Name: תחזוקת מעבדה של זבוב הדיפטרן התחתון Bradysia (Sciara) coprophila: אורגניזם מודל מתפתח חדש/ישן (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-19T14:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 26 s
Description: למדו פרוטוקולים לתחזוקת זבוב Bradysia coprophila במעבדה, כולל הזדווגות והאכלה של זחלים. שיטות אלו מסייעות בחקר תהליכים גנטיים וביולוגיים ייחודיים בתאים ובהתפתחות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

תודה מיוחדת לשומרי המניות הקודמים של B. coprophila (ג'ייקוב א. בליס, פאולה בונזינגה, אן ו. קרברוק, אינגריד מ. מרסר, היידי ס. סמית') ולאנשי המחקר (במיוחד רוברט ביירד, מייקל ס. פולק, דונה קובאי, ג'ון מ. אורבן, יוטאקה ימאמוטו) על כוונון עדין של פרוטוקולי הגידול. הוראות ראשוניות לטיפול ב- B. coprophila ניתנו על ידי הלן ו. קרוס, נטליה גברוסביץ'-גרסיה, רבה מ. גודמן, צ'ארלס מץ ואלן ראש. בהכרת תודה ליוקיקו ימאשיטה ואן ו. קרברוק על שלקחו על עצמם את מרכז המניות Bradysia (Sciara). הערכה רבה לאנשים הבאים על הכנת האיורים המועילה שלהם: בריאן ויגמן (איור 1), ג'ון מ. אורבן (פאנל עליון באיור 4), לורה רוס (פאנל תחתון באיור 4), יוטאקה ימאמוטו (פאנל שמאלי באיור 5), ליאו קדוטה (איור 7 ואיור 8). תודה רבה לאווה פיליס ולמעבדה הרב-תחומית של אוניברסיטת בראון על עזרתם בצילום ובצילום. תודה לרוברט ביירד על הערות על כתב היד הזה. המחקר והתחזוקה שלנו של B. coprophila נתמכים על ידי NIH ו- NSF, כולל התמיכה האחרונה של NIH GM121455 ל- S.A.G. פרטים נוספים על B. coprophila זמינים באתרי Bradysia (Sciara) Stock Center (https://sites.brown.edu/sciara/ ו-https://sciara.wi.mit.edu) הנמצאים כעת בבנייה.

