Name: ספירת ועל קביעת הכדאיות של תאים בתרבית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-06-23T15:41:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: למדו לספור תאים בתרבית ולהעריך את הכדאיות שלהם באמצעות המטוציטומטר ומבחן Trypan Blue. שיטה זו חיונית לסטנדרטיזציה של ניסויים בביולוגיה תאית ולהבטחת אמינות תוצאות המחקר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

פרוטוקול טקסט מלא לגישה זו ניסיוני זמין <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract" target="_blank">הפרוטוקולים נוכחי בביולוגיה של התא</a> .

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

ספירת ועל קביעת הכדאיות של תאים בתרבית

Counting and Determining the Viability of Cultured Cells

קביעת מספר התאים בתרבית חשוב סטנדרטיזציה של תנאים התרבות בביצוע ניסויים quantitation מדויק. Hemacytometer הוא שקופיות זכוכית עבה עם אזור מרכזי מעוצב כמו חדר הספירה. ההשעיה Cell מוחל על אזור מוגדר וספר כך צפיפות התאים ניתן לחשב.

קביעת מספר התאים בתרבית חשוב סטנדרטיזציה של תנאים התרבות בביצוע ניסויים quantitation מדויק. בסרטון זה אנו מדגימים כיצד תאים נספרים באמצעות hemacytometer.

קביעת מספר התאים בתרבית היא חשובה לצורך סטנדרטיזציה של תנאי התרבית ולביצוע ניסויי כימות מדויקים. ...

קביעת מספר התאים והתרבית היא חשובה לצורך סטנדרטיזציה של תנאי התרבית ובביצוע ניסויים שבהם נדרש מספר מדויק של תאים. כאן נראה לכם כיצד לספור תאים באמצעות המוציטומטר (hemo cytometer), וכיצד לחשב את ריכוז התאים הנמצאים בסספנסיון. כמו כן, נראה לכם כיצד לקבוע את מספר התאים החיוניים בתרבית באמצעות בדיקת חיוניות ב-Trypan Blue.שלום, אני ריקי מהמעבדה של Dr.LAN ברשת מעבדות הפתולוגיה המולקולרית במזרח טנסי. היום אראה לכם כיצד לספור תאים בתרחיף וכיצד לקבוע את החיוניות שלהם. כדי להכין את ההמוציטומטר לספירת תאים, יש לנקות תחילה את פניו ואת זכוכית הכיסוי הנלווית באמצעות 70% ethanol.על לוחות הזכוכית והכיסוי להיות נקיים, יבשים וללא סיבים, טביעות אצבעות או סימני מים. לאחר מכן, הרטב מעט את קצוות ה-hemo cytometer במים מהברז והנח את לוח הכיסוי מעליו בלחץ. לוח הכיסוי צריך להישען באופן אחיד על אזור הספירה המוערב בכסף.כעת אנו מוכנים להכין את תרחיף התאים לצורך ספירה. ראשית, אם התאים גודלו בתרביות מונושכבה (monolayer),נתקו את התאים מפני השטח של הצלחת באמצעות טריפסין, כפי שמוצג בסרטון עבור תאים נצמדים. לאחר שהתאים נותקו מהצלחת, דללו אותם לפי הצורך כדי לקבל תרחיף אחיד.יש לוודא שכל הגושים בתרחיף פוזרו בעת השימוש בהמו-ציטומטר. מומלץ לספור מקסימום של 20 עד 50 תאים לכל מילימטר רבוע אחד. כאשר אתם מוכנים לטעון את ההמו

counting-and-determining-the-viability-of-cultured-cells

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

ידיעת מספרם המדויק של תאים קיימא נדרש מניפולציות תרבות רבים רקמות. פרוטוקול זה מתאר כיצד להבדיל בין תאים חיים ומתים ולכמת תאים באמצעות hemacytometer. למרות שזה מתאר הספירה האנושית גזע עצביים / מבשר תאים (hNSPCs), ניתן להשתמש בו עבור סוגי תאים אחרים.

ספירת אדם בתאי גזע עצביים

מונה Cell שרביט השלטון הוא מכשיר כף יד אוטומטיים שניתן להשתמש בהם כדי לספור תאים, צג בקוטר של התא נפח לשמש כדי לבדוק את בריאות ואיכות הסלולר אוכלוסיות מתרבות אחת לאחרת.

