 (1), 327(2015).</li>
<li>Dalghi, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+roles+for+PIEZO1+and+PIEZO2+in+urothelial+mechanotransduction+and+lower+urinary+tract+interoception%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Functional roles for PIEZO1 and PIEZO2 in urothelial mechanotransduction and lower urinary tract interoception.</a> JCI Insight. 6 (19), (2021).</li>
<li>Montalbetti, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+infection+with+uropathogenic+Escherichia+coli+increases+the+excitability+of+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Bladder infection with uropathogenic Escherichia coli increases the excitability of afferent neurons.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 322 (1), 1(2022).</li>
<li>Montalbetti, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+urothelial+paracellular+transport+promotes+cystitis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Increased urothelial paracellular transport promotes cystitis.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 309 (12), 1070(2015).</li>
<li>Montalbetti, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urothelial+tight+junction+barrier+dysfunction+sensitizes+bladder+afferents%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Urothelial tight junction barrier dysfunction sensitizes bladder afferents.</a> eNeuro. 4 (3), (2017).</li>
<li>Montalbetti, N., Stocker, S. D., Apodaca, G., Bastacky, S. I., Carattino, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+K%2B+promotes+irritative+voiding+symptoms+and+pain+in+the+face+of+urothelial+barrier+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Urinary K+ promotes irritative voiding symptoms and pain in the face of urothelial barrier dysfunction.</a> Scientific Reports. 9 (1), 5509(2019).</li>
<li>Kim, A. K., Hamadani, C., Zeidel, M. L., Hill, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urological+complications+of+obesity+and+diabetes+in+males+and+females+of+three+mouse+models%3A+temporal+manifestations%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Urological complications of obesity and diabetes in males and females of three mouse models: temporal manifestations.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 318 (1), 160(2020).</li>
<li>Bartolone, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micturition+defects+and+altered+bladder+function+in+the+klotho+mutant+mouse+model+of+aging%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+and+Experimental+Urology%22%5BJournal%5D)">Micturition defects and altered bladder function in the klotho mutant mouse model of aging.</a> American Journal of Clinical and Experimental Urology. 8 (3), (2020).</li>
<li>de Rijk, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging-associated+changes+in+oxidative+stress+negatively+impacts+the+urinary+bladder+urothelium%5BTitle%5D)+AND+%22International+Neurourology+Journal%22%5BJournal%5D)">Aging-associated changes in oxidative stress negatively impacts the urinary bladder urothelium.</a> International Neurourology Journal. 26 (2), 111(2022).</li>
<li>Coyne, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+%28LUTS%29+and+overactive+bladder+%28OAB%29+by+racial%2Fethnic+group+and+age%3A+results+from+OAB-POLL%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">The prevalence of lower urinary tract symptoms (LUTS) and overactive bladder (OAB) by racial/ethnic group and age: results from OAB-POLL.</a> Neurourology and Urodynamics. 32 (3), 230(2013).</li>
<li>Wittig, L., Carlson, K. V., Andrews, J. M., Crump, R. T., Baverstock, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+bladder+dysfunction%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Diabetic bladder dysfunction: a review.</a> Urology. 123, (2019).</li>
<li>Irwin, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population-based+survey+of+urinary+incontinence%2C+overactive+bladder%2C+and+other+lower+urinary+tract+symptoms+in+five+countries%3A+results+of+the+EPIC+study%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">Population-based survey of urinary incontinence, overactive bladder, and other lower urinary tract symptoms in five countries: results of the EPIC study.</a> European Urology. 50 (6), 1314(2006).</li>
<li>Bogart, L. M., Berry, S. H., Clemens, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Symptoms+of+interstitial+cystitis%2C+painful+bladder+syndrome+and+similar+diseases+in+women%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Symptoms of interstitial cystitis, painful bladder syndrome and similar diseases in women: a systematic review.</a> The Journal of Urology. 177 (2), 450(2007).</li>
<li>Foxman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+tract+infection+syndromes%3A+occurrence%2C+recurrence%2C+bacteriology%2C+risk+factors%2C+and+disease+burden%5BTitle%5D)+AND+%22Infectious+Disease+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Urinary tract infection syndromes: occurrence, recurrence, bacteriology, risk factors, and disease burden.</a> Infectious Disease Clinics of North America. 28 (1), 1(2014).</li>
<li>Fall, M., Logadottir, Y., Peeker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+cystitis+is+bladder+pain+syndrome+with+Hunner%27s+lesion%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Interstitial cystitis is bladder pain syndrome with Hunner's lesion.</a> International Journal of Urology. 21, 79(2014).</li>
<li>Birder, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+bladder%2C+cystitis+and+nerve%2Furothelial+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Autonomic+Neuroscience%3A+Basic+%26+Clinical%22%5BJournal%5D)">Urinary bladder, cystitis and nerve/urothelial interactions.</a> Autonomic Neuroscience: Basic & Clinical. 182, 89(2014).</li>
<li>Rosen, J. M., Klumpp, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+pain+from+urinary+tract+infection%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Urology.+21+Suppl%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of pain from urinary tract infection.</a> International Journal of Urology. 21 Suppl. 1, 26(2014).</li>
<li>Birder, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+control+of+the+lower+urinary+tract%3A+peripheral+and+spinal+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Neural control of the lower urinary tract: peripheral and spinal mechanisms.</a> Neurourology and Urodynamics. 29 (1), 128(2010).</li>
<li>Desjardins, C., Maruniak, J. A., Bronson, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+rank+in+house+mice%3A+differentiation+revealed+by+ultraviolet+visualization+of+urinary+marking+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Social rank in house mice: differentiation revealed by ultraviolet visualization of urinary marking patterns.</a> Science. 182 (4115), 939(1973).</li>
<li>Sugino, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voided+stain+on+paper+method+for+analysis+of+mouse+urination%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Voided stain on paper method for analysis of mouse urination.</a> Neurourology and Urodynamics. 27 (6), 548(2008).</li>