Bradysia coprophila Lab Protocols and Chromosomal Research

<ol><li>Lewin, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Earth+BioGenome+project%3A+Sequencing+life+for+the+future+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Earth BioGenome project: Sequencing life for the future of life.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 115 (17), 4325-4333 (2018).</li>
<li>Wiegmann, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Episodic+radiations+in+the+fly+tree+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Episodic radiations in the fly tree of life.</a> Proc Nat Acad Sci USA. 108 (14), 5690-5695 (2011).</li>
<li>Yeates, D. K., Wiegmann, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogeny+of+Diptera%5BTitle%5D)+AND+%22Manual+of+Afrotropical+Diptera.Suricata%22%5BJournal%5D)">Phylogeny of Diptera.</a> Manual of Afrotropical Diptera.Suricata. 3, 149-161 (2017).</li>
<li>Vilkamaa, P., Burdíková, N., Ševčík, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genus+Spinopygina+gen.+nov.+%28Diptera%2C+Sciaridae%29+from+Western+North+America%3A+Preliminary+molecular+phylogeny+and+description+of+seven+new+species%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">The genus Spinopygina gen. nov. (Diptera, Sciaridae) from Western North America: Preliminary molecular phylogeny and description of seven new species.</a> Insects. 14 (2), 173(2023).</li>
<li>Metz, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromosome+behavior%2C+inheritance+and+sex+determination+in+Sciara%5BTitle%5D)+AND+%22Amer+Naturalist%22%5BJournal%5D)">Chromosome behavior, inheritance and sex determination in Sciara.</a> Amer Naturalist. 72 (743), 485-520 (1938).</li>
<li>Gerbi, S. A. Unusual chromosome movements in Sciarid flies. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGerbi%2C+SA+%22Results+and+Problems+in+Cell+Differentiation.+Vol+13+Germ+Line+-+Soma+Differentiation%22">Results and Problems in Cell Differentiation. Vol 13 Germ Line - Soma Differentiation</a>. Hennig, N. 13, Springer-Verlag. Berlin, Heidelberg. 71-104 (1986).</li>
<li>Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-random+chromosome+segregation+and+chromosome+eliminations+in+the+fly+Bradysia+%28Sciara%29%5BTitle%5D)+AND+%2234%3BNon-Mendelian+Inheritance+and+Meiotic+Drive.%26%2334%3B%2C+Chromosome+Research.%28special+issue%29%22%5BJournal%5D)">Non-random chromosome segregation and chromosome eliminations in the fly Bradysia (Sciara).</a> 34;Non-Mendelian Inheritance and Meiotic Drive.&#34;, Chromosome Research.(special issue). Larracuente, A., Hanlon, S. 30, 273-288 (2022).</li>
<li>Steffan, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+generic+revision+of+the+family+Sciaridae+%28Diptera%29+of+America+North+of+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22University+of+California+Publications+in+Entomology%22%5BJournal%5D)">A generic revision of the family Sciaridae (Diptera) of America North of Mexico.</a> University of California Publications in Entomology. 44, 1-77 (1966).</li>
<li>Shin, S., Jung, S., Menzel, F., Heller, K., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogeny+of+black+fungus+gnats+%28Diptera%3A+Sciaroidea%3A+Sciaridae%29+and+the+evolution+of+larval+habitats%5BTitle%5D)+AND+%22Molec+Phylogenetics+Evolution%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogeny of black fungus gnats (Diptera: Sciaroidea: Sciaridae) and the evolution of larval habitats.</a> Molec Phylogenetics Evolution. 66 (3), 833-846 (2013).</li>
<li>Mohrig, W., Heller, K., Hippa, H., Vilkamaa, P., Menzel, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revision+of+the+black+fungus+gnats+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+of+North+America%5BTitle%5D)+AND+%22Studia+Dipterologica%22%5BJournal%5D)">Revision of the black fungus gnats (Diptera: Sciaridae) of North America.</a> Studia Dipterologica. 19 (1-2), 141-286 (2013).</li>
<li>Ševčík, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogeny+of+the+megadiverse+insect+infraorder+Bibionomorpha+sensu+lato+%28Diptera%29%5BTitle%5D)+AND+%22PeerJ%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogeny of the megadiverse insect infraorder Bibionomorpha sensu lato (Diptera).</a> PeerJ. 4, e2563(2016).</li>
<li>Menzel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudolycoriella+hygida+%28Sauaia+and+Alves%29-An+overview+of+a+model+organism+in+genetics%2C+with+new+aspects+in+morphology+and+systematics%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Pseudolycoriella hygida (Sauaia and Alves)-An overview of a model organism in genetics, with new aspects in morphology and systematics.</a> Insects. 15 (2), 118(2024).</li>
<li>Meigen, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMeigen%2C+JW+%22Klassifikazion+und+Beschreibung+der+europ%C3%A4ischen+zweifl%C3%BCgligen+Insekten+%28Diptera+Linn%29%22">Klassifikazion und Beschreibung der europäischen zweiflügligen Insekten (Diptera Linn)</a>. 1 (1), Karl Reichard. Braunschweig. (1804).</li>
<li>Johannsen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fungus+gnats+of+North+America+part+I%5BTitle%5D)+AND+%22Maine+Agricultural+Experimental+Station+Bulletin%22%5BJournal%5D)">The fungus gnats of North America part I.</a> Maine Agricultural Experimental Station Bulletin. 172, 209-276 (1909).</li>
<li>Johannsen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycetophilidae+of+North+America%5BTitle%5D)+AND+%22Maine+Agricultural+Experimental+Station+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Mycetophilidae of North America.</a> Maine Agricultural Experimental Station Bulletin. 200, 57-146 (1912).</li>
<li>Urban, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bradysia+%28Sciara%29+coprophila+larvae+up-regulate+DNA+repair+pathways+and+down-regulate+developmental+regulators+in+response+to+ionizing+radiation%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Bradysia (Sciara) coprophila larvae up-regulate DNA repair pathways and down-regulate developmental regulators in response to ionizing radiation.</a> Genetics. (3), (2024).</li>
<li>Hodson, C. N., Jaron, K. S., Gerbi, S., Ross, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene-rich+germline-restricted+chromosomes+in+black-winged+fungus+gnats+evolved+through+hybridization%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biology%22%5BJournal%5D)">Gene-rich germline-restricted chromosomes in black-winged fungus gnats evolved through hybridization.</a> PLoS Biology. 20 (2), e3001559(2021).</li>
<li>Urban, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+contiguity+de+novo+genome+assembly+and+DNA+modification+analyses+for+the+fungus+fly%2C+Sciara+coprophila%2C+using+single-molecule+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">High contiguity de novo genome assembly and DNA modification analyses for the fungus fly, Sciara coprophila, using single-molecule sequencing.</a> BMC Genomics. 22, 643(2021).</li>
<li>Baird, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+evolution+of+a+maternally+acting+sex-determining+supergene+in+a+fly+with+single-sex+broods%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Evol%22%5BJournal%5D)">Recent evolution of a maternally acting sex-determining supergene in a fly with single-sex broods.</a> Mol Biol Evol. 40 (7), (2023).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+ends+meet%3A+targeted+integration+of+DNA+fragments+by+genome+editing%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Making ends meet: targeted integration of DNA fragments by genome editing.</a> Chromosoma. 127 (4), 405-420 (2018).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+transformation+for+genome+editing+of+an+emerging+model+organism%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Development of transformation for genome editing of an emerging model organism.</a> Genes. 13 (7), 1108-1124 (2022).</li>
<li>Metz, C. W., Smith, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+observation+on+the+nature+of+the+x-prime+%28X%27%29+chromosome+in+Sciara%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Further observation on the nature of the x-prime (X') chromosome in Sciara.</a> Proc Nat Acad Sci USA. 17 (4), 195-198 (1931).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X-ray+induced+sex-linked+recessive+lethals+and+visibles+in+Sciara+coprophila%5BTitle%5D)+AND+%22Amer+Naturalist%22%5BJournal%5D)">X-ray induced sex-linked recessive lethals and visibles in Sciara coprophila.</a> Amer Naturalist. 95 (880), 21-26 (1961).</li>
