Preparazione dei vetrini per nematodi: un metodo per montare gli animali su un cuscinetto di agar

Abstract

Fonte: Teoh, J. S., et al. Approcci quantitativi per lo studio delle strutture cellulari e della morfologia degli organelli in Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).

Durante l'imaging dal vivo di C. elegans, è possibile utilizzare un tampone di agarosio per tenere fermo il nematode senza danneggiarlo o seccarlo. Questo video descrive come preparare un semplice tampone di montaggio per la microscopia.

Protocollo

Questo protocollo è estratto da Teoh et al, Approcci quantitativi per lo studio delle strutture cellulari e della morfologia degli organelli in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019).

Preparazione dei vetrini per l'imaging

1. Preparare il 3-4% p/v di brodo di agarosio in un flacone adatto al microonde (3-4 g in 100 ml di acqua ultrapura).
   NOTA: L'agar può essere utilizzato al posto dell'agarosio alla stessa concentrazione.
2. Sciogliere accuratamente....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Agar-agar	Merck	1.01614.1000
Agarose	Invitrogen	16500-500
Vetrini coprioggetti #1	Thermo scientifique	MENCS22221GP
Vetrini coprioggetti #1.5	Zeiss	Numero 474030-9000-000	Realizzato da SCHOTT
Diapositive di vetro	Thermo scientifique	MENS41104A/40
Pipetta Pasteur	Corning	CLS7095D5X-200EA
Filo di platino	sigma	Codice 267201-2G
Tetramisole cloridrato	sigma	L9756-5G