Name: כירורגיה Stereotaxic לשרוד במכרסמים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-10-06T00:00:00.000+00:00
Duration: 8 s
Description: למד כירורגיה סטריאוטקטית לשרוד במכרסמים לניטור רמות נוירוטרנסמיטרים במוח. שיטה זו מאפשרת מחקר דינמיקה עצבית והתנהגות בחיות נעות באופן חופשי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

נתמך על ידי DK065872 (ENP), קרן משפחת סמית פרס הצטיינות במחקר ביו (ENP), F31 DA023760.

תקציר שני בן חודש ממוצע C57BL/6J גיל עכברים או שווה ערך או שלושה חודשים הישן הגיל הממוצע חולדות Sprague Dawley או שווה ערך מורדמים עם קטמין (60 מ&quot;ג / ק&quot;ג ה-IP של חולדות: 100 מ&quot;ג / ק&quot;ג ip עבור עכברים) ו xylazine (10 מ&quot;ג / kg, ip גם עבור מינים). הרגעה היא לנטר באמצעות קמצוץ הבוהן עדין לסגת רפלקס הפגינו <a href="/index/details.stp?ID=236">Walantus et al.</a> (יופיטר, 6, 2007) ו <a href="/index/details.stp?ID=404">Szot et al.</a> (יופיטר, 9, 2007). Thermoregulation ניתן לספק באמצעות כרית חימום thermostatregulated (ALA מכשירים בע&quot;מ) וכן פיקוח באמצעות מדחום רקטלי. ראש מגולח הוא פרווה וניקה עם יוד לפני החתך. לאחר חיתוך העור (2 ס&quot;מ על חולדות, 1 ס&quot;מ על עכברים) והסרה של כל רקמות רכות מפני השטח של הגולגולת, המיקום של צינורית מדריך נקבעת ביחס גבחת. חור 6 מ&quot;מ הוא קדח דרך הגולגולת עם הקודח המופעל באמצעות סוללה נטענת המיועד לניתוח מכרסם (כלים המדע פיין, Inc). טיפול נלקחת כך המקדח אינו לחדור דרך ממברנות קרום המוח או כלי הדם. גולגולת הוא מושתל עם הבילטרליים 5 21 מ&quot;מ מד נירוסטה פירים המדריך המוביל בגרעין הנסמך האחורי, בסטריאטום הגבי או קליפת המוח הקדם חזיתית. הקואורדינטות stereotaxic נקבעים לפי פרנקלין Paxinos, 1997 (המוח עכבר קואורדינטות Stereotaxic, Academic Press) או Paxinos ווטסון, 2006 (המוח עכברוש בקואורדינטות Stereotaxic, לחץ האקדמית). שתלים מובטחות מלט שיניים. בולוס של האצבעות Lactated של תמיסת מלח 0.9% ניתנת בסוף הניתוח (5mls SC בחולדות 1 מ&quot;ל SC בעכברים לאחר נוזלים הם חיממו את טמפרטורת הגוף הרגילה) כדי למנוע התייבשות. עצירות (0.1-0.5mg/kg SC) ניתנת פעמיים ביום, ולאחר מכן, על בסיס במידת הצורך, אם בעל החיים נראה סובל מכאבים. טיפול אנטיביוטי מקומי (משחת bacitracin) וטיפול אנטיביוטי מערכתית (פניצילין 100,000 IU / kg IM כל 12 שעות במשך 48 השעות הראשונות שלאחר הניתוח) מנוהלים אם שלאחר הניתוח זיהומים להתרחש. בעקבות הניתוח, בעלי חיים הם שוכנו בנפרד עם מזון זמין כרצונך מים המודעה. לפחות שבוע מותרת להתאוששות לפני microdialysis ו המתת חסד. לאחר התאוששות מניתוח, החיות מועברים לכלוב microdialysis ו בדיקות microdialysis מוכנסים ו ביצרו את פירים מדריך שהותקנו במהלך הניתוח. בדיקה הכניסה אינו גורם כאב או אי נוחות כי החללית היא עקיפת רקמות, עור שרירים קרום המוח דרך הפיר מדריך. לכן, הכניסה בדיקה נעשית ללא הרדמה וכל הרדמה-Induced ההשפעות על התנהגות הנוירוכימיה או נמנעים. אנחנו נותנים בדיקות לייצב במשך 12 שעות ואז אנחנו מתחילים דגימה כל 30 דקות למשך 8-12 שעות, תלוי בניסוי. אנחנו עוקבים אחר התנהגות של תנועה של בעל החיים באמצעות שתאי או הקלטה ידנית של התנועה על ידי הנסיין. דגימות Microdialysate מוזרקים כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים עם זיהוי אלקטרוכימי (HPLC-EC) מכשיר לגילוי ניתוח neurochemical ו. אנחנו מחפשים השפעות על הנוירוכימיה הבסיס והתנהגות של תנועה. בסוף הניסוי בבעלי חיים הוא מורדמים באמצעות מנת יתר של קטאמין מערכתית (200 מ&quot;ג / ק&quot;ג IP) xylazine (20 מ&quot;ג / ק&quot;ג, ip). ואז הלב perfused עם מלח 0.9% ואחריו paraformaldehyde 4%. המוח מוסרים, קפוא לחתוך לאורך דרכי microdialysis בדיקה כדי לוודא מיקום מדויק בדיקה. נוהל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את מכשיר stereotaxic ואת כל החומרים הדרושים. ודא אזור ומכשירים מנקים ו מעוקרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הפרווה עם מכונת גילוח חשמלית. עבור מהאוזניים רק ב-בין העיניים, להעביר תער לכיוונים שונים ביעילות לנקות שטח של פרווה. החל povidine / יוד לאזור מגולח אבל להגן על העיניים ממנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר חיה על המנגנון stereotaxic ידי