<li>Metz, C. W., Ullian, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+identification+of+the+sex+chromosomes+in+Sciara+%28Diptera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Genetic identification of the sex chromosomes in Sciara (Diptera).</a> Proc Nat Acad Sci USA. 15 (2), 82-85 (1929).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X+heterochromatin+subdivision+and+cytogenetic+analysis+in+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29.+I.+Centromere+localization%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">X heterochromatin subdivision and cytogenetic analysis in Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae). I. Centromere localization.</a> Chromosoma. 63, 39-55 (1977).</li>
<li>Crouse, H. V., Gerbi, S. A., Liang, C. M., Magnus, L., Mercer, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+ribosomal+DNA+within+the+proximal+X+heterochromatin+of+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Localization of ribosomal DNA within the proximal X heterochromatin of Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae).</a> Chromosoma. 64 (4), 305-318 (1977).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X+heterochromatin+subdivision+and+cytogenetic+analysis+in+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29.+II.+The+controlling+element%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">X heterochromatin subdivision and cytogenetic analysis in Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae). II. The controlling element.</a> Chromosoma. 74, 219-239 (1979).</li>
<li>Mok, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+the+DNA+puff+expanded+state+is+independent+of+active+replication+and+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Maintenance of the DNA puff expanded state is independent of active replication and transcription.</a> Chromosoma. 110 (3), 186-196 (2001).</li>
<li>Smith-Stocking, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+studies+on+selective+segregation+of+chromosomes+in+Sciara+coprophila+Lintner%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic studies on selective segregation of chromosomes in Sciara coprophila Lintner.</a> Genetics. 21 (4), 421-443 (1936).</li>
<li>Gabrusewycz-Garcia, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytological+and+autoradiographic+studies+in+Sciara+coprophila+salivary+gland+chromosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Cytological and autoradiographic studies in Sciara coprophila salivary gland chromosomes.</a> Chromosoma. 15, 312-344 (1964).</li>
<li>Wu, N., Liang, C., DiBartolomeis, S. M., Smith, H. S., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+progression+of+DNA+puffs+in+Sciara+coprophila%3A+amplification+and+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Developmental progression of DNA puffs in Sciara coprophila: amplification and transcription.</a> Dev Biol. 160 (1), 73-84 (1993).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gustafson, E. A., Foulk, M. S., Smith, H. S., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+and+evolution+of+a+DNA+replication+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Anatomy and evolution of a DNA replication origin.</a> Chromosoma. 130 (2-3), 199-214 (2021).</li>
<li>Misof, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenomics+resolves+the+timing+and+pattern+of+insect+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Phylogenomics resolves the timing and pattern of insect evolution.</a> Science. 346 (6210), 763-767 (2014).</li>
<li>Bertone, M. A., Courtney, G. W., Wiegmann, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenetics+and+temporal+diversification+of+the+earliest+true+flies+%28Insecta%3A+Diptera%29+based+on+multiple+nuclear+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Syst+Entomol%22%5BJournal%5D)">Phylogenetics and temporal diversification of the earliest true flies (Insecta: Diptera) based on multiple nuclear genes.</a> Syst Entomol. 33, 668-687 (2008).</li>
<li>de Saint Phalle, B., Sullivan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incomplete+sister+chromatid+separation+is+the+mechanism+of+programmed+chromosome+elimination+during+early+Sciara+coprophila+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Incomplete sister chromatid separation is the mechanism of programmed chromosome elimination during early Sciara coprophila embryogenesis.</a> Development. 122 (12), 3775-3784 (1996).</li>
<li>de Saint Phalle, B., Oldenbourg, R., Kubai, D., Salmon, E. D., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paternal+chromosome+elimination+and+X+non-disjunction+on+asymmetric+spindles+in+Sciara+male+meiosis%5BTitle%5D)+AND+%22BioRxiv%22%5BJournal%5D)">Paternal chromosome elimination and X non-disjunction on asymmetric spindles in Sciara male meiosis.</a> BioRxiv. , (2021).</li>
<li>Bath, J. D., Sponsler, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+alternative+method+for+the+culture+of+Sciara+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">An alternative method for the culture of Sciara larvae.</a> Science. 109 (2828), 255(1949).</li>
<li>Forer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crane+fly+spermatocytes+and+spermatids%3A+A+system+for+studying+cytoskeletal+components%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Crane fly spermatocytes and spermatids: A system for studying cytoskeletal components.</a> Methods Cell Biol. 25, Pt B 227-252 (1982).</li>
<li>Gillespie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+rearing+method+for+fungus+gnats+Corynoptera+sp.+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+with+notes+on+life+history%5BTitle%5D)+AND+%22J+Entomol+Soc+Br+Colum%22%5BJournal%5D)">A simple rearing method for fungus gnats Corynoptera sp. (Diptera: Sciaridae) with notes on life history.</a> J Entomol Soc Br Colum. 83, 45-48 (1986).</li>
<li>Gardiner, R. B., Jarvis, W. R., Shipp, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ingestion+of+Pythium+spp.+by+larvae+of+the+fungus+gnat+Bradysia+impatiens+%28Diptera%3A+Sciaridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Appl+Biol%22%5BJournal%5D)">Ingestion of Pythium spp. by larvae of the fungus gnat Bradysia impatiens (Diptera: Sciaridae).</a> Ann Appl Biol. 116, 205-212 (1990).</li>
<li>Hungerford, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sciara+maggots+injurious+to+potted+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Econ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Sciara maggots injurious to potted plants.</a> J Econ Entomol. 9 (6), 538-549 (1916).</li>
<li>Thomas, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+rearing+mushroom+insects+and+mites%5BTitle%5D)+AND+%22Entomol+News%22%5BJournal%5D)">A method for rearing mushroom insects and mites.</a> Entomol News. 40, 222-225 (1929).</li>
<li>Austin, M. D., Pitcher, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+laboratory+method+for+rearing+Sciara+and+phorid+flies%5BTitle%5D)+AND+%22Entomol+Mon+Mag%22%5BJournal%5D)">A laboratory method for rearing Sciara and phorid flies.</a> Entomol Mon Mag. 72, No. 860 12-15 (1936).</li>
<li>Butt, F. H. Culture of Sciara. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aButt%2C+FH+%22Culture+methods+for+invertebrate+animals%22">Culture methods for invertebrate animals</a>. Galtsoff, P. S., Lutz, F. E., Welch, P. S., Needham, J. G. , Comstock Publ. Co. Ithaca. 400-401 (1937).</li>
<li>Hudson, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+greenhouse+sciarid+fly+populations+using+Tetradonema+plicans+%28Nematoda%3A+Mermithoidea%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invert+Pathol%22%5BJournal%5D)">Regulation of greenhouse sciarid fly populations using Tetradonema plicans (Nematoda: Mermithoidea).</a> J Invert Pathol. 23 (1), 85-91 (1974).</li>
<li>Wilkinson, J. D., Daughterty, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+development+of+Bradysia+impatiens+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+under+constant+and+variable+temperatures%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Entomol+Soc+Am%22%5BJournal%5D)">Comparative development of Bradysia impatiens (Diptera: Sciaridae) under constant and variable temperatures.</a> Ann Entomol Soc Am. 63 (4), 1079-1083 (1970).</li>
</ol>