<li>Hill, W. G., Zeidel, M. L., Bjorling, D. E., Vezina, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Void+spot+assay%3A+recommendations+on+the+use+of+a+simple+micturition+assay+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Void spot assay: recommendations on the use of a simple micturition assay for mice.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 315 (5), (2018).</li>
<li>Rajandram, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intact+urothelial+barrier+function+in+a+mouse+model+of+ketamine-induced+voiding+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Intact urothelial barrier function in a mouse model of ketamine-induced voiding dysfunction.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 310 (9), (2016).</li>
<li>Ruetten, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+uropathogenic+E.+coli+UTI89+model+of+prostatic+inflammation+and+collagen+accumulation+for+use+in+studying+aberrant+collagen+production+in+the+prostate%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">A uropathogenic E. coli UTI89 model of prostatic inflammation and collagen accumulation for use in studying aberrant collagen production in the prostate.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 320 (1), 31(2021).</li>
<li>Wegner, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Void+spot+assay+procedural+optimization+and+software+for+rapid+and+objective+quantification+of+rodent+voiding+function%2C+including+overlapping+urine+spots%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Void spot assay procedural optimization and software for rapid and objective quantification of rodent voiding function, including overlapping urine spots.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 315 (4), (2018).</li>
<li>Wood, R., Eichel, L., Messing, E. M., Schwarz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+noninvasive+measurement+of+cyclophosphamide-induced+changes+in+murine+voiding+frequency+and+volume%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Automated noninvasive measurement of cyclophosphamide-induced changes in murine voiding frequency and volume.</a> The Journal of Urology. 165 (2), 653(2001).</li>
<li>Dmochowski, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+outlet+obstruction%3A+etiology+and+evaluation.+Reviews+in+Urology%5BTitle%5D)+AND+%227+%28Suppl+6%29%2C+S3%E2%80%93S13%22%5BJournal%5D)">Bladder outlet obstruction: etiology and evaluation. Reviews in Urology.</a> 7 (Suppl 6), S3–S13. , (2005).</li>
<li>Aizawa, N., Homma, Y., Igawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+high+fat+diet+feeding+for+20+weeks+on+lower+urinary+tract+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lower+Urinary+Tract+Symptoms%22%5BJournal%5D)">Influence of high fat diet feeding for 20 weeks on lower urinary tract function in mice.</a> Lower Urinary Tract Symptoms. 5 (2), 101(2013).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Void+sorcerer%3A+an+open+source%2C+open+access+framework+for+mouse+uroflowmetry%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+and+Experimental+Urology%22%5BJournal%5D)">Void sorcerer: an open source, open access framework for mouse uroflowmetry.</a> American Journal of Clinical and Experimental Urology. 7 (3), 170(2019).</li>
<li>Verstegen, A. M., Tish, M. M., Szczepanik, L. P., Zeidel, M. L., Geerling, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micturition+video+thermography+in+awake%2C+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Micturition video thermography in awake, behaving mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. 331, 108449(2020).</li>
<li>Keller, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+urination+control+by+brainstem+neurons+that+relax+the+urethral+sphincter%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Voluntary urination control by brainstem neurons that relax the urethral sphincter.</a> Nature Neuroscience. 21 (9), (2018).</li>
<li>Hou, X. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+control+circuit+for+context-dependent+micturition%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Central control circuit for context-dependent micturition.</a> Cell. 167 (1), 73(2016).</li>
<li>Negoro, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+urinary+bladder+Connexin43+and+the+circadian+clock+in+coordination+of+diurnal+micturition+rhythm%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communication%22%5BJournal%5D)">Involvement of urinary bladder Connexin43 and the circadian clock in coordination of diurnal micturition rhythm.</a> Nature Communication. 3, (2012).</li>
<li>Montalbetti, N., Carattino, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acid-sensing+ion+channels+modulate+bladder+nociception%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Acid-sensing ion channels modulate bladder nociception.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 321 (5), (2021).</li>
<li>Chen, H., Zhang, L., Hill, W. G., Yu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+the+voiding+spot+assay+in+mice%3A+a+simple+method+with+complex+environmental+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Evaluating the voiding spot assay in mice: a simple method with complex environmental interactions.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 313 (6), (2017).</li>
<li>Dalghi, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+and+distribution+of+PIEZO1+in+the+mouse+urinary+tract%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Expression and distribution of PIEZO1 in the mouse urinary tract.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 317 (2), 303(2019).</li>
<li>Birder, L., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+modelling+of+interstitial+cystitis%2Fbladder+pain+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22International+Neurourology+Journal%22%5BJournal%5D)">Animal modelling of interstitial cystitis/bladder pain syndrome.</a> International Neurourology Journal. 22, (2018).</li>
<li>Okinami, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+detrusor+gap+junction+communications+induce+storage+symptoms+in+bladder+inflammation%3A+a+mouse+cyclophosphamide-induced+model+of+cystitis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Altered detrusor gap junction communications induce storage symptoms in bladder inflammation: a mouse cyclophosphamide-induced model of cystitis.</a> PLoS One. 9 (8), (2014).</li>
<li>Tungtur, S. K., Nishimune, N., Radel, J., Nishimune, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Behavior+Tracker%3A+An+economical+method+for+tracking+behavior+in+home+cages%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Mouse Behavior Tracker: An economical method for tracking behavior in home cages.</a> Biotechniques. 63 (5), (2017).</li>
<li>Negoro, H., Kanematsu, A., Yoshimura, K., Ogawa, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronobiology+of+micturition%3A+putative+role+of+the+circadian+clock%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Chronobiology of micturition: putative role of the circadian clock.</a> The Journal of Urology. 190 (3), (2013).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