הצבת הסורגים האוזן לתוך תעלת האוזן והידוק למקומו. ראשית הר חטיף אוזן בתעלת האוזן, ואז להחזיקו במקום והחלק בבר האוזן אחרים. אתה יודע שאתה נמצא במיקום הנכון כאשר הראש כבר לא יכול להיות עבר מצד לצד. אבטח את הפה עם הר הקדמי של stereotaxic ולוודא כי הראש הוא רמה עם סרגל. שים את שליט במצב אנכי לגבי פלטפורמת מכשיר stereotaxic ולבדוק בזווית של 90 מעלות בין השליט לבין האמצעי של הקרקפת של החיה). אישור זה דרך המכשיר stereotaxic אם הוא מציע יכולת כזו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע חתך קדמית / אחורית על הקרקפת עם אזמל סטרילי המשתרעת למבדה רק ב-בין העיניים של החיה. השתמש hemostats מעוקרים לצבוט את העור, לשמור על החתך פתוח. באמצעות כמה צמר גפן סטרילי, יבש את המשטח גולגולת חשופה. <li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכניסים את הצינורית מדריך על הר שלה, למצוא גבחת על הגולגולת, ואת המיקום הנכון צינורית מדריך על מיקום זה. רשמו את הקואורדינטות קדמית / אחורית וצדדית. מ גבחת, למצוא את הקואורדינטות הנכונות הדרושות המיקום של החללית שלך בעזרת האטלס stereotaxic. מקם את הצינורית מדריך קואורדינטות הנכון ידי הוספה או הפחתה של גבחת. הביאו צינורית המדריך שלך למטה עד שהוא נוגע בגולגולת, ולאחר מכן להקליט את זה לתאם הגחון. הפוך את סימן העיפרון בעיפרון סטרילי במיקום זה על הגולגולת, זה הוא המקום שבו אתה תהיה קידוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הצינורית מדריך לעקר המקדח שלכם. בזהירות לקדוח חור על סימן העיפרון עד שאתה מקבל דרך רוחב הגולגולת. בדוק עם צינורית מדריך כדי לראות אם זה היה לנקות את החור בלי לגעת בצדדים. שמור קידוח ובדיקת עד צינורית יכול ברורה בנתיב ישר. לאחר חור הוא עשה, להשתמש במחט סטרילית בעדינות האגרוף קרומי המוח כדי לאפשר החדרה של צינורית בלא הפרעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב הבא, בעזרת מקדחה ידנית, להפוך שישה חורים עבור הברגים בגולגולת: שני קדמי אל החור הצינורית, שני לרוחב לחור הצינורית, ושני האחוריים לצדדים. לעקר six ברגים ומניחים אותם על גבי הגולגולת עד שהם מעוגנים היטב על. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקו את צינורית מדריך עם אתנול מלוחים, הר, ולהפחית את זה לאט כדי לתאם את הגחון הנכון. ודא כי הצדדים לא נוגעים וכי הוא הולך אנכי לחלוטין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את הבורג עוגן מדיאלית מאחורי הברגים הגולגולת האחורי והחזק אותו במקום עם פינצטה. מערבבים אצווה דקה של דבק דנטלי נוזלי לכסות את הצינורית מדריך, ברגים, ואת שאר הגולגולת עם מרית סטרילית. בצע אחר אצווה, עבה הפעם, לכסות לחלוטין את האזור את הבורג ואת הצינורית עוגן מספיק כדי לאבטח אותו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כמו מלט הופך עבה לפני שהוא מתקשה, מפרידים את העור מן הכוס מלט עובש כוס מלט עם מרית כדי לוודא את מכסה בטון חלקה מסביב לא לגרות את העור לאחר מכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר מלט שיניים יבש לחלוטין לפני הסרת חיה מן המנגנון. הסר את hemostats. החל bacitracin כל הדרך סביב כובע הבטון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר החיה כבוי המכשיר stereotaxic, להזריק אותו עם 0.25 מ&quot;ל של פניצילין IM (תוך שרירי) ואחריו 1 מ&quot;ל של תמיסת מלח SC (תת עורי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את חיה בכלוב משלו לפקח על זה עד שזה הופך להיות מודע לפני החזרתו לחדר שלו להתאושש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג חיות עד שהם להתאושש מן ההרדמה ביום הניתוח מנותחות מדי יום, עד לסוף הניסוי, סימנים של דלקת והערכה של כאב / מצוקה. זה כולל סופי שבוע וחגים. תנועה ספונטנית נמוכה, הניקוד מצוקה על טיפול, יציבה כפופה, שלשולים, נפיחות והפרשות בתחום headmount, ואת חוסר האכלה / שתייה הם כולם סימנים של כאב ומצוקה. עצירות (0.1-0.5mg/kg SC) ניתנת פעמיים ביום, ולאחר מכן, במידת הצורך, אם בעל החיים נראה סובל מכאבים. טיפול אנטיביוטי מקומי (משחת bacitracin) וטיפול אנטיביוטי מערכתית (פניצילין 100,000 IU / kg IM כל 12 שעות במשך 48 השעות הראשונות שלאחר הניתוח) מנוהלים אם שלאחר הניתוח זיהומים להתרחש. אם כל התופעות הללו נמשכות בעקבות ניהול עצירות, נוזל משלימה, וטיפול אנטיביוטי תוך 12 שעות ניתוח, החיה מורדמים. </li></ol>