למחבר אין ניגודי עניינים להצהיר.

הפרוטוקולים המוצגים כאן לגידול של B. coprophila יהיו שימושיים עבור מדענים המעוניינים לגדל את האורגניזם הזה במעבדות שלהם לניסויים כדי להתעמק בתכונות הביולוגיות הייחודיות שלו. התיאור הראשוני של שיטת ההאכלה באמצעות אבקת שמרים ופטריות שפוזרו על בסיס אגר כדי לשמור על B. coprophila29 שימש במעבדת מץ לגידול 14 מינים שונים של זבובי Sciarid5. לאחר מכן, נצפה כי תוספת של סרפד ו / או אבקת תרד הגבירה עוד יותר את החיוניות של B. coprophila (Gabrusewycz-Garcia, תקשורת אישית). שיטות אלה נחלו הצלחה לתחזוקת מינים קרובים במשפחת Sciaridae, כולל Bradysia impatiens ו - Lycoriella ingenua הנמצאים כיום בתרבות (Robert Baird, Personal Communication).
שיטות אחרות (כגון שיטות ההזנה החלופיות המתוארות להלן) נוסו לגדל B. coprophila, אך הפרוטוקולים המתוארים כאן עברו אופטימיזציה כדי לקבל את היחס הטוב ביותר של זחלים לכל שטח פנים של אגר כדי להשיג את הבוגרים השמנים הפוריים ביותר ולמזער את צמיחת העובש. כדי להגדיל את קנה המידה, הזדווגות המונית יכולה להיעשות בבקבוקוני זכוכית כמתואר בפרוטוקול 2 לעיל. לחלופין, ניתן להניח כמה נקבות בוגרות (2-4) יחד עם פי שניים זכרים בוגרים בבקבוק כמו זה המשמש לגידול דרוזופילה (בקבוק פוליפרופילן חד פעמי 6 אונקיות = 177.4 מ"ל תחתון מרובע דרוזופילה ). בשני המקרים, על החוקר להיות בטוח לחלוטין שהבקבוק מכיל רק את כל הנקבות-המפיקה או את כל האימהות היצרניות-גבריות.
רק להאכיל את הזחלים מאז הגלמים והמבוגרים לא אוכלים. אין להאכיל את הבקבוקון אם הזחלים הפכו לגלמים (סימן לכך הוא כאשר מופיעים הזבובים הבוגרים הראשונים המוקדמים). ברגע שהמבוגרים מתקרבים, הכניסו את הבקבוקונים לאינקובטור קריר יותר (למשל, 16 מעלות צלזיוס) אם זמין, מכיוון שזה יאפשר למבוגרים לחיות זמן רב יותר. האכילו שלוש פעמים בשבוע (למשל, שני, רביעי, שישי), והגדילו את כמות המזון הניתנת לכל בקבוקון ככל שהזחלים מתבגרים. להאכיל בנדיבות, ואתה תהיה מתוגמל עם מבוגרים פוריים שמנים. עם זאת, אם אתה מאכיל יותר מדי, עובש לבן יופיע וזה סימן כדי להפחית את כמות המזון שאתה מפקיד בקבוקון. יתר על כן, אם אתה מאכיל יותר מדי, כרית עבה של מזון תתפתח על גבי האגר ותקשה על הבוגרים לצאת (אתה יכול להסיר את הפד עם מלקחיים, אבל להיזהר לא להוציא זחלים עם כרית - עדיף לא צריך לעשות את זה בכלל). בקבוקונים עם מעט זחלים (מסומנים "מעטים") זקוקים לפחות מזון. אם אתה מאכיל מעט מדי, הזחלים יטפסו על קירות הבקבוקון בחיפוש אחר מזון. זחלים שאינם ניזונים מספיק גורמים למבוגרים קטנים שהם פחות פוריים.
שיטות הזנה חלופיות מגוון שיטות נוסו להאכיל את הזחלים רק פעם אחת בשלב הזחל ולא 3 פעמים בשבוע. B. coprophila לא יגדל על מזון בסגנון Drosophila . ג'ון אורבן (תקשורת אישית) ניסה לערבב מזון B. coprophila עם אגר, אבל יותר מדי עובש גדל. הוא מצא כי הוספת שני מעכבי עובש (tegosept וחומצה פרופיונית) בשילוב ובבנפרד, תוך ניסיון מספר ריכוזים שונים, היו כולם רעילים ל-B. coprophila ברמות המעכבות עובש. האגר צריך להיות pH 6-7 (נייטרלי) כמו B. coprophila מקבל חולה ב pH חומצי (כמו עם חומצה propianic). לחלופין, כדי לייתר שלוש פעמים האכלה בשבוע, הוא ניסה להשתמש במרית או מזרק ללא מחט כדי לפזר משחת שמרים סמיכה (שמרים יבשים פעילים של הכוכב האדום מעורבבים עם מעט מים מזוקקים כדי להרטיב אותם) כבובה על גבי האגר בכל בקבוקון שבוע לאחר ההזדווגות (כלומר, בערך בזמן שהזחלים יתחילו לצאת).
שיטה נוספת להימנע מהאכלה שלוש פעמים בשבוע היא להוסיף תרבית חיה של פטריות לכל בקבוקון. Bath and Sponsler37 דיווחו כי משטח אגר משופע עם המדיום של Sabouraud צריך להיות מפוספס עם תרבית פטרייתית של הסוג Chaetoconidia (הטוב ביותר) או אחרת Baplosporangia או Xllescheria. הפטרייה גודלה מספר ימים עד שבוע לפני הופעת B. coprophila . לא היה צורך בהאכלה לאחר מכן. גרסה של שיטה זו הופעלה גם על ידי אלן רש (תקשורת אישית). בידינו, הבקבוקונים היו רטובים מדי בשיטה זו והזחלים טבעו, אך ניתן היה לנסות שוב לייעל את מספר הזחלים ביחס לבקבוקונים עם פטריות חיות.
ארתור פורר (תקשורת אישית) זכה להצלחה מסוימת בגידול B. coprophila באותו אופן כמו עגור זבובים38. בגישה זו גידלו את הגלמים על עיסת נייר לחה. לאחר מכן, הבוגרים הזדווגו והביצים הופקדו על עיסת נייר טרייה ולחה. הזחלים שנוצרו הוחזקו על עיסת נייר בצלחות פטרי והוזנו באבקת עלי סרפד פעמיים בשבוע. הגלמים הוכנסו לכלוב כדי לחזור על המחזור.
יוקיקו ימאשיטה (תקשורת אישית) ניסתה ללא הצלחה לגדל B. coprophila על הקרקע, מחקה את התנאים שבהם הם נמצאים בטבע בעציצים וחממות עם לחות גבוהה. עם זאת, עובש יכול להפוך לבעיה כאשר רמת הלחות עולה. עם זאת, אדמה לחה שימשה בהצלחה לגידול זחלי היגידה Pseudolycoriella (בעבר Bradysia) בקופסאות פלסטיק עם אדמה לחה; הם ניזונים מעלי Ilex paraguariensis מפורקים, בתוספת חיי הזחל המאוחרים עם 1.2% תמצית שמרים, 1.4% עמילן תירס, 0.8% קמח שיבולת שועל, 1.2% אגר12. באופן דומה, ניתן להחליף את האדמה הלחה בטחב כבול לח בשעועית כליה כתושה כדי לגדל זבובי Sciarid39,40.
שיטות אחרות ננקטו כדי לשמור על תרביות מעבדה של Bradysia: (i) תפוח אדמה אוטוקלאבי שאליו מוסיפים שמרים ודשן דם מיובש41; (2) זבל 42,43,44 שניתן להוסיף לו דם מיובש45; (3) מכלי פלסטיק עם רפידות כותנה ומגבות נייר לחות עם פולי סויה טחונים46.
קרדית קרדית יכולה להיות מועברת מ Drosophila כדי B. coprophila. כדי למזער זאת, עדיף לשמור את B. coprophila בחממה נפרדת או בחדר, לא קרוב למניות Drosophila . יתר על כן, בצע כל עבודת תחזוקה של B. coprophila מוקדם ביום לפני הטיפול בדרוזופילה. קרדית יכולה גם להיות מועברת ל - B. coprophila מצמחי בית, לכן אין לשמור צמחים באותו חדר כמו B. coprophila. אם קרדית פולשת לבקבוקונים, ניתן לראות אותם כאורגניזמים כדוריים לבנים קטנים הזוחלים על גופו של B. coprophila. טיפולים כימיים הפועלים להשמדת קרדית בדרוזופילה אינם יכולים לשמש עבור B. coprophila מכיוון שהכימיקלים הורגים B. coprophila (B. coprophila רגיש גם לנדפים אורגניים כגון פנול). הטיפול היחיד להיפטר ממלאי קרדית B. coprophila הוא לאסוף ידנית את העוברים על צלחת אגר, לבדוק כל אחד מהם להיעדר קרדית, ולאחר מכן להעביר אותם לבקבוקוני אגר טריים באמצעות מברשת צבע עדינה. פקקי גזה מלאים כותנה ופלוגי קצף אצטט תאית (כפי שמשמשים בקבוקוני פוליפרופילן דרוזופילה ) שניהם מסייעים למנוע את כניסתן של קרדיות לבקבוקונים.
התועלת של פרוטוקולי הגידול הפרוטוקולים המתוארים כאן יאפשרו לקהילה ההולכת וגדלה של מדענים לגדל את B. coprophila כאורגניזם מודל מתפתח חדש/ישן כדי לחקור את תכונותיו הביולוגיות הייחודיות. קבוצות מעבדה חדשות מוזמנות להצטרף לקהילה ההולכת וגדלה כדי לשמר ולחקור את המאפיינים הביולוגיים הייחודיים של Bradysia (Sciara).