קביעת מספר נייד במהלך תרבית תאים באמצעות מונה Cell שרביט השלטון

תחולתה של assay clonogenic להערכת הכדאיות הרבייה הוקם עבור יותר מ -50 שנה. כאן אנו מדגימים את הנוהל הכללי לביצוע assay clonogenic עם תאים חסיד.

Assay Clonogenic: תאים חסיד

Z Moxi נגד מיניאטורי תא אוטומטי הוא כלי רומן המשלב עקרון קולטר עם הטכנולוגיה סרט דק פטנט חיישן אלגוריתם תוכנה קניינית לבצע שינוי גודל ועוד היד נטויה של מגוון רחב של גודל החלקיקים, כמו גם כדי לקבוע את הבריאות הכללית של monodisperse תא תרבויות יונקים. פרוטוקול זה מתאר את השימוש בכלי זה לספור ולהעריך את הבריאות של תרביות תאים.

קביעת ספירת תאים יונקים, גודל התא ובריאות נייד באמצעות ת Moxi מיני מונה אוטומטי Cell

תרכובות טיפוליות לעתים קרובות נבחנות ראשון במבחנה עם מבחני כדאיות. ספירת תאים עיוורת על ידי צופה אנושי יכולה להיות רגישה מאוד לשינויים קטנים במספר תאים, אבל לא להעריך את התפקוד. מבחני כדאיות ממוחשבים, כפי שמתואר כאן, יכולים להעריך גם מבנה ותפקוד באופן אובייקטיבי.

מבחני כדאיות לתאים בתרבית

פרוטוקול זה מתאר את השימוש בשלוש שיטות שונות לניתוח התפשטות תאים בשורות תאים של סרטן השד. זה כולל שימוש בספירת תאים קונבנציונלית, כדאיות תאים מבוססת זוהר וספירת תאים באמצעות הדמיית תאים. כל אחד מהם מציע יתרונות למדידה הניתנת לשחזור של התפשטות התאים.

השוואה של שלוש שיטות שונות לקביעת שגשוג תאים בשורות תאי סרטן השד

מאמר זה מתאר את הכימות של מיקרוגרפים המוציטומטריים והנדידה/פלישה באמצעות שני תוספים חדשים של ImageJ בקוד פתוח, מחשבון ריכוז תאים ומונה בדיקת הגירה.  יתר על כן, הוא מתאר פרוטוקולי קליטת וכיול תמונה וכן דן בפירוט בדרישות הקלט של התוספים.

כימותים אוטומטיים וניתוח הליכי ספירה הניידת באמצעות תוספי ImageJ

לעתים קרובות יש צורך להעריך את הרעילות הפוטנציאלית של מערכת תרכובות על תאים מתורבתים. כאן, אנו מתארים אסטרטגיה למסך מהימן עבור תרכובות רעילות בפורמט 96-היטב.

אסטרטגיה לזיהוי תרכובות המשפיעות על צמיחת תאים והישרדות בתאי מיונקים מתורבתים בתפוקה נמוכה לבינונית

פרוטוקול זה מספק הנחיה מקיפה להגדרה ולניטור כמותי של תרביות משותפות, כולל ציאנובקטריה מפרישת סוכר פוטו-אוטוטרופיים ושמרים הטרוטרופיים.

הרכבה וכימות של תרביות משותפות המשלבות שמרים הטרוטרופיים עם ציאנובקטריה מפרישת סוכר פוטוטרופית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לכימות הישרדות לאחר לחץ בדגימות שמרים. הבדיקה משתמשת בשני צבעים פלואורסצנטיים, SYTO 9 ופרופידיום יודיד (PI), כדי לכמת את שלמות קרום הפלזמה. הוא משתמש בזרימה ציטומטרית כדי לספק הערכות כמותיות וניתנות לשחזור של חלקי התאים החיים, המתים והפגומים עבור דגימות פוסט-מתח חמצוני.

בדיקת LIVE/DEAD אופטימלית בשילוב עם ציטומטריית זרימה לכימות הישרדות לאחר מתח בתאי שמרים

למדו לספור תאים בתרבית ולהעריך את הכדאיות שלהם באמצעות המטוציטומטר ומבחן Trypan Blue. שיטה זו חיונית לסטנדרטיזציה של ניסויים בביולוגיה תאית ולהבטחת אמינות תוצאות המחקר.

ספירת ועל קביעת הכדאיות של תאים בתרבית

גלה סרטונים נוספים