7 בפברואר 2025
מודל הפגיעה במח העצם של העכברים הוא כלי שימושי לחקר אוסטאוגנזה לאחר לידה באמצעות התעצמות פנימית. פרוטוקול כירורגי פשוט זה מתאר את הליך אבלציה של מח העצם להערכה במורד הזרם של היווצרות עצם חדשה ותגובות תאיות לאחר פציעה.
המחקר שלנו מתמקד בהבנת מנגנוני תיקון עצם באמצעות מודל הפגיעה במח העצם. אנו שואפים לחשוף כיצד מווסתת התעצמות פנימית במהלך הריפוי, ולחקור גישות טיפוליות שניתן לרתום לשיפור התחדשות העצם. מחקרים אחרונים בתחום קבעו סמני פני שטח המגדירים תאי גזע ואב שלד החושפים את תפקידיהם הקריטיים בהתפתחות ותיקון העצם.
הפרוטוקול שלנו מאפשר לחקור את תרומתם של תאים אלה במהלך התעצמות פנימית, מה שמאפשר לנו לחקור את הוויסות שלהם ואת הפוטנציאל שלהם למיקוד טיפולי במהלך תיקון העצם. הפרוטוקול שלנו מטפל בפער בהבנת תיקון העצם אך ורק באמצעות התעצמות פנימית בהקשר שלאחר הלידה, תוך שימוש במודל רלוונטי מבחינה קלינית. בניגוד למודלים אחרים של פציעות המשמשים לחקר התעצמות פנימית, הפרוטוקול שלנו מספק סביבה מבוקרת יותר ותגובות פציעה הניתנות לשחזור, במיוחד בעצמות הארוכות.
בעתיד, המעבדה שלנו תשתמש במודל הפגיעה במח העצם לצד גישות פרמקולוגיות מקומיות כדי לווסת באופן זמני מווסתים אפיגנטיים של אוסטאוגנזה. מטרתנו היא לשפר את התחדשות העצם וריפוי העצמות באמצעות גישות טיפוליות חדשות. כדי להתחיל, הכינו וחטאו את כל משטחי העבודה בעזרת חומר ניקוי חיטוי ברמה קלינית.
מכסים את פלטפורמת החימום בכרית כירורגית סטרילית. אסוף וסדר את כל המכשירים הסטריליים כמו גם ריאגנטים. כעת, שקלו את העכבר באמצעות איזון מדויק.
בהתבסס על הנוסחה הזמינה של בופרנורפין, חשב את הנפח הנדרש למתן משכך כאבים. לאחר הרדמת העכבר, הסר אותו בזהירות מתא האינדוקציה. הנח את החיה על כרית הניתוח הסטרילית במצב שכיבה והתקן את חרוט האף מעל ראשו של העכבר.
הסר לזמן קצר את העכבר מחרוט האף והזריק את המינון המחושב של משכך כאבים בופרנורפין בשחרור מושהה דרך המסלול התת עורי. לאחר מכן הנח בזהירות את העכבר בחזרה ליחידת ההרדמה של חרוט האף. מלאו מזרק של שלושה מיליליטר המצויד במחט בגודל 26 במי מלח סטריליים, והניחו אותו בצד.
הסר את הפרווה מהגפה האחורית שבה יבוצע ההליך באמצעות קוצץ חשמלי או המופעל על ידי סוללה. בעזרת אפליקטורים סטריליים עם קצה כותנה, מרחו קרצוף 10% פובידון-יוד על מקום הניתוח, ולאחר מכן מרחו פילינג אלכוהול איזופרופיל 70% ותנו לאזור להתייבש לחלוטין. כעת הניחו את העכבר על גבו וכופפו את ברך הרגל הניתוחית.
החזק את הרגל ביד הלא דומיננטית כך שהברך כפופה מעל האצבע האמצעית. האצבע השנייה מונחת על עצם הירך והאגודל מונח על השוקה. בעזרת אזמל, בצע חתך אופקי קטן ורדוד ממש מתחת לפיקה.
אתר את חלל המפרק כשהמחט מונחת אופקית על פני הברך הכפופה ומרגיש את הרווח בין עצם הירך לשוקה. השתמש במדריך אנטומי זה כדי לקדוח ידנית לתוך עצם הירך הדיסטלית מהברך לכיוון הצד הפרוקסימלי בעזרת מחט בגודל 25. הכנס את המחט דרך הפיקה או סביבה.
אשר את המיקום הנכון של המחט בחלל המדולרי באמצעות צילום רנטגן, וודא שהיא קרובה ככל האפשר למרכז. לאחר הסרת המחט בגודל 25, הכנס מיד מחט בגודל 26 לאותו חור בתוך חלל המח. דחפו את דפנות החלל המדולרי בתנועה סיבובית לפחות חמש פעמים עד שהוא מרגיש חלק.
לאחר מכן הסר את המחט בגודל 26, ושטוף את החלל עם 1.5 עד 2 מיליליטר מלח עד שהזרימה החוזרת תתבהר. השלך בבטחה את המזרק והמחט למיכל ייעודי. לאחר מכן, סגור את פצע העור באמצעות תפר דבק מקומי.
מיד לאחר הניתוח, יש לתת את המינון הנותר של בופרנורפין בשחרור מושהה כפי שחושב קודם לכן. עקוב אחר החיה על כרית החימום לאיתור סימנים לנשימה רגילה וללא הפרעה.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מחקר זה מתמקד במודל של פגיעה במח העצם העכברי כדי לחקור אוסטאוגנזה לאחר הלידה באמצעות עצמות עצמות תוך-קרומית. הפרוטוקול המתואר מספק סביבה מבוקרת להערכת תגובות תאיות ויצירת עצמות חדשות הנובעות מההליך.
Reliable modeling of postnatal intramembranous ossification is critical for de-risking early bone repair targets and understanding skeletal stem and progenitor cell (SSPC) contributions. This improved murine bone marrow injury model enables reproducible, quantitative assessment of new bone formation, supporting predictive confidence in target validation and translational research. The approach addresses a key inflection point for portfolio decisions in bone regeneration and repair programs.
This model integrates into the discovery-to-preclinical continuum for bone repair, enabling early target validation, quantitative screening, and translational assessment of regenerative interventions.