<table><tbody><tr><td>אגר (בקטריולוגי)</td><td>ביולוגי אמריקאי</td><td>A0930</td><td>https://www.usbio.net; &nbsp;</td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff דוושת רגל</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-121</td><td></td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff</td><td>Blowgun Genesee Scientific</td><td>54-104</td><td></td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff UltimaterFlypad</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-172</td><td></td></tr><tr><td>https://www.geneseesci.com מכסה אדים</td><td>אתר Labconco&nbsp;</td><td>3955220</td><td>יושב על ספסל מעבדה</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>החלפת מסנן&nbsp; חתול # 6961300</td></tr><tr><td>מטבח: מבשלת בירה s אבקת שמרים</td><td>Solgar</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>השג מאמזון או מחנות טבע</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>https://www.solgar.com;</td></tr><tr><td>מזון: אבקת סרפד&nbsp; (ללא חומרי הדברה)</td><td>Starwest Botanicals</td><td>209460-51</td><td></td></tr><tr><td>מזון: פטריות שיטאקי (ללא חומרי הדברה)</td><td>Starwest Botanicals</td><td>202127-5</td><td>https://www.starwest-botanicals.com;</td></tr><tr><td>מזון: אבקת תרד (ללא חומרי הדברה)</td> <td>Starwest Botanicals</td><td>209583-5</td><td></td></tr><tr><td>מזון: קש (ללא חומרי הדברה)</td> <td>Starwest Botanicals</td><td>209465-3</td><td></td></tr><tr><td>צנצנת: זכוכית שקופה, מכסה פוליפרופילן</td><td>פישר סיינטיפיק:</td> <td>FB02911765</td><td>קוטר 73 מ"מ, 89 מ"מ HT (240 מ"ל) https://www.fishersci.com;</td></tr><tr><td>בדיקת מחט, ידית עץ</td><td>US Geo Supply Inc</td><td>מק"ט: 4190</td><td>בדיקה ארוכה 5.75 אינץ', מחט נירוסטה https://usgeosupply.com; (970)-434-3708</td></tr><tr><td>בקבוקונים: זכוכית, מועדף:</td> <td>Wilmad LabGlass</td><td></td><td></td></tr><tr><td>בקבוקונים מותאמים</td><td></td><td></td> אישית מזכוכית <td>וילמד 28-33 מ"מ קוטר פנימי, קוטר חיצוני 33 מ"מ, 9.5 ס"מ ht וילמד: בקבוקוני</td></tr><tr><td>https://www.SP-WilmadLabglass.com: זכוכית (זול יותר ובסדר)&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>03-339-26H</td><td>קוטר חיצוני 29 מ"מ, קוטר חיצוני 9.5 ס"מ &nbsp; https://www.fishersci.com; &nbsp;</td></tr><tr><td>בקבוקונים: זכוכית (מעט צרה)&nbsp;</td><td>ג'נסי סיינטיפיק&nbsp;</td><td>32-201</td><td>קוטר חיצוני 24.5 מ"מ, 9.5 ס"מ h thttps://www.geneseesci.com</td></tr><tr><td>בקבוקונים: פוליפרופילן&nbsp;</td><td>Genesee Scientific</td><td>32-114</td><td>קוטר חיצוני 28.5 מ"מ, 9.5 ס"מ ht</td></tr><tr><td>בקבוקון פקקים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>גליל כותנה לא סופגת</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-456881</td><td></td></tr><tr><td>בד גבינה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-055053</td><td>https://www.fishersci.com;</td></tr></tbody></table>

תחזוקת מעבדה של זבוב הדיפטרן התחתון bradysia (sciara) coprophila: אורגניזם מודל מתפתח חדש/ישן

Laboratory Maintenance of the Lower Dipteran Fly Bradysia (Sciara) coprophila: A New/Old Emerging Model Organism

