22 במאי 2026
מוצג פרוטוקול להערכת תפקוד דיאסטולי באמצעות אולטרסונוגרפיית דופלר במודל פרה-קליני של יתר לחץ דם ריאתי עקב מחלת לב שמאל.
המחקר שלנו מתמקד באי ספיקת לב עם שבר פליטה נשמר ובהבדלים המגדיים המשמעותיים שהמחלה מתבטאת. דיספונקציה דיאסטולית היא סימן ההיכר של HFpEF עם אינדקסים שניתן להעריך באמצעות סונוגרפיה דופלרית ללא אקו לב דו-ממדי, שהיא יקרה ודורשת ציוד מתקדם. כדי להתחיל, הפעל את הטאבלט שמחובר למשטח המעקב של ה-ECG.
בחר RS Monitor מתוך היישומים הזמינים. לאחר מכן הפעל את משטח הא.ק.ג על ידי לחיצה על כפתור העגול שמקדימה. הקש על ההגדרות בפינה הימנית התחתונה של ממשק המשתמש.
בחר פריסטים מתפריט ההגדרות הניסיוניות. הקש על תפריט הנפתח תחת הגדרות שמורות, ואז בחר Rat CV ולחץ על אישור בפינה הימנית התחתונה. לאחר מכן, נקה את כרית ה-ECG עם אלכוהול אתילי של 70% כדי להסיר שאריות ג'ל ECG.
להשיג ג'ל אלקטרודות מוליך מאוד לאלקטרוקרדיוגרם וג'ל אולטרסאונד היפואלרגני מסיס במים לדופלר. מניחים את החיה המורדמת על הרפוד על כרית ה-ECG הלא פולשנית, כאשר האף ממוקם בקונוס האף בגודל המתאים עם פלט מאייד מוגדר ל-1.5 עד 2%. באמצעות אפליקטור עם קצה כותנה, יש למרוח כמות קטנה של ג'ל אלקטרוד על פני השטח הגביים של ארבע הכפות ולצד הכף הרגל האחורית. אבטח את הכפות עם סרט על משטח מגע האלקטרודה של משטח הא.ק.ג, כדי להבטיח מגע מספק בין הג'ל לפד.
לאחר מכן השתמשו בקרם הסרת שיער עדין להסרת שיער החזה והבטן. נגב כל קרם שנותר כדי למנוע גירוי בעור. ודא שקו הבסיס האיזואלקטרי וצורות גל P, QRS ו-T מוצגים בבירור על מסך המחשב.
צור תיקייה חדשה שמזהה את החיה ואת הנתונים המעניינים. הפעל את מכשיר משדר דופלר פולס באמצעות מתגי ההפעלה בחזית ובגב של הקופסה הכחולה הגדולה. לאחר מכן הפעל את מעבד האותות דופלר.
לאחר מכן, פתח את תוכנת תחנת העבודה לעיבוד אותות דופלר. לחץ על הגדרה ובחר הגדרת מערכת. בחר את תדר הגשוש של 20 מגה-הרץ לניסוי.
חבר את הגשושית של 20 מגה-הרץ כשאתה חוקר עכברוש או עכבר צעיר. השתמש בגלאי 10 מגה-הרץ לעכברים מבוגרים, גדולים או שמנים. אם שני הגשושים מחוברים, יש להשתמש במתג ההחלפה בחזית מודול המשדר כדי לעבור בין תדרים לפי הצורך.
ודא שמתמר הגלאי הידני מחובר לשקע ערוץ A או B במודול המשדר. בחר את הערוץ המתאים להפעלת הגשוש הנייד. הגדר את מתג הכיוון ל-TWD כדי להציג זרימה לכיוון הגשוש מעל קו הבסיס של זרימת האפס.
לאחר מכן כוונו את הטווח ל-2.5 עד 3.5 מילימטרים לעכברים או לארבעה עד שישה מילימטרים לעכברים. הגדר את המסנן ל-15 כדי להחליק את המהירות הפאזית לאות מעומעם. לחץ על go בפינה השמאלית העליונה של ממשק המשתמש.
בחלון הקופץ הזין את פרטי הרכישה הרלוונטיים, כולל סוג בעל החיים, מין, תאריך לידה, גיל בתאריך הרכישה ומשקל. בחר את התיקייה המוכנה הרצויה מתפריט התיקייה ולחץ על אישור. כוון את קו הבסיס של ה-ECG על ידי גרירת מד הסקאלה של הציר למעלה או למטה עד שגלי ה-R נראים בבירור. לביצוע מדידות דופלר, תחילה יש למרוח כמות קטנה של ג'ל אולטרסאונד על האזור התת-סטרנלי והאפיגסטרי בחזה ובבטן של בעל החיים המורדם.
מניחים את הגשוש הדופלר במרכז הקו מתחת לסרעפת, ממש מתחת לעצם החזה, כאשר הראש פונה לכיוון האוזן השמאלית של בעל החיים. סרקו לאט את זרימת הדם על ידי תנועת הגשושית בתנועות מעגליות קטנות עם רדיוס הולך וגדל. שמור על לחץ עדין של הגשוש על העור מתחת לסרעפת בכל עת.
אם לא מזוהה זרימה מיטרלית, כוון את חוגת הטווח במרווחים של 0.5 מילימטרים עד שצורת הגל המשדר מזוהה. ודא שצורת גל דופלר והאלקטרוקרדיוגרם מוצגים בו-זמנית על המסך. צור תמונות מצב באמצעות דוושת הרגל לאחר זיהוי הזרימה הנכונה וחזר על הפעולה עד שאיכות הנתונים האופטימלית נרשמת.
