Misura del Complemento 50% emolitica (CH 50) Attività di siero

Sommario

La via classica è attivata da anticorpi e culmina nella lisi delle cellule bersaglio. Il CH _{50 fornisce una misura dell'attività complemento di un campione di siero. Questo video dimostra i passi coinvolti nella determinazione del CH 50 Di un campione di siero, i calcoli e l'interpretazione dei risultati.}

Abstract

Il sistema del complemento è un gruppo di proteine ​​che, quando attivato portare a bersaglio la lisi cellulare e facilita la fagocitosi attraverso opsonisation. Componenti complementari individuali possono essere quantificati comunque questo non fornisce alcuna informazione circa l'attività della via. Il CH

Protocollo

Preparazione di 5x Veronal Buffered Saline (VBS)

1. Per preparare il veronal Buffered Saline (VBS), tre soluzioni separate devono essere preparati.
2. 1 Preparare la soluzione sciogliendo 21.25gm di NaCl e 0.94gm Barbitone di sodio in 350 ml di acqua distillata. Le concentrazioni finali di NaCl e sodio Barbitone sono 1,02 e 13 mm rispettivamente.
3. Preparare la soluzione 2 sciogliendo 1.44gm di Barbitone in 125ml di acqua distillata calda. La concentrazione finale di Barbitone è 62,5 mm.
4. 3 Preparare la soluzione sciogliendo 20.33gm di MgCl ₂ e 4.41gm di CaCl ₂ in 100 ml di acqua distillata. La concentrazione fina....

Discussione

Il CH ₅₀ saggio è soggetta a molte interferenze. Alcuni SRBC sono più fragili di altre, con conseguente emolisi spontanea che non è correlata a completare l'attività. L'affinità degli anticorpi di coniglio varia da lotto a lotto e da un costruttore all'altro, questo influisce sulla quantità di anticorpo che si lega alla GRP. Inoltre, il processo di sensibilizzazione SRBC con risultati anticorpi nelle cellule con quantità diverse di rivestimento degli anticorpi del GRP. Raccolta dei campioni e cons.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Globuli rossi di pecora	CSL	2490201	Usare al 1% finale
Siero			Siero umano
Siero emolitico anti-pecora da coniglio (GR), non coniugato	AbD Serotec	C12HSB
Piastra a 96 pozzetti con fondo piatto	Sarstedt Ltd	83.1839
Soluzione salina veronalica tampone			Usare a 1x finale
Bagno termostatato
Lettore di piastre
Stanza/incubatrice a 37°C