שילוב של ניטור וידאו הוא שינוי חסכוני המציג מספר יתרונות על פני VSA קלאסי. ב- VSA הקלאסי, המשמש בדרך כלל כבדיקת נקודת קצה, קשה להבחין בין נקודות ריק חופפות. זה לא עניין של מה בכך, שכן עכברים נוטים להשתין מספר פעמים באותו אזור כאשר הבדיקה ממושכת למספר שעות, בדרך כלל בפינות הכלוב שלהם. לפיכך, היתרון הראשון של RT-VSA הוא שהחוקר יכול לזהות בקלות כתמים בודדים שהופקדו באופן חלקי או מלא זה על גבי זה. זה מודגם היטב בניסוי שמוצג באיור 12. במקרה זה, הקלטת וידאו מאשרת כי העכבר בוטל שלוש פעמים באותה פינ...

אחסון השתן והמיקטוריציה מתואמים על ידי מעגל מרכזי (מערכת העצבים המרכזית) המקבל מידע על מצב מילוי שלפוחית השתן דרך עצבי האגן וההיפוקיבה. האורותל, האפיתל המרפד את דרכי השתן מאגן הכליה ועד לשופכה הפרוקסימלית, יוצר מחסום הדוק בפני תוצרי הפסולת המטבולית והפתוגנים הנמצאים בשתן. זהו מרכיב אינטגרלי של רשת חושים, אשר חשה ומתקשרת את מצב המילוי של שלפוחית השתן לרקמות הבסיסיותולעצבים 1,2. הפרעה במחסום דרכי השתן, או שינויים במסלולי המכנוטרנסדוקציה של דרכי השתן, עלולה להוביל לתפקוד לקוי של התרוקנות יחד עם תסמינים בדרכי השתן התחתונות כגון תדירות, דחיפות, נוקטוריה ובריחת שתן 3,4,5,6,7. כמו כן, הזדקנות, סוכרת, דלקות בדרכי השתן התחתונות, דלקת שלפוחית השתן אינטרסטיציאלית ותהליכי מחלה אחרים המשפיעים על שלפוחית השתן, או על המעגלים החשמליים הקשורים השולטים בתפקודה, ידועים כגורמים לתפקוד לקוי של שלפוחית השתן 8,9,10,11,12,13,14,15,16,17, 18,19. הבנה טובה יותר של התנהגות התרוקנות נורמלית וחריגה תלויה בפיתוח שיטות שיכולות להבחין באופן אמין בין דפוסי השתנה שונים.
באופן מסורתי, התנהגות ההתרוקנות מרצון של עכברים נחקרה באמצעות בדיקת נקודת הריק (VSA), שפותחה על ידי Desjardins ועמיתיו 20, ואומצה באופן נרחב בשל פשטותה, עלותה הנמוכה והגישה הלא פולשנית 8,21,22,23,24. בדיקה זו מבוצעת בדרך כלל כבדיקת נקודות קצה, שבה עכבר מבלה פרק זמן מוגדר בכלוב מרופד בנייר סינון, אשר מנותח לאחר מכן על ידי ספירת המספר והערכת גודל כתמי השתן כאשר נייר הסינון ממוקם תחת אור אולטרה סגול (UV) (כתמי השתן פלואורס בתנאים אלה)20. למרות יתרונות רבים אלה, VSA המסורתי מציג כמה מגבלות עיקריות. מכיוון שעכברים משתינים לעתים קרובות באותם אזורים, החוקרים צריכים להגביל את משך הבדיקה לפרק זמן קצר יחסית (≤4 שעות)25. אפילו כאשר ה-VSA מבוצע על פני פרקי זמן קצרים יותר, כמעט בלתי אפשרי לפתור כתמי ריק קטנים (SVS) הנופלים על כתמי ריק גדולים או, להבדיל בין SVS לבין נשיאת שתן המודבקת לזנבות או לכפות. כמו כן, קשה מאוד להבחין אם SVS הם תוצאה של אירועי התרוקנות תכופים אך אינדיבידואליים (פנוטיפ שנצפה לעתים קרובות בתגובה לדלקת שלפוחית השתן 4,26), או עקב כדרור לאחר מיקטוריציה (פנוטיפ הקשור לחסימת מוצא שלפוחית השתן 27). יתר על כן, הרצון להשלים את הבדיקה במהלך שעות העבודה, יחד עם קשיים בגישה למתקני דיור כאשר האורות כבויים, לעתים קרובות מגביל בדיקות אלה לתקופת האור של מחזור הצירקדי 24 שעות. לפיכך, אילוצי זמן אלה מונעים הערכה של התנהגות התרוקנות עכברים במהלך שלב הלילה הפעיל שלהם, ומפחיתים את היכולת לנתח גנים או טיפולים ספציפיים הנשלטים על ידי מקצבים צירקדיים.