עצור את רכישת הנתונים על ידי לחיצה על עצור כשאתה מרוצה מאיכות הנתונים. לחץ על קובץ ובחר 'פתח' מתפריט נפתח. בחר את קובץ הנתונים האיכותי ביותר מהתיקייה המוכנה מראש לניתוח.
לחץ על ניתוח ואז מצב ניתוח. בחר שלב שני, הגדרה כללית והגדר את סוג הנתונים לדופלר. לאחר מכן כוון את האות לזרימת מיטרל.
בחר את מודל החיה המתאים ובחר את כל שמות המדידות תחת שמות מדידה ברירת מחדל. בחר שלב חמש, עורך R-peak מתפריט הנפתח של בקרת הניתוח. הפעל סימני קצב תצוגה ו-R-peak ולחץ על חישוב אוטומטי.
לאחר מכן בחר שלב שש, עורך ביטים מתפריט הנפתח של בקרת הניתוח. הפעל את סימני הביט וה-R-peak ולחץ על 'בחר את כל הפעימות'. לאחר מכן, בחר שלב שבע, עורך סימנים.
לחץ על סימני ניתוח תצוגה ובחר את הפרמטר הרצוי תחת סמן הזרם שנבחר. ודא שהפרמטרים הניתנים זמינים לצורך שלמות הנתונים. בחר שלב שמונה, תוצאות מדידה.
לחץ על העתק תוצאות ללוח התיכון כדי להעתיק את הנתונים לקובץ אקסל ולשמור אותם. הסר את הסרט מכפות רגלי החיה לאחר כיבוי המאייף. לאחר מכן הסר את החיה ממשטח האלקטרודות.
נקה כל קרם הסרת שיער וג'ל אלקטרוד שנותרו מהחיה. לאחר מכן העבירו את החיה חזרה לכלוב עם גישה חופשית למים ומזון לצורך החלמה. להערכה המדויקת ביותר של תפקוד דיאסטולי, יש להמחיש דפוסי זרימה אנטגרדיים ורטרוגרדיים הקשורים לפתיחת וסגירת המסתם המיטרלי והאאורטלי בתוך אותו מחזור לב לאורך מספר מחזורים.
נקבעו מספר אינדקסים מתוך דפוס הזרימה ההולכת הביפאזי, כולל שיא המילוי המוקדם, שיא ההתכווצות העליים, היחס בין שני הפסגות הללו, וזמן ההאטה של שיא המילוי המוקדם. זמן ההרפיה האיזווולומי, או IVRT, היה אינדיקטור טוב לתפקוד לקוי במכרסמים. IVRT עלתה במהלך ההזדקנות במודל חולדות ZS F1 של מחלת לב שמאלי ריאתית.
שינוי זה יכול להתגלות כבר מגיל 16 שבועות. עכברים זכרים שמנים בני 24 שבועות הראו IVRT גבוה יותר בהשוואה לנקודות זמן מוקדמות יותר בביקורת רזה. פרוטוקול זה מאפשר לחוקר לחקור אינדקסים אקו-לביים מבוססים של HFpEF, כולל יחס E/A, IVRT או זמן האטת גלי E.
טכניקה זו חסרה הדמיה דו-ממדית של הלב, וחלק מהסמנים לתפקוד דיאסטולי תלויים בעומס, מצב שקשה לשלוט בו. זוהי טכניקה זולה שמזהה באופן אמין התקדמות מחלה לאורך זמן במחלות לב-ריאות שמציגות תפקוד דיאסטולי.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מאמר זה מציג פרוטוקול נגיש וחסכוני להערכת תפקוד דיאסטולי במודלים של מכרסמים עם יתר לחץ דם ריאתי (PH) עקב מחלת לב שמאלית. השיטה משתמשת באולטרסאונד דופלר בגלי פולס (pulsed wave Doppler), ללא צורך באקו-קרדיוגרפיה דו-ממדית (2D), כדי להעריך דפוסי זרימה טרנס-מיטרליים ומדדי תפקוד דיאסטולי, ובכך מספקת חלופה מעשית למחקר קרדיווסקולרי פרה-קליני.
הערכה מהימנה של דיספונקציה דיאסטולית במודלים פרה-קליניים היא קריטית לתיקוף מטרה ולצמצום סיכונים מכניסטיים בתהליך גילוי תרופות למחלות לב וכלי דם. פרוטוקול ה-pulsed wave Doppler מאפשר מדידה חסכונית וניתנת לשחזור של מדדים דיאסטוליים במודלים של מכרסמים עם יתר לחץ דם ריאתי עקב מחלת לב שמאלית, ובכך תומך בקבלת החלטות בשלבי הפיתוח המוקדמים של פורטפוליו התרופות. גישה זו נותנת מענה לצורך בנקודות סיום כמותיות וניתנות להרחבה כאשר תשתית דימוי מתקדמת אינה זמינה.
שיטה זו, המבוססת על אפקט דופלר, משתלבת ברצף שבין הגילוי המוקדם לשלב הפרה-קליני, ומספקת גשר בין מחקרים מכניסטיים לבין פיתוח של סממנים ביולוגיים תרגומיים במחקר קרדיווסקולרי.