<ol><li>Bungay, P. M., Newton-Vinson, P., Isele, W., Garris, P. A., Justice, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+of+dopamine+interpreted+with+quantitative+model+incorporating+probe+implantation+trauma%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Microdialysis of dopamine interpreted with quantitative model incorporating probe implantation trauma.</a> J. Neurochem. 86, 932-946 (2003).</li>
<li>Chen, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+tissue+trauma+on+the+characteristics+of+microdialysis+zero-net-flux+method+sampling+neurotransmitters%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Theor.+Biology%22%5BJournal%5D)">Effects of tissue trauma on the characteristics of microdialysis zero-net-flux method sampling neurotransmitters.</a> Journal of Theor. Biology. 238, 863-881 (2006).</li>
<li>Geiger, B. M., Behr, G. G., Frank, L., Caldera-Siu, A. D., Beinfeld, M. C., Kokkotou, E. G., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+defective+mesolimbic+dopamine+exocytosis+in+obesity-prone+rats%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Evidence for defective mesolimbic dopamine exocytosis in obesity-prone rats.</a> FASEB Journal. 8, 2740-2746 (2008).</li>
<li>Pothos, E. N., Creese, I., Hoebel, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restricted+eating+with+weight+loss+selectively+decreases+extracellular+dopamine+in+the+nucleus+accumbens+and+alters+dopamine+response+to+amphetamine%2C+morphine+and+food+intake%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Restricted eating with weight loss selectively decreases extracellular dopamine in the nucleus accumbens and alters dopamine response to amphetamine, morphine and food intake.</a> The Journal of Neuroscience. 15, 6640-6650 (1995).</li>
</ol>

למחברים אין ניגודי עיניינים להצהיר עליהם.

