Name: In-Vitro ניתוח פונקציונלי של תאי T רגולטוריים: התמקדות בהתרבות ובהתמיינות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-09T14:05:00.000+00:00
Duration: 10 min 21 s
Description: למדו ניתוח פונקציונלי של תאי T רגולטוריים בתרבית לבחינת התרבות והתמיינות של תאי T אפקטורים בעכברים. שיטה זו מאפשרת חקר רגולציה חיסונית ומחלות אוטואימוניות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>1.5 mL צינור צנטריפוגה</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>3457IW</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>12.5 &mu;L טיפים מסוננים לפיפטה</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>94420043</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>1250 &mu;L טיפים מסוננים לפיפטה</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>94420813</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>15 mL צינורות צנטריפוגה חרוטיים</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>339650</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>200 &mu;L טיפים מסוננים לפיפטה</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>94420318</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>צלחות 48 באר</td><td>Corning Incorporated</td><td>3548</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>5 mL בוכנה מזרק</td><td>Shifeng Medical</td><td>SB2-061(A)</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>50 mL צינורות צנטריפוגה חרוטיים</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>339652</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>50 &mu;L טיפים מסוננים לפיפטה</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>94420258</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>מסנן תאים 70 &mu;מ</td><td>Biosharp Life Sciences</td><td>BS-70-CS</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>נוגדן Anti-mouse CD28</td><td>BioXcell</td><td>BE0015-1</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>נוגדן Anti-mouse CD3</td><td>BioXcell</td><td>BE0001-1</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>Anti-mouse Foxp3 PB (FJK-16s)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>48-5773-82</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>Anti-mouse IFN-gamma PE (XMG1.2)</td><td>BioLegend</td><td>505808</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>Anti-mouse IL-17A PE-Cy7 (eBio17B7)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>25-7177-82</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>Beckman CytoFLEX S ציטומטר זרימה</td><td>Beckman Coulter</td><td>N/A</td><td>לאקטת נתונים ציטוטוריים של דגימות תאים חיסוניות</td></tr><tr><td>אלבומין בקטריה (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B2064</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>עכברי C57BL/6</td><td>Shanghai Model Organisms Center, Inc</td><td>SM-001</td><td>לאקטת לימפוציטים ראשוניים ותת-קבוצות תאי T</td></tr><tr><td>נוגדן מונקלונלי CD25 (PC61.5), PE</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>12-0251-83</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>ערכת בידוד תאים רגולטוריים CD4+CD25+, עכבר</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-091-041</td><td>לאקטת תאים</td></tr><tr><td>ערכת בידוד תאי T CD4+CD62L+, עכבר</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-106-643</td><td>לאקטת תאים</td></tr><tr><td>עכברי CD45.1</td><td>Shanghai Model Organisms Center, Inc</td><td>NM-KI-210226</td><td>לאקטת לימפוציטים ראשוניים ותת-קבוצות תאי T</td></tr><tr><td>נוגדן מונקלונלי CD45.1 (A20), FITC</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11-0453-85</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>נוגדן מונקלונלי CD45.2 (104), APC-eFluor 780</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>47-0454-82</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>נוגדן מונקלונלי CD62L (L-Selectin) (MEL-14), FITC&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11-0621-85</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>ערכת פתרון קיבוע/חדירה Cytofix/Cytoperm</td><td>BD Biosciences</td><td>554714</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>צבע ריבוי תאים eBioscience eFluor 450</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>65-0842-90</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>חומצה אתילנדיאמין טטרא-אצטית (EDTA)</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>E1170</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>סרום בקטריאלי עובר</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A5669701</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>FlowJo 10.6.2</td><td>BD Biosciences</td><td>N/A</td><td>תוכנה לניתוח נתונים ציטוטוריים</td></tr><tr><td>מעכב מעבר חלבון Golgi-Plug</td><td>BD Biosciences</td><td>555029</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>HEPES (1 M)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15630080</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>TGF-beta1 אנושי</td><td>PEPROTECH</td><td>100-21C</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>מלח סידן איונומצין</td><td>Millipore Sigma</td><td>I3909</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>עמודי LD</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-901</td><td>לאקטת תאים</td></tr><tr><td>L-גלוטמין (200 mM)&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>25030081</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>עמודי LS</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-401</td><td>לאקטת תאים</td></tr><tr><td>MACS MultiStand</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-303</td><td>לאקטת תאים</td></tr><tr><td>עמודי MS</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-201</td><td>לאקטת תאים</td></tr><tr><td>מפרידים OctoMACS</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-109</td><td>לאקטת תאים</td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010049</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>PE Rat IgG1, &kappa; נוגדן בקרת איזוטיפ</td><td>BioLegend</td><td>400408</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>נוגדן בקרת איזוטיפ PE/Cyanine7 Rat IgG2a kappa</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>25-4321-82</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>פניצילין-סטרפטומיצין</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>151