מלאי מעבדה של זבוב הדיפטרן התחתון, Bradysia (Sciara) coprophila, נשמר במשך יותר ממאה שנה. פרוטוקולים לתחזוקת מעבדה של B. coprophila מוצגים כאן. פרוטוקולים אלה יהיו שימושיים עבור המספר הגדל במהירות של מעבדות החוקרות B. coprophila לנצל את התכונות הביולוגיות הייחודיות שלו, הכוללות (1) ציר מונופולרי במיוזה הגברית I; (2) אי-ניתוק של הדיאדה X במיוזה הגברית II; (3) הטבעה כרומוזומלית כדי להבדיל בין הומולוגים אימהיים לאבהיים; (4) כרומוזומים מוגבלי קו נבט (L); (5) חיסול כרומוזומים (כרומוזומים אבהיים במיוזה הגברית I; כרומוזומי X אחד או שניים בעוברים מוקדמים; כרומוזומי L מהסומה בעוברים מוקדמים); (6) קביעת מין על ידי האם (אין כרומוזום Y); ו-(7) הגברת DNA מווסתת התפתחותית במוקדי נשיפה של DNA בכרומוזומי פוליטן של בלוטת הרוק הזחלית. 
כיום ניתן לחקור תכונות ייחודיות רבות אלה של מכניקת הכרומוזומים באמצעות ההתקדמות האחרונה בריצוף והרכבה של גנום B. coprophila ופיתוח מתודולוגיית טרנספורמציה להנדסה גנומית. הקהילה המדעית ההולכת וגדלה המשתמשת ב-B. coprophila למחקר תפיק תועלת מהפרוטוקולים המתוארים כאן להזדווגות הזבובים (סמנים פנוטיפיים לאימהות שיהיו להן רק בנים או רק בנות; פרטים על הזדווגות המונית לניסויים ביוכימיים), בדיקת בקיעת עוברים, האכלת זחלים והערות אחרות על גידולו.