בשנת vivo microdialysis היא הכלי המועדף למדידת נוירוטרנסמיטרים מרובים מטבוליטים באתרים שונים של המוח החי. עם זאת, רק מפקחת רמות של תאי neurochemicals וזה לא מציעים את הפתרון זמן כדי לפקח exocytosis נוירוטרנסמיטר בזמן אמת. באמצעות גרסה של טכניקה המכונה &quot;נטו השטף&quot;, ריכוז הנוירוטרנסמיטר בפועל באתר נתון יכול להיות מחושב, אשר בתורו יכול לתת מדידות מדויקות של קצב ספיגה חוזרת של מוליך עצבי באמצעות מובילי פלזמה הממברנה. Microdialysis אידיאלי להמחשת ההב...

חומרים מתוארות במסמך הפרוטוקול

כירורגיה stereotaxic לשרוד במכרסמים

Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents 

היכולת למדוד את רמות הבסיס תאיים של נוירוטרנסמיטורים במוח של חיות ער מאפשר לקביעת ההשפעות של אתגרים מערכתיים שונים (תרופתי או פיזיולוגי) של מערכת העצבים המרכזית. לדוגמה, ניתן למדוד ישירות איך הדופמין במוח התיכון של החיה תחזיות להגיב דופמין שחרור תרופות כמו גירויים d-אמפטמין או טבעיים כמו מזון. בסרטון הזה, אנו מראים לך איך שתל cannulas מדריך מיקוד לאתרים ספציפיים במוח חולדה, איך להוסיף שתל בדיקה microdialysis וכיצד להשתמש ביצועים גבוהים כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב עם זיהוי אלקטרוכימי (HPLC-EC) כדי למדוד רמות של תאי נוירוטרנסמיטורים oxidizable ומטבוליטים. מבוא מדויק מקומי של תרופות באמצעות החללית microdialysis מאפשר עבודה מעודן על סגוליות האתר מנגנון של מתחם הפעולה. טכניקה זו אנטומי מעולה ברזולוציה כימיים אבל רק ברזולוציה זמן צנוע כמו דגימות microdialysis מעובדים בדרך כלל כל 20-30 דקות כדי להבטיח רמות הנוירוטרנסמיטר לזיהוי. כלים משלימים לשעבר vivo (כלומר, פרוסה והתרבות תא electrophysiology) יכול לסייע עם ניטור בזמן אמת עצבית.

ניטור של רמות הנוירוטרנסמיטר תאי מוח באזורים שונים של בעלי חיים באופן חופשי לנוע מציע תובנות על הקשר בין שחרור הנוירוטרנסמיטר והתנהגות. בשנת vivo microdialysis יחד עם זיהוי אלקטרוכימי מספק אנטומי מעולה ברזולוציה כימיים ומידע איך עצבית הבסיס משתנה על ידי מניפולציות תרופתי או פיזיולוגי.

כירורגיה Stereotaxic לשרוד במכרסמים

היכולת למדוד רמות בסיס חוץ-תאיות של מוליכים עצביים במוחם של בעלי חיים ערים מאפשרת את קביעת ההשפעות של...