כדי להתגבר על חלק מהמגבלות הללו, חוקרים פיתחו שיטות חלופיות להערכת התנהגות ההתרוקנות בזמן אמת 26,28,29,30,31,32. חלק מגישות אלה כוללות שימוש בציוד יקר כגון כלובים מטבוליים26,28,29, או שימוש במצלמות תרמיות30; עם זאת, גם לאלה יש מגבלות. לדוגמה, בכלובים מטבוליים, השתן נוטה להיצמד לחוטי רצפת הרשת ולקירות המשפך, ובכך להפחית את כמות השתן הנאסף ונמדד. לכן, זה יכול להיות קשה לאסוף במדויק נתונים על חללים קטנים. יתר על כן, כלובים מטבוליים אינם מספקים מידע על ההתפלגות המרחבית של אירועי ההתרוקנות (כלומר, השתנה בפינות לעומת מרכז החדר). בהתחשב בכך שקרינת אינפרא אדום באורך גל ארוך המשמשת את המצלמות התרמוגרפיות אינה חודרת למוצקים, פעילות ההתרוקנות המוערכת על ידי תרמוגרפיית וידאו חייבת להתבצע במערכת פתוחה, מה שיכול להיות מאתגר עם עכברים פעילים, מכיוון שהם יכולים לקפוץ כמה סנטימטרים באוויר. מערכת נוספת היא שיטת הכתם המבוטל האוטומטי על נייר (aVSOP) בגישה33, המורכבת מנייר סינון מגולגל המתפתל במהירות קבועה מתחת לרצפת רשת התיל של כלוב עכבר. גישה זו מונעת נזק לנייר וחפיפה של כתמי שתן המתרחשים ב- VSA הקלאסי, ויישומה מאפשר לחוקר לבצע ניסויים במשך מספר ימים. עם זאת, היא אינה מספקת לחוקר תזמון מדויק של אירועי ההתרוקנות, ואין יכולת לבחון התנהגות וכיצד היא קשורה לאיתור. כדי להשיג מידע זה, החוקרים שילבו ניטור וידאו לבדיקות ריקות, גישה המאפשרת הערכה בו זמנית של פעילות עכבר ואירועי השתנה31,32. גישה אחת כוללת הצבת דיודה פולטת אור כחול (LED) ומצלמת וידאו עם מסנן חלבון פלואורסצנטי ירוק המוצב מתחת לכלוב הניסוי כדי להמחיש את אירועי ההתרוקנות, ונורית אינפרא אדום ומצלמת וידאו מעל הכלוב כדי ללכוד את מיקום העכבר32. מערך זה שימש לניטור התנהגות התרוקנות בעת ביצוע פוטומטריית סיבים; עם זאת, הסביבה המוארת של מערכת זו דרשה מהחוקרים לטפל בעכברים שלהם עם חומר משתן כדי לעורר התרוקנות. בתכנון ניסיוני אחר, מצלמות רחבות זווית הוצבו מעל ומתחת לכלוב הניסוי כדי להמחיש פעילות מוטורית של עכבר ואירועי השתנה, בהתאמה. במקרה זה, כתמי שתן שהושקעו על נייר סינון המצפה את רצפת הכלוב נחשפו על ידי הארת נייר הסינון באורות UV שהונחו מתחת לכלוב31. מערך זה שימש בבדיקות קצרות, שנמשכו 4 דקות, במהלך שלב האור של היום כדי לחקור את נוירוני גזע המוח המעורבים בהתנהגות התרוקנות מרצון31. לא דווח על התאמת מערכת זו לשימוש בה בשלב החשוך או לפרקי זמן של >4 דקות.
במאמר זה מתוארת שיטה המשפרת את ה- VSA המסורתי בכך שהיא מאפשרת ניטור וידאו ארוך טווח של התנהגות ריקון עכבר. גישה חסכונית זו מספקת מידע זמני, מרחבי ונפחי על אירועי התרוקנות לפרקי זמן ממושכים במהלך שלבי האור והחושך של היום, יחד עם פרטים הקשורים להתנהגות עכבר 3,4,34. מידע מפורט לבניית תאי הריקות, יישום VSA בזמן אמת (RT-VSA) וניתוח הנתונים מסופק. RT-VSA הוא בעל ערך עבור חוקרים המבקשים להבין את המנגנונים הפיזיולוגיים השולטים בתפקוד מערכת השתן, לפתח גישות פרמקולוגיות לבקרת מיקטוריציה, ולהגדיר את הבסיס המולקולרי של תהליכי מחלה המשפיעים על דרכי השתן התחתונות.

