Preparazione di un vaccino adiuvante a nanoemulsione

Abstract

Fonte: Zhang, Z. et al., Preparazione, caratteristiche, tossicità ed efficacia del vaccino tumorale in nanoemulsione autoassemblato nasale in vitro e in vivo.J. Vis. Exp. (2022)

Questo video dimostra la produzione di vaccini tumorali in nanoemulsione. I depositi stabili del serbatoio dell'olio che trasportano peptidi sintetici e adiuvanti sono prodotti mediante nanoemulsione a bassa energia, offrendo una promessa significativa per l'immunoterapia tumorale.

Protocollo

1. Preparazione dell'I-OVA NE

1. Mescolare 1 mg di monofosforil lipide A (MPLA) con 100 μL di dimetilsolfossido (DMSO), agitare per 5 minuti e lasciarlo riposare per 4 ore a temperatura ambiente (RT) per dissolverlo completamente.
2. Aggiungere quantitativamente Tween 80 e IKVAV-OVA_257-264 (I-OVA) e mescolare.
   nota: Tween 80 e I-OVA sono stati miscelati con un rapporto di massa di 25:1.
3. Aggiungere lo squalene al composto preparato al punto 1.2 (7:3, Smix: squalene).
4. Aggiungere 100 μl di soluzione di MPLA (10 mg/mL) alla miscela preparata al punto 1.3.
5. Preparare il vaccino in nanoemulsione utilizzando metodi di emulsione a bassa energia: aggiungere la soluzione miscelata alle goccioline d'acqua a circa il 70% del volume totale e mescolare delicatamente per ottenere una miscela trasparente e facilmente scorrevole.
   nota: Il controllo BNE (emulsione in bianco) è stato preparato con lo stesso metodo, sostituendo l'acqua con I-OVA.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Del MPLA	Invivogen Lett. Co.	tlrl-mpla
OAV257-264	Shanghai Botai Fornitore verificato - Biotecnologia Co., Ltd.	Na
Coniugazione di peptidi sintetici (I-OVA) di IKVAV-PA	Shanghai Botai Fornitore verificato - Biotecnologia Co., Ltd.	Na