שלום, אני ברנדה גייגר מהמעבדה של עמנואל פוטוס במחלקה לפרמקולוגיה וטיפול ניסויי בבית הספר לרפואה של אוניברסיטת טאפטס. ואני לורן פרנק, גם אני מהמעבדה. היום נדגים ניתוח סטריאוטקטי בר-הישרדות במכרסמים.הליך זה כולל את הגדרת המכשור והכנת בעל החיים לניתוח, ולאחר מכן ביצוע הניתוח הסטריאוקסיס. נתחיל בתהליך. לפני תחילת הפעולה, הגדירו את המכשיר הסטריאוקסיס והכינו את כל החומרים הדרושים.וודאו כי האזור והמכשירים נקיים ומעוקרים. לאחר מכן, הכינו את בעל החיים לניתוח. אדגים היום את הניתוח באמצעות חולדה מסוג Sprague Dawley בת 10 שבועות.אנו משתמשים גם בחולדות מסוג spray dolly בנות שלושה חודשים ובעכברים מסוג C 57 black six J בני חודשיים, אשר דורשים מתאם פלטפורמה ייעודי. הרדמו את החולדה באמצעות הזרקה תוך-בטנית (IP) של תמיסה המכילה 60 milligrams per kilogram ketamine ו-10 milligrams per kilogram Xylazine. שמרו על חום גוף של בעל החיים באמצעות פד חימום המפולט על ידי תרמוסטט.לאחר שווידאת כי בעל החיים נמצא תחת הרדמה וטמפרטורת גופו התייצבה בערך המתאים, התחל בניתוח. כדי להתחיל בניתוח, גדל את פרועת בעל החיים באמצעות תספורת חשמלית, מהאוזניים ועד למרווח שבין העיניים. מרח יוד על האזור הגזור, אך הקפד להגן על העיניים מפניו.כעת קבעו את בעל החיים על המכשיר הסטריאוטקסי. לצורך כך, ראשית קבעו מוט אוזן אחד בתעלת האוזן, ולאחר מכן החזיקו אותו במקומו והחליקו פנימה את מוט האוזן השני, כך שהראש לא יוכל לזוז מצד לצד, אך האף יוכל לזוז למעלה ולמטה. אבטחו את הפה באמצעות התושבת הקדמית של סרגל המשתמש במכשיר הסטריאוטקסי כדי לוודא שהראש נמצא במנח אופקי.יש לשמור על זווית של 90 מעלות בין הסרגל למרכז קרקפית בעל החיים. לאחר שבעל החיים ממוקם במקומו, בצעו חתך קדמי-אחורי (anterior posterior) בקרקפית באמצעות סכין מנתחים סטרילית. הרחיבו את החתך מהלמבדה (lambda) ועד למרווח שבין עיני בעל החיים.השתמשו בפינצטות המוסטטיות (hemostats) כדי להסית את העור ולשמור על החתך פתוח. ייבשו את פני הגולגולת החשופים בעזרת מספר מקלוני צמר גפן. לאחר מכן, הניחו את הקנולה המנחה על המעמד שלה.לאחר מכן, אתרו את נקודת bgma על הגולגולת ומיקמו את קנולת המדריך ישירות מעל מיקום זה. רשמו את הקואורדינטות הקדמיות (anterior), האחוריות (posterior) והצדדיות (lateral) ביחס ל-bgma. מצאו את הקואורדינטות המדויקות הדרושות להצבת הגשוש (probe).בעזרת האטלס הסטריאוטקטי, מקמו את קנולת ההובלה לקואורדינטות הנכונות על ידי הוספה או הפחתה מה-bgma. הורידו את קנולת ההובלה עד שתיגע בגולגולת, ואז רשמו קואורדינטה ונטראלית זו. סמנו בסימון עיפרון מיקום זה על הגולגולת.כאן תבצעו את הקידוח. כדי להתחיל בקידוח, הסירו את קנולת המנחה ועקרו את מקדח הקידוח.לאחר מכן, קדחו חור בקוטר 0.5 מילימטר בסימון העיפרון עד להגעה לצדו השני של הגולגולת. בדקו באמצעות קנולה מדריך (guide cannula) אם היא עוברת דרך החור ללא מגע עם הדפנות. המשיכו לקדוח ולבדוק עד שהקנולה תוכל לעבור דרך החור במסלול ישר.יש להיזהר לא לחדור דרך קרומי העטיפה של המוח (meninges) או דרך כלי דם. לאחר ביצוע החור, השתמשו במחט סטרילית כדי לנקב בעדינות את הקרומים על מנת לאפשר הכנסה חופשית של קנולת ההנחיה. לאחר מכן, השתמשו במקדח ידני כדי ליצור שישה חורים עבור ברגי הגולגולת.שניים קדמיים, שניים צדיים ושניים אחוריים לחור הקנולה. סטריליזציה של שישה ברגי עצם מנירוסטה והחדרתם לגולגולת עד שהם מעוגנים היטב. לאחר השחלת הברגים, נקה את קנולת ההנחיה באתנול והמתן לייבושה, ולאחר מכן התקן והורד באיטיות את ההנחיה לקואורדינטה הוונטרלית המתאימה.הקנולה מורדת מעלה ומטה כדי למנוע נזק למוח. ודאו שהדפנות אינן נוגעות ושהיא נכנסת בצורה אנכית מוחלטת. לאחר מכן, הסירו את התפסנים (hemostats).ערבבו כמות דקה של דבק שיניים נוזלי וכסו בעזרת שפכטל את קנולת המדריך, את הברגים ואת שאר הגולגולת בשכבה דקה. לאחר מכן, מקמו את בורג העיגון מדיאלית ומאחורי ברגי הגולגולת האחוריים והחזיקו אותו במקומו בעזרת פינצטה. הכינו מנה נוספת של דבק, הפעם בעובי רב יותר, וכסו לחלוטין את הקנולה ואת ברגי העיגון בכמות דבק מספקת כדי להבטיח את קיבעונם כאשר הדבק יסמיך.אך לפני שהחומר מתקשה, הפרד את העור ממכסה המלט ועדן את מכסה המלט בעזרת השפכטול כדי לוודא שהוא חלק מכל הצדדים ואינו מגרה את העור. מאוחר יותר, מוסיפים מלט נוסף כדי לחזק את הקנולה המנחה ולגשר בינה לבין שאר מתקן הראש. לאחר שהמלט הדנטלי התייבש לחלוטין, הוצא את החיה מהמכשיר.לאחר מכן, מרחו את האנטיביוטיקה המקומית bacitracin מסביב לכל כיסוי המלט. לאחר מכן, הניחו זריקה תוך-שרירית של penicillin, ואחריה זריקה תת-עורית של saline. החזירו את בעל החיים לכלובו ועקבו אחריו עד שיחזור להיות בהכרה.לאחר מכן, החזירה את בעל החיים לכלובו להחלמה. לאחר ההחלמה, עקוב אחר בעל החיים מדי יום עד לסיום הניסוי כדי לזהות סימני זיהום ולהעריך כאב ומצוקה.יש להחדיר 0.1 עד 0.5 מיליגרם לקילוגרם של buprenorphine תת-עורי פעמיים ביום, לפי הצורך, אם נראה כי בעל החיים סובל מכאב. בנוסף, יש להעניק טיפול מקומי ב-bacitracin וטיפול סיסטמי ב-penicillin. במקרה של זיהומים לאחר הניתוח, או אם אחד מהסימנים נמשך יותר מ-12 שעות לאחר הניתוח, יש להביא את בעל החיים להריגה הומנית.הצגנו בפניכם כיצד לבצע ניתוח סטריאוטקטי שורד במכרסמים. בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור לשמור על סביבה סטרילית במהלך הניתוח ולעקוב מקרוב אחר בעל החיים לאחר הניתוח כדי למנוע זיהום, וכן להניח את בעל החיים על פסי התמיכה בצורה נכונה, כדי שמיקום קנולת המדריך יהיה מדויק.זה הכל. תודה שצפיתם ובהצלחה בניסוייכם.