<table><tbody><tr><td>1.00 אינץ' X 1.00 אינץ' פרופיל מחורץ T - ארבעה חריצי T פתוחים &ndash; &nbsp; חתוך ל-10 אינץ'</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>כמות: 20</td></tr><tr><td>1.00 אינץ' X 1.00 אינץ' פרופיל מחורץ T - ארבעה חריצי T פתוחים &ndash; &nbsp; חתוך ל-12 אינץ'</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>כמות: 6</td></tr><tr><td>1.00 אינץ' X 1.00 אינץ' פרופיל מחורץ T - ארבעה חריצי T פתוחים &ndash; &nbsp; חתוך ל-40 אינץ'</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>כמות: 4</td></tr><tr><td>1.00 אינץ' X 1.00 אינץ' פרופיל מחורץ T - ארבעה חריצי T פתוחים &ndash; חתוך ל-14.75 אינץ'</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>כמות: 12</td></tr><tr><td>1.00 אינץ' X 1.00 אינץ' פרופיל מחורץ T - ארבעה חריצי T פתוחים &ndash; חתוך ל 32 אינץ '</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>כמות: 5</td></tr><tr><td>1/4-20 אגוז T כלכלה כפול 80</td><td>/20</td><td>3280</td><td>כמות: 16</td></tr><tr><td>1/4-20 אגוז T-Economy משולש 80</td><td>/20</td><td>3287</td><td>כמות: 18</td></tr><tr><td>10 & 25 סדרה 2 חור - 18 מ"מ תושבת פינתית פנימית מחורצת עם תמיכה כפולה</td><td>80/20</td><td>14061</td><td>כמות: 6</td></tr><tr><td>10 סדרה 3 חורים - צלחת שטוחה ישרה</td><td>80/20</td><td>4118</td><td>כמות: 8</td></tr><tr><td>10 סדרה 5 חורים - צלחת שטוחה "L"</td><td>80/20</td><td>4081</td><td>כמות: 8</td></tr><tr><td>10 סדרה 5 חורים - צלחת שטוחה "T"</td><td>80/20</td><td>4080</td><td>כמות: 8</td></tr><tr><td>10 סדרה 5 חורים - צלחת שטוחה טי</td><td>80/20</td><td>4140</td><td>כמות: 2</td></tr><tr><td>ציר הרמה סטנדרטי מסדרה 10 - מכלול יד ימין</td><td>80/20</td><td>2064</td><td>כמות: 2</td></tr><tr><td>10 עד 15 סדרה 2 חורים - מעבר לייט תושבת פינתית</td><td>פנימית 80/20</td><td>4509</td><td>כמות: 6</td></tr><tr><td>נורות צינור UV באורך 24 אינץ'</td><td>ADJ Products LLC</td><td>T8-F20BLB24</td><td>כמות: 2 20W נורה&ndash; 24 אינץ' אורך גל: 365 ננומטר</td></tr><tr><td>גיליון מראה אקרילי</td><td>פלסטיק</td><td></td> מקצועי <td>כמות: 1 82.5 ס"מ x 26.5 ס"מ</td></tr><tr><td>יריעת מראה אקרילית</td><td>פלסטיק</td><td></td> מקצועי <td>כמות: 2 26.5 ס"מ x 30.5 ס"מ</td></tr><tr><td>יריעת מראה אקרילית</td><td>פלסטיק</td><td></td> מקצועי <td>כמות: 2 82.5 ס"מ x 30.5 ס"מ</td></tr><tr><td>פוליקרבונט AR (עמידות בפני UV)</td> <td>80/20</td><td>65-2641</td><td>כמות: 2 4.5 מ"מ עובי, שקוף, 38.5 ס"מ x 26.5 ס"מ</td></tr><tr><td>פוליקרבונט AR (עמידות בפני UV)</td> <td>80/20</td><td>65-2641</td><td>כמות: 4 4.5 מ"מ עובי, שקוף, 38.5 ס"מ x 21.5 ס"מ</td></tr><tr><td>פוליקרבונט AR (עמידות בפני UV)</td> <td>80/20</td><td>65-2641</td><td>כמות: 4 4.5 מ"מ עובי, שקוף, 26.5 ס"מ x 21.5 ס"מ</td></tr><tr><td>פוליקרבונט AR (עמידות בפני UV)</td> <td>80/20</td><td>65-2641</td><td>כמות: 4 4.5 מ"מ עובי, שקוף 37.5 ס"מ x 23.9 ס"מ</td></tr><tr><td>פוליקרבונט AR (עמידות בפני UV)</td> <td>80/20</td><td>65-2641</td><td>כמות: 4 4.5 מ"מ עובי, שקוף, 24.4 ס"מ x 23.9 ס"מ</td></tr><tr><td>נייר כרומטוגרפיה (נייר דק)</td><td>&nbsp; Thermo Fisher Scientific</td><td>57144</td><td></td></tr><tr><td>נייר סופג קוסמוס (נייר עבה)</td><td>Blick Art Materials</td><td>10422-1005</td><td></td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td>GraphPad תוכנה</td><td>גרסה 9.4.0</td><td>תוכנת גרפים וסטטיסטיקה</td></tr><tr><td>ImageJ FIJI</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Merck</td><td></td><td>סרט שקוף</td></tr><tr><td>Quick Time Player 10.5 תוכנה&nbsp;</td><td>נגן מולטימדיה</td> <td>של אפל</td><td></td></tr><tr><td>מרגל</td><td>אבטחה בן תוכנה</td><td></td><td>תוכנת מעקב וידאו מערכת</td></tr><tr><td>סטנדרט קצה אטב, 1/4-20</td><td>80/20</td><td>3381</td><td>כמות: 80</td></tr><tr><td>UV משדר אקריליק</td><td>Spartech</td><td>Polycast Solacryl SUVT</td><td>כמות: 2 38.5 ס"מ x 26.5 ס"מ&nbsp;</td></tr><tr><td>ג'ל מים: הידרוג'ל</td><td>ClearH2O&nbsp;</td><td>&nbsp; 70-01-5022</td><td>(https://www.clearh2o.com/product/hydrogel/)</td></tr><tr><td>מצלמת אינטרנט</td><td>Logitech</td><td>C930e</td><td>כמות: 4</td></tr></tbody></table>

