Montaggio di cervelli di Drosophila adulta: un metodo per preparare vetrini per l'imaging confocale

In questo articolo

Abstract

Fonte: Kelly, S. M., et al. Dissezione e colorazione immunofluorescente del corpo del fungo e dei neuroni fotorecettori nel cervello adulto di Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).

Questo video descrive un metodo per montare cervelli intatti da mosche adulte sotto un scivolo da ponte e mostra il protocollo eseguito su cervelli immunocolorati per la microscopia fluorescente.

Protocollo

Questo protocollo è un estratto da Kelly et al., Dissezione e colorazione immunofluorescente del corpo del fungo e dei neuroni fotorecettori nei cervelli adulti di Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017).

1. Montaggio di cervelli adulti di D. melanogaster su vetrini per microscopio e imaging

Costruisci una diapositiva "ponte". Posizionare due vetrini coprioggetti "base" a circa 1 cm di distanza l'uno dall'altro su un vetrino caricato positivamente. Assicurarsi che il lato caricato positivamente della guida sia rivolto verso l'alto. Far aderire i vetrini coprioggetti al vetrino con lo smal....

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Risultati

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Figura 1: Montaggio di cervelli in preparazione per l'imaging in immunofluorescenza. (A) I cervelli sono montati su vetrini SuperFrost Plus con una copertura del ponte per evitare l'appiattimento dei cervelli. Due vetrini coprioggetti "base" vengono fatti aderire a un vetrino Superfrost Plus caricato positivamente con smalto trasparente per unghie e i cervelli sezionati vengono quindi posizionati sul vet.......