survivable-stereotaxic-surgery-in-rodents

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

הגידול בחולים המוח שגרתי לעבור הקרנות גולגולתי, ואף מועיל, טיפול זה לעתים קרובות תוצאות תפקוד קוגניטיבי מתישה. זו הבעיה הבלתי פתורה רציני כרגע, לא נותר קליני, העלתה את המאמצים שלנו כדי לתכנן תא גזע טיפולים מבוססי להתאוששות של קרינה הנגרמת decrements קוגניטיבי.

גזע להשתלות אסטרטגיות Cell לשיקום של ליקוי קוגניטיבי נגרמת על ידי הקרנות גולגולתי

ניתוח Stereotaxic על מכרסמים מאפשר ניהול ממוקד של תרופות או גירוי חשמלי והקלטות ב ער, התנהגות בעלי חיים. במצגת וידאו זה נדגים חידודים פרוצדורליים האחרונות להליך ארוכת זה כי שיעור ההישרדות משופרת בהצלחה ואובדן מופחת לאחר הניתוח המשקל.

מכרסמים כירורגיה Stereotaxic ועל צער בעלי חיים שיפורים תוצאה של ההתנהגות Neuroscience

אבלציה ממוקד באזור ספציפי במוח (ים) על ידי עירוי של excitotoxin באמצעות קואורדינטות stereotaxic מתואר. טכניקה זו יכולה גם להיות מותאם עבור עירוי של כימיקלים אחרים במוח חולדה.