הפרוטוקולים המתוארים כאן הובילו להצלחה מוכחת בגידול B. coprophila. כאשר בוגרים שמנים שנסגרו לאחרונה נבחרים להזדווגות (איור 4), יותר מ-90% מהצלבים יכולים להיות פוריים ולהניב צאצאים. הצלחת הפוריות משתנה בין מניות שונות (טבלה 2). סטוק 7298 (כרומוזום X עם סמן גלי) היה הבריא ביותר מבין המניות אך עבר תקופה של ירידה, ככל הנראה בשל הפעלת אלמנטים ניידים של DNA שיצרו סידור מחדש של הגנום32. מניית HoLo2 מייצגת זן בריא שמקורו ב-7298, שם ככל הנראה התייצבו סידורי הגנום, והוא החליף את מלאי האב 7298 במרכז המניות. מלאי HoLo2 הוא זה ששימש לריצוף הגנום של B. coprophila והוא זה שנמצא בשימוש הנרחב ביותר על ידי קבוצות מעבדה שונות. לאחרונה, מוטגנזה CRISPR של זבובי HoLo2 שימשה ליצירת מלאי W14 עם פנוטיפ עין לבנה שישמש לשינוי עם סמני עיניים פלואורסצנטיים (ימאמוטו וג'רבי, הנתונים לא מוצגים). זן W14 חזק במיוחד. מניית ה-6980 (כנף גלית וסמני ורידים נפוחים) מעט פחות חזקה ומניית ה-91S (סמן כנף קטנה) חזקה עוד פחות.
הצלבות מוצלחות יוצרות עוברים (איור 5). עוברים עוברים חיסול של כרומוזומי X האבהיים המוטבעים בחלוקתהמחשוף 7 עד 9. בנוסף, כרומוזומי L מוגבלים בקו הנבט מסולקים מהשושלת הסומטית בעוברים בחלוקת המחשוף ה-5 עד ה-6. העוברים מופיעים כזחלים, שאין לבלבל אותם עם עובש שגם הוא עשוי להיות נוכח (איור 6). כתמי עיניים (אנלאז' לעיניים הבוגרות) מופיעים במחצית השנייה של כוכב הזחלהרביעי (איור 7). גודל כתמי העיניים מספק סמן פנוטיפי נוח להתחלה ולהתקדמות של הגברת נשיפה של DNA, שהיא אחת משתי דוגמאות ידועות בלבד להגברה טבעית של DNA תוך-כרומוזומלי ספציפי לאתר (גן) מווסת התפתחותית. לאחר מכן, הגלמים מתפתחים, וכמות הפיגמנט הממלאת את עיניהם יכולה לשמש סמן התפתחותי למיוזה I ו-II בזרע (איור 8) עם התנהגויות הכרומוזומים הייחודיות שלו בחטיבות אלה.
<img alt="השוואת קביעת מין חרקים; XwX נקבה, XX נקבה, XO זכר; תרשים מחקר גנטי." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig04.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> איור 4: הזדווגות של זבובי B. coprophila בוגרים. הפאנל העליון מציג את שלושת סוגי הזבובים הבוגרים במלאי HoLo2: אמהות מייצרות נקבות עם כנפיים גליות (X'WX נקבות בוגרות), אמהות מייצרות זכרים עם כנפיים ישרות (XX נקבות בוגרות), וזכרים עם כנפיים ישרות (X0 זכרים בוגרים). שימו לב לאוביפוזיטור המחודד בקצה האחורי של נקבת הזבובים ולקלספר בצורת קרס בקצה האחורי של הזבובים הזכרים. הפאנל התחתון מראה הזדווגות של זכר ונקבה, כאשר הקלספר הזכר תפס את האוביפוזיטור של הנקבה. הזרע יישמר בזרע של הנקבה ויפרה את הביציות עם שחרורן החוצה. אורך הבוגרים הוא 2.0 מ"מ (זכרים), 2.5 מ"מ (נקבות). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="אמבריוגנזה של דרוזופילה, מיקרוסקופיה פלואורסצנטית, מחזורים עובריים, תרשים תזמון חלוקת תאים." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig05v2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 5"> איור 5: עוברי B. coprophila . הפאנל השמאלי העליון הוא מבט על עוברים באמצעות אור סטנדרטי במיקרוסקופ מנתח; הגרעינים בציטופלסמה הסינסיטיאלית מופיעים כנקודות שחורות. הפאנל מימין משתמש במיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי להמחיש את גרעיני הפרופידיום המוכתמים ביודיד של עוברים. אורכם הממוצע של העוברים הוא 200 מיקרון ורוחבם הממוצע 150 מיקרון. גרעיני תאי הנבט מתקבצים בקוטב האחורי של העובר כפי שנראה במחזורים 6 (עובר מוטה קדימה), ו-7-9, שלאחריהם הם משולבים בגרעינים סומטיים. חיסול כרומוזום L בשושלת הסומטית מתרחש בחלוקת מחשוף 5 או 6; חיסול כרומוזום X בשושלת הסומטית מתרחש בחלוקת המחשוףה-7,ה-8 אוה-9 . צלולריזציה מתרחשת במהלך שלב הביניים של מחזור 11. הטבלה משמאל מציגה את משך הזמן הממוצע עבור כל מחזור חלוקה ב- 22 °C (75 °F). השולחן משמאל והפאנל מימין מותאמים באישור דה סנט פאל וסאליבן35. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="אינטראקציה בין חרקים לפטריות; תמונת מיקרוסקופיה; גידול תפטיר; מחקר מזיקים; פטריות אנטומופתוגניות." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig06.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 6"> איור 6: עוברי B. coprophila מופיעים כזחלים. מקבץ עוברים (חץ כחול עבה) נראה ליד האוביפוזיטור של הנקבה הבוגרת שמתה לאחר הטלת ביצים. שבוע לאחר הטלת הביצים, העוברים הופכים לזחלים צעירים, שחלקם מסומנים על ידי החיצים השחורים. לזחלים החדשים יש לסת שחורה בקצה הקדמי וגוף שקוף. הם נעים על גבי משטח האגר ואין לבלבל אותם עם עובש שאינו זז. השיבוץ מראה מעט עובש, עם חוט להט לבן (חץ אדום) ונבג שחור בקצהו (חץ ירוק), והוא קטן מעט מאוד מהזחלים שזה עתה הופיעו. סרגל קנה מידה = 1 מ"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig06large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="שלבי התפתחות הזחלים, היווצרות כתמי עין מוקדמים, תמונות מיקרוסקופיה, ניתוח גידול ביולוגי." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig07.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 7"> איור 7: שלבי כתמי עיניים של זחלי B. coprophila . כתמי עיניים נוצרים בחלק הקדמי של הזחל, ממש מאחורי הלסת, והם מורכבים מגרגירי פיגמנט שמספרם גדל. כתמי העיניים הם האנלאז' לעין הבוגרת. הפאנל העליון מראה זחלים שהודמיינו במיקרוסקופ מנתח; הלוח התחתון הוא תצוגה מוגדלת של כתמי העיניים באמצעות מיקרוסקופ ניגודיות פאזה כדי לדמיין זחל על מגלשת מיקרוסקופ עם טיפת מים מזוקקים וכיסוי צף קלות על גבי. המינוח של שלבי כתמי העין הוא על פי Gabrusewycz-Garcia30 שבו מספר הגרגירים נספר בשורה הארוכה ביותר (למשל, 12) ומספר השורות הנוספות למעט השורה הארוכה ביותר מצוין (למשל, 6 עבור שלב כתמי העין 12x6). התחלת הגברה של DNA ספציפי לאתר בכרומוזומי הפוליטן של בלוטת הרוק מתחילה בשלב 10x5 ומסתיימת בשעה 14x7 כאשר יש פרץ של שעתוק במיקום והתפשטות של נשיפות ה- DNA31. בשלב הבא של עין הקצה / לסת שנפלה, גרגרי כתמי העין מתחילים להתמזג, והם נעים לרוחב מקו האמצע; אורך גוף הזחל מתקצר. יתר על כן, נשיפות הדנ"א מתעבות בשלב זה. זה לוקח בערך יום אחד ב 21 ° C כדי לחצות כל שלב כתמי העין. סרגל קנה מידה = 1 מ"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig07large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="שלבי מטמורפוזה של חרקים; התפתחות גולם; סדרת תמונות; טרנספורמציה של זחלים למבוגרים." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig08.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 8"> איור 8: התפתחות גלמי B. coprophila . במהלך הגור, כל רקמות הזחל עוברות היסטוליזה למעט מערכת העצבים ומוחלפות ברקמות בוגרות הנובעות מחטיבות תאים של הדיסקים הדמיוניים. צבע הגוף משתנה מלבן לשזוף לחום לשחור. פיגמנט בהדרגה ממלא את עין הגולם; מיוזה I ו- II מופיעות בגלמים זכרים עם עיניים בגודל 1/4 עד 1/2 מלאות בפיגמנט36. סרגל קנה מידה = 1 מ"מ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig08large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>שם המניה</td>
			<td>סמנים</td>
			<td>שיעור הפריון</td>
			<td>הערות</td>
		</tr><tr><td>7298</td>
			<td>כנף גלית (W)</td>
			<td>~75%</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>HoLo2</td>
			<td>כנף גלית (W)</td>
			<td>~90%</td>
			<td>נגזר מ-7298</td>
		</tr><tr><td>W14</td>
			<td>כנף גלית (W); עיניים לבנות</td>
			<td>~95%</td>
			<td>נגזר מ- HoLo2</td>
		</tr><tr><td>6980</td>
			<td>כנף גלית (W); ורידים נפוחים (SW)</td>
			<td>~65%</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>91 שניות</td>
			<td>כנף גלית חלשה (W); כנפיים קטנות (P)</td>
			<td>~50%</td>
			<td>הסמן הגלי הוצג בצלב כדי להציל 91S</td>
		</tr></tbody></table>טבלה 2: מניות של Bradysia (Sciara) coprophila. טבלה 1 של ג'רבי6 מפרטת סמנים אלה ואחרים שאינם קיימים עוד. חמש טרנסלוקציות (T1, T23, T29, T32, T70) בקצה הצנטרומר של X27 מסוכמות באיור 8 של ג'רבי6 , אך אינן קיימות עוד.
קובץ משלים 1: הצלבות HoLo2 (ו-7298 ו-W14), צלב והצלה 91S, צלב 6980, צלבי טרנסלוקציה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/Supplemental%20Materials.zip" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.</a>

מאמר זה מתאר את תחזוקת המעבדה (כולל הזדווגות והאכלה) של זבוב הדיפטרן התחתון Bradysia (Sciara) coprophila.