in-vitro ניתוח פונקציונלי של תאי t רגולטוריים: התמקדות בהתרבות ובהתמיינות

In Vitro Functional Analysis of Regulatory T cells: Focus On Proliferation And Differentiation

בניסוי המייצג, תאי T נאיביים שימשו כתאי Tresp כדי לחקור את השפעות התאים העשירים ב-Treg על התרבות וההתמיינות של תאי Th1 ו-Th17. בניסוי זה, תאי Tresp הופעלו על ידי תאי CD3 אנטי-עכבריים ו-APC שאינם CD4+ מועשרים, ולאחר מכן התמיינו לתאי Th1 בהשראת IL-12 p70 או לתאי Th17 בהשראת TGF-β1 ו-IL-6. בתנאי ההשראה הללו, שינויים בהתרבות ובהתמיינות של תאי טרספ נחקרו לאחר הוספת תאים מועשרים בטרג ביחס של 1:1.
כאשר תאי Tresp CD45.2+CD4+ עברו תרביות משותפת עם תאים מועשרים ב-Treg ב-...

In-Vitro ניתוח פונקציונלי של תאי T רגולטוריים: התמקדות בהתרבות ובהתמיינות

Regulatory T (Treg) cells play key roles in maintaining immune homeostasis. Abnormalities in Treg cell function are associated with various diseases, ...

in-vitro-functional-analysis-regulatory-t-cells-focus-on

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

אנו מתארים שיטה להפקת תאים T זיכרון הרגולציה, ואת נאיבי מתורם דם אחת האדם. Tregs מקוטב ניתן להשוות ואז תת אחרים במגוון רחב של יישומים גנטיים פונקציונלי עם הומוגניות גנטית, כולל assay דיכוי מפורטים גם כאן.

דור של מושרה תאים T רגולטוריים של האדם תאים ראשוניים טי נאיביות וזיכרון

הדור של לימפוציטים T מ המושרה גזע pluripotent (שב"ס) תאים נותן גישה חלופית של שימוש בתאי גזע עובריים על חיסוני מבוססי תאים T. השיטה מלמדת כי על ידי ניצול...

התמיינות מכוונת של המושרה בתאי גזע pluripotent כלפי לימפוציטים-T

CD4+ תאי T רגולטוריים הם מווסתת חיסונית רבת עוצמה וממלאים תפקידים חשובים בהומאוסטזיס של מערכת החיסון. המחסור בתאים אלה בדם היקפי הופך את המחקרים הפונקציונליים למאתגרים, במיוחד בהקשר של זיהום HIV-1. אנו מתארים כאן שיטה לבידוד והרחבה של CD4+ Tregs פונקציונליים מדם היקפי מאנשים נגועים ב-HIV-1.