בדיקת ספוט ריק בזמן אמת

Real-Time Void Spot Assay

התנהגות התרוקנות נורמלית היא תוצאה של תפקוד מתואם של שלפוחית השתן, השופכה וסוגרי השופכה תחת שליטה נכונה של מערכת העצבים. כדי לחקור התנהגות של התרוקנות מרצון במודלים של עכברים, חוקרים פיתחו את בדיקת נקודות הריק (VSA), שיטה המודדת את מספר ושטח כתמי השתן שהושקעו על נייר סינון המצפה את רצפת הכלוב של בעל חיים. למרות שמבחינה טכנית היא פשוטה וזולה, לבדיקה זו יש מגבלות כאשר משתמשים בה כבדיקת נקודת קצה, כולל חוסר רזולוציה זמנית של אירועי התרוקנות וקשיים בכימות כתמי שתן חופפים. כדי להתגבר על מגבלות אלה, פיתחנו VSA מנוטר וידאו, שאנו מכנים VSA בזמן אמת (RT-VSA), ואשר מאפשר לנו לקבוע את תדירות ההתרוקנות, להעריך את הנפח המבוטל ואת דפוסי ההתרוקנות, ולבצע מדידות על פני חלונות זמן של 6 שעות הן בשלב החשוך והן בשלב האור של היום. השיטה המתוארת בדו"ח זה יכולה להיות מיושמת במגוון רחב של מחקרים מבוססי עכברים הבוחנים את ההיבטים הפיזיולוגיים והנוירו-התנהגותיים של מיקוריטציה מרצון במצבי בריאות ומחלות.

התנהגות התרוקנות של עכברי נוקאאוט Piezo1/2 אורותל
במהלך שלב האחסון של מחזור המיקטוריציה, משערים כי האורותליום חש את המתח המופעל על ידי השתן המצטבר בשלפוחית השתן ולהמיר גירוי מכני זה לתגובות תאיות כגון שחרור ATPסרוסלי 1,3. הראינו בעבר שתעלות PIEZO1 ו-PIEZO2 המופעלות מכנית מבוטאות באורותל 3,36 של העכבר. כדי לקבוע אם תעלות PIEZO של דרכי השתן חשובות להתנהג...

מאמר זה מתאר שיטה חדשה לחקר התנהגות התרוקנות עכבר על-ידי שילוב ניטור וידאו בבדיקת נקודות הריק הקונבנציונלית. גישה זו מספקת מידע זמני, מרחבי ונפחי על אירועי ההתרוקנות ופרטים על התנהגות עכברים במהלך שלבי האור והחושך של היום.

Normal voiding behavior is the result of the coordinated function of the bladder, the urethra, and the urethral sphincters under the proper control of the ...