תחזוקת מעבדה של זבוב הדיפטרן התחתון Bradysia (Sciara) coprophila: אורגניזם מודל מתפתח חדש/ישן

Laboratory stocks of the lower dipteran fly, Bradysia (Sciara) coprophila, have been maintained for over a century. Protocols for laboratory upkeep of B. ...

אנו מתחזקים את זבוב הדיפטרן התחתון, Bradysia, הידוע גם בשם Sciara coprophila כדי לחקור כמה מתכונותיו הביולוגיות הייחודיות הכוללות ציר מונופולרי ואי ניתוק x-dyad במיוזה, הטבעה כרומוזומים, כרומוזומים ספציפיים לתאי נבט, חיסול כרומוזומים, קביעת מין האם והגברת DNA בנשיפות DNA מזהמות של כרומוזומים. במעבדה שלנו, יוטאקה ימאמוטו פיתח מתודולוגיה לשינוי גנומי של Bradysia coprophila. יתר על כן, התעתיק של אורגניזם זה נעשה זמין, והגנום שלו רוצף והורכב על ידי ג'ון אורבן.פריצות דרך אלה מאפשרות לחקור את הביולוגיה הייחודית של Bradysia coprophila. אנו מעודדים אותך להצטרף לקהילה ההולכת וגדלה של מדענים כדי לטפל בתכונות הייחודיות של Bradysia coprophila. התוצאות שלך יבהירו מנגנונים מולקולריים בעלי חשיבות בסיסית לביולוגיה התאית וההתפתחותית.פרוטוקולי הגידול המוצגים כאן ישמשו כהדרכה לשמירה על קופרופילה Bradysia במעבדה שלך.

laboratory-maintenance-lower-dipteran-fly-bradysia-sciara-coprophila

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

הצענו מערכת שמשתמשת בחיישנים זולים, לא פולשנית פסאודו אקוסטי אופטיים באופן אוטומטי ומדויק לאתר, לספור, ולסווג את חרקים מעופפים המבוססים על קול הטיסה שלהם.

טיסה חרקים באיתור ובסיווג עם חיישנים זולים

הליך לגידול יציב זבובים (Stomoxys calcitrans) מוצג. ההליך משתמשת בחומרים זמינים באופן מקומי עבור רכיבי תזונה, ציוד ואספקה.

מעבדה לגידול של אחרים Muscoid Diptera והזבובים יציב

מאמר זה מתאר שיטות בסיסיות לתקנון גורמים חשובים כגון צפיפות, זמינות הזנה, מקור הידרציה ובקרות סביבתיות לגידול ארוך טווח של תרביות מעבדה של הקריקט האכיל, Gryllus bimaculatus.

שמירה על תרביות מעבדה של Gryllus bimaculatus, מודל אורתופטרני רב-תכליתי לחקלאות חרקים ופיזיולוגיה של חסרי חוליות

Vibrio cholerae: אורגניזם מודל לחקר פתוגנזה חיידקית - ראיון

Medaka ו דג הזברה משלימות לניתוח גנטי של פונקציות הגנום החולייתנים. פרוטוקול זה מדגיש את נקודות המפתח עבור microinjection מוצלח לעוברי medaka, טכניקה חשובה לניתוח העוברית ואת גנטי באמצעות medaka ו דג הזברה במעבדה.

Microinjection עוברים Medaka לשימוש כמודל אורגניזם גנטי

פרוטוקול זה מתאר תחזוקה וטיפול קבוע כדי לשמור על תנאים אופטימליים לגידול בעלי דג זברה. הסרטון מדגים את הפרוטוקול לתחזוקת מערכת, דיור רגיל, הזנה, רבייה, וגידול של זחלי דג זברה.

טיפול קבוע ותחזוקה של דג זברה (<em&gt; Danio rerio</em&gt;) מעבדה: מבוא

אנחנו מדגימים את שיטה לאיסוף חיידקי magnetotactic (MTB) שניתן להחיל על מים הטבעיים. MTB יכול להיות מבודד ומועשר מדגימות משקעות באמצעות התקנה פשוטה יחסית שמנצלת את המגנטיות הטבעית של החיידקים. המבודד MTB אז ניתן לבחון בפירוט שימוש באור ומיקרוסקופ אלקטרונים.

אוסף, בידוד והעשרה של חיידקים המתרחשים באופן טבעי מMagnetotactic הסביבה

כדי לחקור את הקשר בין הומאוסטזיס חלבון, מתח והזדקנות, עקבנו אחר שינויים בקיפול החלבון על ידי מעקב אחר תפקוד לקוי של חלבון, לוקליזציה של חלבון בתא ויציבות החלבון ברמת האורגניזם, התא והחלבון, תוך שימוש במטזואן Caenorhabditis elegans הניתן לטיפול גנטי כמערכת מודל.

שימוש ב-Caenorhabditis elegans כמערכת מודל לחקר הומאוסטזיס חלבון באורגניזם רב-תאי

התפשטות דמוית פריון של אגרגטים חלבוניים התגלתה לאחרונה כמעורבת במחלות ניווניות רבות. מטרת פרוטוקול זה היא לתאר כיצד להשתמש בנמטודה C. elegans כמערכת מודל לניטור התפשטות חלבון ולחקירת תופעות דמויות פריון.

חוקר את החלבונים כמו פריון-הפצת ורעילות של שימוש במטזואניים דגם אורגניזם<em&gt; C. elegans</em

כתב יד זה מדווח על פרוטוקול מפורט לתרבית, על בסיס קבוע, אוכלוסייה של דרוזופילה מלנוגסטר באמצעות כלוב אוכלוסיית זבובים.

תחזוקה של<em&gt; תסיסנית</em&gt; אוכלוסיית קייג

למדו פרוטוקולים לתחזוקת זבוב Bradysia coprophila במעבדה, כולל הזדווגות והאכלה של זחלים. שיטות אלו מסייעות בחקר תהליכים גנטיים וביולוגיים ייחודיים בתאים ובהתפתחות.

תחזוקת מעבדה של זבוב הדיפטרן התחתון Bradysia (Sciara) coprophila: אורגניזם מודל מתפתח חדש/ישן

גלה סרטונים נוספים