כלים חדשים כדי להרחיב תאי T רגולטוריים מאנשים HIV-1 נגוע-

העברת גני adenoviral לתוך CD4 נאיבי תאי T מהונדס עם ביטוי של הקולטן אדנווירוס Coxsackie מאפשרת ניתוח המולקולרי של התמיינות תאי T...

התמרה adenoviral של CD4 תמימים תאי T ללמוד בידול Treg

תאי T נאיביים CD4+ מקוטבים לתת-קבוצות שונות בהתאם לסביבה בזמן ההפעלה.  ניתן להשיג את ההתמיינות של תאי CD4+ T נאיביים לתת-קבוצות אפקטורים שונות במבחנה באמצעות הוספת גירויים של קולטני תאי T ואותות ציטוקינים ספציפיים.

העכבר נאיבי CD4<sup&gt; +</supו&gt; בידוד תא T<em&gt; במבחנה</em&gt; בידול לתוך תת תא T

כאן, אנו מתארים פרוטוקול לניתוח הפנוטיפ של תאי T רגולטוריים (Treg) שבודדו מעכברים נגועים בנגיף כוריומנינגטיס לימפוציטי נאיבי וכרוני. בנוסף, אנו מספקים תהליך להערכת הפעילות המדכאת של תאי ה-Treg.

פנוטיפי אנליזה פונקציונלית של תאים תקינה T הופעל מבודדת מן עכברים הנגועים בנגיף לימפוציטית כרונית Choriomeningitis

פרוטוקול זה מתאר את דור phenotyping לשחזור של תאי T רגולטוריים מושרה אדם (iTregs) מתאי CD4 + T נאיביים במבחנה. פרוטוקולים שונים לזירוז FOXP3 לאפשר לחקר פנוטיפים iTreg הספציפיים שהושגו עם פרוטוקולי בהתאמה.

במבחנה בידול של האדם CD4 + FOXP3 + מושרה תקינה בתאי T (iTregs) מ נאיבית CD4 + T תאים באמצעות פרוטוקול TGF-β-המכיל

כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לגרום סובלנות ב השתלת ולאחר להעריך חוץ גופית בתוך ויוו הקיבולת המדכא של תאים נפרדים קבוצות משנה של המטופל, את מצב המערכת החיסונית של המטופל כלפי התורם או אנטיגנים אקסוגני.

במבחנה In Vivo למזהמים סביבתיים T, B והתאים מיאלואידית פעילות מדכא ומענים ההורמונאלית מן המקבלים

מאמר זה מתאר את השיטה הרומן לייצר אנטיגן הגידול-ספציפי המושרה ביותר תאים גזע מהגרים הרתי (iTE) על ידי תלת מימדי (3D) מערכת התרבות הרתי. iTE הינם תת-קבוצה הומוגנית של תאי T הקשורים היטב לתאי T תמימים עם יכולת התפשטות, היווצרות הזיכרון ודיכוי הגידול.

תלת מימדי הרתי תרבות מערכת לייצר Murine המושרה תא גזע Pluripotent-הגידול הנגזר אנטיגן-מהגרים ספציפיים הרתי

כאן אנו מתארים שיטה איתנה של קביעת זהות התא החיסונית וטוהר באמצעות חתימות אפיגנטיות זוהה באמצעות PCR כמותי (qPCR). DNA demethylation על מקום מסוים משמש מזהה ייחודי עבור סוג תא מסוים ומאפשר זיהוי של CD8 +, רגולציה, או Th17 T תאים.

קביעת זהות התא החיסונית וטוהר באמצעות PCR כמותי מבוסס אפיגנטי

למדו ניתוח פונקציונלי של תאי T רגולטוריים בתרבית לבחינת התרבות והתמיינות של תאי T אפקטורים בעכברים. שיטה זו מאפשרת חקר רגולציה חיסונית ומחלות אוטואימוניות.

In-Vitro ניתוח פונקציונלי של תאי T רגולטוריים: התמקדות בהתרבות ובהתמיינות

גלה סרטונים נוספים