השיטה המתוארת בדו"ח זה יכולה לשמש להבנת היבטים פיזיולוגיים ונוירו-התנהגותיים של מיצוי מרצון במצבי בריאות ומחלות. טכניקה זו מאפשרת לנו לעקוב אחר התנהגות עוצמת הקול של העכבר בשלבים הבהירים והכהים של היום, ומספקת מידע זמני, מרחבי ונפחי על אירועי התרוקנות. כדי להכין בדיקת נקודה ריקה בזמן אמת או תא הקלטה RT-VSA, הניחו נייר סינון דק או עבה, בהתאם לשעה ביום, בתחתית כלוב ההקלטה RT-VSA.על גבי נייר הפילטר, הניחו איגלו פלסטיק לחלל שינה;צינור מיקרוצנטריפוגה סטרילי של 1.5 מ"ל למטרות העשרה;וכלי פלסטיק בגודל 60 מ"מ x 15 מ"מ המכיל שתיים או שלוש חתיכות של צ'או יבש עכבר;ו 14 עד 16 גרם מים בצורת חבילת ג'ל. ברגע שתא ההקלטה מוכן, הנח בעדינות את העכבר על נייר הסינון. ודא כי העברת העכבר מכלוב הדיור לכלוב ההקלטה מתרחשת עם מתח מינימלי.ברגע שהעכבר נמצא בתוך כלוב ההקלטה, הניחו את המכסה וכסו את החלק העליון של המכסה בפד כחול ספסל סופג כדי למזער השתקפויות אור סביבתיות ישירות על משטח מכסה הפרספקס. הפעל את האורות האולטרה סגולים בחדר התחתון. כדי להקליט וידאו RT-VSA מהמצלמות העליונות והתחתונות, השתמש בתוכנת הקלטת מעקב וידאו המוגדרת להקליט בו זמנית ממצלמות אינטרנט מרובות או ממצלמות רשת.התחל הקלטה על ידי לחיצה על Cmd R בחלון התוכנית. בצע הקלטות וידאו בפריים אחד לשנייה. מיד לאחר תחילת ההקלטות, יש לצאת מהחדר ולסגור את הדלת בעדינות.ודא שהחדר נשאר שקט במשך כל הניסוי. עצור את ההקלטות על ידי לחיצה על Cmd T.כבה את האורות האולטרה סגולים. לאחר עצירת ההקלטה, התוכנה יוצרת באופן אוטומטי קובץ סרט בפורמט m4v עבור כל מצלמה ושומרת אותו תחת שם המצלמה בתיקיית יעד שנבחרה בעבר.ודא שבתוך כל תיקייה של מצלמה הניסויים מאורגנים בתיקיות לפי תאריך. בכל תיקיית תאריך או ניסוי, ודא שיש קובץ m4v אחד ואת כל קובצי jpeg הנפרדים המתאימים לכל מסגרת סרט. צור תיקיה בשולחן העבודה עם השם והתאריך של הניסוי והעבר את קבצי m4v לתיקיה זו.העתק את תיקיית הסרט לכונן הבזק לניתוח במחשב חיצוני. פתח קובץ סרט שנאסף על-ידי המצלמה התחתונה במהלך הפאזה הבהירה או על-ידי המצלמה העליונה במהלך הפאזה החשוכה לצורך ניתוח. לאחר הערכת איכות הסרט, נתח ניסויים על ידי מעבר לחלון הזמן הנכון באמצעות הפקודה הרץ קדימה או מחוון סרגל הזמן.פעילות ההתרוקנות בשלב האור נרשמת בין השעות 11:00-17:00, ובשלב החשוך, בין חצות ל-6:00 בבוקר. הפעל את הסרט במצב הרצה קדימה על ידי לחיצה על סמל הרץ קדימה או גלול ידנית לאורך הסרט, בחיפוש אחר ראיות לכך שהעכבר מתבטל. חפשו את הופעתם הפתאומית של כתמי שתן בהירים על נייר הסינון או את השינויים ההתנהגותיים, כולל תנועה לפינות הכלוב ופרק זמן קצר של חוסר פעילות כאשר העכבר מתרוקן. רשום את הזמן שבו מתרחש כל ריק.כמוסכמה, זמן הריק נרשם בסימן הראשון שהשתן מזוהה. כדי למדוד את החלל, השתמש תחילה בפס הגלילה כדי לנוע קדימה או אחורה בזמן, וחפש את הנקודה שבה התרחשה דיפוזיה מקסימלית של נקודת השתן. השהה את הסרט בשלב זה והצב את חץ עכבר המחשב בנקודה הנמצאת בניתוח כדי לסמן את נקודת העניין בצילום המסך.תן שם לקובץ צילום המסך באמצעות מספרים מתאמים כדי להסביר את סדר ההופעה בסרט. לאחר ניתוח כל כתמי הריק, מדוד את השטח הכולל של נייר הסינון על-ידי לכידת צילום מסך וסימון הגבול של נייר הסינון. חשב את שטח האחוזים של כל אחד מכתמי השתן.המר את ערכי אזור האחוזים לנפח השתן עבור כל נקודת ריק באמצעות עקומות הכיול ופונקציית האינטרפולציה בתוכנת הגרפים. התנהגות ההתרוקנות של עכברי Piezo1, 2, נוקאאוט ובקרה תועדו בשלב החשוך והבהיר של היום. במהלך שלב האור הלא פעיל שלהם, לא נצפו הבדלים משמעותיים בפרמטרים כלשהם שנותחו עבור עכברי נוקאאוט נקבות או זכרים בהשוואה לקבוצת הביקורת.עם זאת, בשלב האפל הפעיל, עכברי נוקאאוט נקבות וזכרים הראו שינוי בפנוטיפ ההתרוקנות, המאופיין בעלייה משמעותית במספר ובנפח הכולל של כתמי ריק קטנים. לא היו הבדלים משמעותיים בכתמים ראשוניים או במספר PVS, נפח ממוצע ל-PVS או נפח PVS כולל בעכברי נוקאאוט נקבות או זכרים בהשוואה לעכברי הביקורת. התנהגות ההתרוקנות של נקבות עכברים נבדקה בתנאי בסיס ולאחר טיפול בציקלופוספמיד.בהשוואה לתנאים הבסיסיים, כמות שחרור השתן לכל חלל קטנה יותר לאחר טיפול cyclophosphamide ואת אירועי micturition הם הרבה יותר תכופים. היבט מרכזי אחד לשחזור הבדיקה הוא לתפעל את בעלי החיים בעדינות ככל האפשר ולשמור אותם תחת לחץ מינימלי במהלך כל תקופת הבדיקה. מכיוון שמדובר בבדיקה לא פולשנית, ניתן לבצע לאחר מכן פרוצדורות נוספות כולל ציטומטריה ואלקטרומיוגרפיה להערכת תפקודי סוגר שלפוחית השתן והשופכה החיצונית בהתאמה.יישום טכניקה זו יאפשר לחוקרים להגדיר את תרומתם של מסלולים ספציפיים להתנהגות מתרוקנת במצבי בריאות ומחלות.

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

זיהוי מטרות מיקרוביאלי של חסינות אדפטיבית במחלות אידיופטית ניתן להשיג על ידי שימוש assay האנזים צמוד immunospot.

Enzyme-linked Immunospot Assay (ELISPOT): כימות Th-1 תגובות חיסוניות נגד אנטיגנים נייד מיקרוביאלית

אנו מתארים את שיטת מדידה כמותית בזמן אמת, של ה-DNA glycosylase ופעילויות איי פי endonuclease ב lysates גרעיני התא. Assay מניב שיעורי פעילות תיקון דנ"א מקובל ניתוח הקינטית ניתנת להתאמה עבור כימות של פעילות ה-DNA תיקון רקמות lysates הגידול או עם חלבונים מטוהרים.

