Il intraluminale occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) modello è il modello più frequente tra i modelli sperimentali utilizzati ictus ischemico. Qui dimostrerà tutto il modello in dettaglio con la guida di flussimetria laser Doppler, ed i suoi risultati rappresentativi.
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Articolo metodologico
Intraluminali occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) Modello per l'ictus ischemico con la guida flussimetria laser Doppler in topi
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'ictus è la terza causa di morte e la principale causa di disabilità nel mondo, con un costo stimato di quasi 70 miliardi dollari negli Stati Uniti nel 2009 1,2. Il intraluminale occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) il modello è stato sviluppato da Koizumi 4 nel 1986 per simulare questa patologia di forte impatto umano nel ratto. Una modifica del metodo di MCAO è stato poi presentato dalla Longa 3. Entrambe le tecniche sono stati ampiamente utilizzati per identificare i meccanismi molecolari delle lesioni cerebrali da ictus ischemico e potenziali modalità terapeutiche 5. Questo metodo relativamente non invasivo nei ratti è stata estesa da utilizzare nei topi per sfruttare ceppi transgenici e knockout 6,7. Per modello di ischemia cerebrale focale, una sutura intraluminale è avanzato attraverso l'arteria carotide interna per occludere la base del MCA. Ritraendo la sutura dopo un determinato periodo di tempo imita riperfusione spontanea, ma la sutura può essere mantenuto in permanenza. Questo video sarà dimostrare i due principali approcci per l'esecuzione di intraluminale procedura MCAO nei topi in modo graduale, oltre a fornire spunti per potenziali svantaggi e le insidie. Il tessuto cerebrale ischemico sarà successivamente colorate con 2,3,5-trifeniltetrazolio cloruro (TTC) per valutare il grado di infarto cerebrale 8.
Protocollo
Questo protocollo è stato approvato dalla cura degli animali e utilizzo Comitato Istituzionale (IACUC) presso l'Università della Florida ed è conforme con il "Principio di prodotti per animali da laboratorio" (NIH pubblicazione n ° 86-23, riveduta 1985).
1. Materiale
- Animali: maschio topi C57BL / 6 (Laboratori di Harlan, Indianapolis, IN, USA) pesa 20-26 grammi al momento della chirurgia.
- Anestesia:
- Anestesia macchina: sistema di inalazione VetEquip anestesia (VetEquip Inc., Pleasanton, CA, USA).
- Inalazione anestetico: isoflurano (Farmaceutica Baxter, Deerfield, IL).
- Strumenti ch....
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Discussione
Il modello MCAO è un modello stabilito che replica ischemia cerebrale in specie murina. Questo modello è stato utilizzato nel ratto e successivamente adattato alle topi. Evitare craniectomia per eliminare l'influenza di manipolazione chirurgica sulla permeabilità della barriera emato-encefalica e della pressione intracranica è un vantaggio di questa tecnica. Tuttavia, molte variabili, come il ceppo differenze legate al 10, dimensioni della punta di sutura 11, durata dell'occlusione 6,<.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere alcun conflitto di interessi.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti | |
|---|---|---|---|---|
| Nome del reagente | Tipo | Azienda | Numero di catalogo | Commenti (opzionale) |
| Maschio C57BL / 6 topi | Animale | Laboratori di Harlan, Indianapolis, IN, USA | 20-26 gr | |
| Dissezione microscopio | Microscopio | Leica stereo microscopio MZ6 | 6.3:1 zoom | |
| Illuminatore in fibra ottica | Illuminatore | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1-150 | |
| Isoflurano | Anestesia | Farmaceutica Baxter, Deerfield, IL | 1001936060 | |
| SuperCut Iris forbice, diritto | Strumento chirurgico | Mondo Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14218 | |
| Vännäs micro-forbice, diritto | Strumento chirurgico | Mondo Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14003 | |
| Pinze punta Dumont multa | Strumento chirurgico | Mondo Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 503290 | |
| Clip nave | Strumento chirurgico | Mondo Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14120 | |
| Essiccatore ad alta frequenza 900 | Strumento chirurgico | Mondo Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500397 | |
| 7-0 sutura chirurgica nylon monofilamento | Sutura | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 1647G | Sutura per l'occlusione |
| 7-0 sutura chirurgica della Seta | Sutura | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 7733G | Sutura di legatura |
| Silicone RTV adesivo | Gomma siliconica | Mondo Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 1571 | |
| Vetbond | Tessuto adesivo | 3M Company, St. Paul, MN, USA | 70200746587 | |
| Puralube Vet Unguento | Occhio unguento | Pharmaderm, Melville, NY, USA | ||
| Buprenorfina hydrochlorode | Analgesici | Hospira Inc., Lake Forest, Illinois, USA | NDC 0409-2012-32 | |
| Cauterio unità termica | Mondo Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501292 | ||
| PeriFlux System 5000 | TCD flussimetria | Perimed, Stoccolma, Svezia | ||
| BAT-12 | Termometro rettale | Mondo Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12R | |
| T / POMPA, TP600 | Coperta termica | Gaymar, NY, USA | ||
| 2,3,5-trifeniltetrazolio cloruro | Reagente | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | T8877 | |
| I topi cervello matrice affettatrice | Cervello affettatrice | Zivic Miller-Lab. Inc., Allison Park, PA, USA | BSMAS001-1 |
Riferimenti
- Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders. Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).
- Lloyd-Jones, D.
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Ristampe e permessi