ניתוח Stereotaxic על הנגע Excitotoxic של אזורי מוח ספציפיים עכברוש למבוגרים בלבד

פרוטוקול זה מתאר שיטה סטנדרטית להדמיה תפקודית בתהודה המגנטית בו זמנית וגירוי מוחי עמוק במכרסמים. השימוש בשילוב של כלים ניסיוניים האמורים, מאפשר החקירה של פעילות במורד הזרם העולמית בתגובה לגירוי חשמלי בכמעט כל יעד במוח.

גירוי מוחי עמוק עם fMRI סימולטני במכרסמים

עבודה זו מהווה פרוטוקול לביצוע השרנית, השתלת נוירו-ניתוחית של מערכים מיקרואלקטרודה במרסט המשותף. שיטה זו מאפשרת באופן מפורש הקלטות אלקטרופיזיולוגיות בבעלי חיים מתנהגים בחופשיות, אך ניתן להתאים בקלות לכל התערבות נוירולוגית דומה אחרת במין זה (למשל, צינורית עבור מינהל התרופות או אלקטרודות לגירוי מוחי).

כירורגיה סטריאוטקאית עבור השרשה של מערכים מיקרואלקטרודה ב מרמוסטמצוי

ניתוח סטריאוטקסי למיקוד אתרי מוח בעכברים כולל בדרך כלל גישה דרך עצמות הגולגולת ומונחה על ידי ציוני דרך בגולגולת. כאן אנו מתווים גישה סטריאוטקסית חלופית כדי להתמקד בגזע המוח הקאודלי ובחוט השדרה הצווארי העליון באמצעות ה-cisterna magna המסתמך על הדמיה ישירה של ציוני דרך של גזע המוח.

גישה כירורגית סטריאוטקסית למיקרו-איניג'קט גזע המוח הקאודלי וחוט השדרה הצווארי העליון באמצעות ציסטרנה מגנה בעכברים

אנו מתארים שיטה ניסיונית פרה-קלינית להערכת נוירומודולציה מטבולית המושרה על-ידי גירוי מוחי עמוק חריף באמצעות in vivo FDG-PET. כתב יד זה כולל את כל השלבים הניסיוניים, החל מניתוח סטריאוטקסי ועד ליישום הטיפול בגירוי ורכישה, עיבוד וניתוח של תמונות PET.

In vivo טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים לחשיפת דפוסי פעילות המושרים על ידי גירוי מוחי עמוק בחולדות

הפרוטוקול הנוכחי מתאר אסטרטגיה מעשית לזרז את שלב האימות של קואורדינטות הזרקה סטריאוטקסיות לפני ביצוע מעקב נגיפי באמצעות צבעים ומקטעים קפואים.

אימות ראשוני של קואורדינטות הזרקה סטריאוטקסיות באמצעות קריוסקציה

פיתוח מודלים אורתוטופיים של גידולי מוח בילדים דורש דיוק קפדני, תוך שימוש במכשיר סטריאוטקסי להשתלת תאים סרטניים בצורה מדויקת. המתודולוגיה המוצגת כאן מתארת את השלבים הכרוכים בהכנת תאי גידול במוח, ביצוע זריקות תוך גולגולתיות ויישום מערכת ניטור לאחר ניתוח להערכת השתלת גידול מוח.

הקמת מודלים אורתוטופיים של קסנוגרפט שמקורם בחולה לגידולי מוח באמצעות מכשיר סטריאוטקסי

הלב heterotopic העכבר מודל השתלת הוכח על ידי חוקרים רבים להיות שיטה חשובה לחקר המנגנונים של דחייה התגובה החיסונית. עם זאת, טכניקות מעורבות עדיין מאתגרת. על ידי שינוי שיטות סטנדרטיות יש לנו הצלחה עם יותר מ 1000 השתלות.

השתלת הלב Heterotopic ב עכברים

למד כירורגיה סטריאוטקטית לשרוד במכרסמים לניטור רמות נוירוטרנסמיטרים במוח. שיטה זו מאפשרת מחקר דינמיקה עצבית והתנהגות בחיות נעות באופן חופשי.

כירורגיה Stereotaxic לשרוד במכרסמים

גלה סרטונים נוספים