כמותי, בזמן אמת, ניתוח של פעילות כריתת מאגר תיקון lysates סלולריים ניצול הנגע ספציפיים משואות מולקולרית

סרטון זה מדגים את פעולת הנימים הרדיאלית הדיפרנציאלית של בדיקת ליגנד - טכניקה לסינון שיטתי בתפוקה גבוהה של נוקלאוטיד תוך-תאי חלבונים קושרי שליח שני. טכניקה זו מאפשרת קשירה ישירה של השליחים לחלבון המטרה בעל ביטוי יתר בליזט התא – תוך עקיפת הצורך בטיהור חלבונים.

פעולה נימית רדיאלית דיפרנציאלית של בדיקת ליגנד: טכניקה בעלת תפוקה גבוהה לזיהוי נוקלאוטיד חיידקי חלבונים תוך-תאיים קושרי שליח שני

נדגים טכנולוגיה שבב snap לביצוע כריך מרובבת cross-reactivity ללא immunoassays על ידי הצמדת פשוט שתי שקופיות. מנגנון הצמדה משמש באופן אמין מבנק ריאגנטים microarray-כדי-microarray. השבב הצמד יכול לשמש עבור כל התגובות הביוכימי הדורש colocalization של ריאגנטים שונים ללא זיהום צולב.

הצמד הצ'יפ בשביל כריך מרובבת Cross-reactivity חופשי ונטול שהמשגיח Immunoassays

שיטה שאינה שכותרתו, הלא-רדיו-איזוטרופי DNA פולימראז הגהה ואת וזמינותו תיקון של ה-DNA פותחה באמצעות ספקטרומטר מסה MALDI-TOF ברזולוציה גבוהה ואסטרטגיה סיומת נוקלאוטיד יחיד. וזמינותו הוכיחה להיות מאוד ספציפי, פשוט, מהיר וקל לבצע הגהה ותיקון טלאים קצר מ 9-נוקלאוטידים.

הגהה ואת וזמינותו תיקון ה-DNA באמצעות ניתוח ספקטרומטר מסה MALDI-TOF והסיומת נוקלאוטיד יחיד

כאן, אנו מתארים שיטה לטיהור מתויג היסטידין pyrophosphokinase אנזימים וניצול כרומטוגרפיה שכבה דקה של סובסטרטים radiolabelled ומוצרים כדי assay עבור פעילות אנזימטי בתוך חוץ גופית. וזמינותו פעילות האנזים ישימה בהרחבה על כל קינאז, נוקלאוטיד cyclase או התגובה פוספור-העברת מנגנון אשר כולל נוקלאוטיד טריפוספט הידרוליזה.

ב חוץ גופית Assay פעילות עבור ppGpp (p) המעביר מ Clostridium difficile וטיהור

כאן, אנו מייצגים פרוטוקול עבור הרדיו האוטומטי לחלוטין של [11ג] הצמד-7941 וניתוח של קינטיקה בזמן אמת של זה PET-מעקב על P-gp הבעת תאים שאינם ביטוי.

היבט טכני של סינתזה אוטומטי הערכה בזמן אמת קינטי של [11ג] הצמד-7941

אנו מציגים פרוטוקול למדידת תגובת סמים בזמן אמת בפרוסות רקמת הגידול organotypic. האסטרטגיה הניסיונית המתוארים כאן מספקת פלטפורמה לביצוע מסכי סמים בינוניים בעלי תפוקה גבוהה על פרוסות רקמה הנגזרות מגידולים קליניים או של העכבר בתנאים vivo לשעבר.

מדידת תגובת התרופה בזמן אמת בפרוסות רקמה אורגנוטימית לגידול

פרוטוקול זה מציג בדיקת רגישות אנטי-מיקרוביאלית מהירה (AST) תוך 2.5 שעות על ידי הדמיית פיזור ראמן מגורה בתא יחיד של חילוף החומרים של D2O. שיטה זו חלה על חיידקים בשתן או בסביבת דם שלמה, שהיא טרנספורמטיבית עבור AST פנוטיפי מהיר של תא יחיד במרפאה.

בדיקת רגישות אנטי-מיקרוביאלית מהירה על ידי הדמיה מגורה של פיזור ראמאן של שילוב דאוטריום בחיידק יחיד

שיטה לא מתויגת, לא רדיו-איזוטופית כדי לבדוק פעילות גליקוסילאז uracil-DNA פותחה באמצעות ספקטרומטריית מסה MALDI-TOF לניתוח מוצר ישיר apurinic / apyrimidinic המכיל אתרים. הבדיקה הוכיחה להיות די פשוט, ספציפי, מהיר, וקל לשימוש עבור מדידת גליקוזילאאז DNA.

Uracil-DNA Glycosylase בדיקה על ידי טיהור לייזר בסיוע מטריקס / יינון זמן טיסה ניתוח ספקטרומטריה מסה

אנו מתארים פלטפורמת בדיקה חיסונית שפותחה לאחרונה המבוססת על עקרונות הביולוגיה הסינתטית נטולת התאים וטכניקת כתמי הנקודות לזיהוי מותאם אישית של תגובת נוגדנים בבני אדם ובעלי חיים.

כתם נקודות נטול תאים כפלטפורמת בדיקה חיסונית מעשית וניתנת להתאמה לזיהוי תגובת נוגדנים בסרום של בני אדם ובעלי חיים

למדו את שיטת RT-VSA לניטור התנהגות השתנה בעכברים בזמן אמת באמצעות מצלמות וידאו. שיטה זו מספקת מידע טמפורלי, מרחבי ונפחי על אירועי השתנה ומאפשרת ניתוח התנהגותי בפאזות האור והחושך.

בדיקת ספוט ריק בזמן אמת

גלה סרטונים נוספים