Descriviamo i metodi per la registrazione su larga scala di più unità singole e potenziale del campo locale in roditori comportarsi con sonde di silicio. Unità di fabbricazione, l'attaccamento sonda l'unità e processi di impianto sonda sono illustrati in modo sufficientemente dettagliato per la replica facile.
È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Articolo metodologico
Su larga scala di registrazione dei neuroni da sonde mobili in silicio Comportarsi Roditori
In questo articolo
Sommario
Abstract
Una delle principali sfide nel campo delle neuroscienze è il collegamento comportamento per l'attività collettiva di gruppi neurali. Comprensione delle relazioni input-output dei neuroni e dei circuiti richiede metodi con la selettività spaziale e risoluzione temporale adeguata per l'analisi meccanicistica ensemble neurali del comportamento animale, la registrazione cioè di grandi campioni rappresentativo di isolati singoli neuroni. Ensemble monitoraggio dell'attività neuronale è progredita notevolmente negli ultimi dieci anni negli animali piccoli e grandi-cervello, tra cui soggetti umani 1-11. Più siti di registrazione con i dispositivi basati su silicio sono particolarmente efficaci a causa della loro scalabilità, volume piccolo e disegno geometrico.
Qui, descriviamo i metodi per la registrazione di molteplici singoli neuroni e le potenzialità in campo locale comportarsi roditori, utilizzando disponibili in commercio micro-lavorati sonde di silicio con misura componenti accessori. Ci sono due opzioni di base fo l'interfaccia sonde di silicio per preamplificatori: circuiti stampati e cavi flessibili. Le aziende fornitrici della sonda ( http://www.neuronexustech.com/ ; http://www.sbmicrosystems.com/ ; http://www.acreo.se/ ) di solito fornire il servizio di legame e fornire sonde legati ai circuiti stampati o cavi flessibili. Qui viene descritto l'impianto di un 4-gambo, 32-site sonda collegata al cavo flessibile poliimmide, e montato su un microdrive mobile. Ogni passo del preparato sonda, Microdrive costruzione e chirurgia è illustrata in modo che l'utente finale può facilmente replicare il processo.
Protocollo
1. Costruzione del Microdrive
Tutte le unità sono realizzati gli stessi elementi di base: una parte mobile, che porta l'elettrodo e una parte fissa, che viene ancorato al cranio. Un microdrive ideale permette liscia, ma abbastanza lunga corsa degli elettrodi in più a piccoli passi, è abbastanza robusto per evitare il movimento accidentale del dell'elettrodo, facile da manipolare da parte dello sperimentatore, senza interferire con il comportamento dell'animale, di piccole dimensioni e leggero nel peso. Come risultato di questi requisiti concorrenti, diversa bagno unità applicazioni diverse.
Solo 4 le....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Discussione
Questo film illustra la procedura di impianto di sonde di silicio per cronici su larga scala le registrazioni nel ratto comportarsi. Passaggi critici per garantire registrazioni di qualità di attività neuronale nascono dalla fragilità sia biologico (tessuto cerebrale) e tecnica (silicio sonda) dei materiali. Particolare attenzione dovrebbe essere presa durante la manipolazione della sonda per evitare il contatto di denti da remoto con qualsiasi superficie "dura" (per esempio, i gambi si rompono se uno di loro .......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Dichiarazioni
Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.
Ringraziamenti
Marie Curie Outgoing International Fellowship (dell'Unione europea FP/2007-2013 convenzioni di sovvenzione # 221834 e 254780), JD McDonnell Foundation, NSF sovvenzione SBE 0542013, National Institutes of Health di Grant NS034994, Istituto Nazionale di Salute Mentale di Grant MH5467 e la Howard Hughes Medical Institute (Janelia Farm Research Campus di sovvenzione).
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti | |
|---|---|---|---|---|
| Nome | Tipo | Azienda | Numero di catalogo | Comments |
| Silicon sonda Buzsaki32, 4 stinchi x 8 siti. Packaging: cavo flessibile in poliammide | Materiale | NeuroNexus | Sonda: buzsaki32 Packaging: HC32 | Registrazione della sonda |
| Vite di ottone rotonda, 00-90 x 1/2 Viti circolare di ottone | Materiale | JIMorris | R0090B500 | Unità parte |
| Dado Ottone Hex, 00-90 | Materiale | JIMorris | N0090B | Unità parte |
| Brass Strip C260, ASTM-B36 Spessore: 0.025 ", Lunghezza: 12", Larghezza: 1/2 " | Materiale | Parti piccole | B000FMYU72 | Unità parte |
| Connector Header, passo da 2 mm, male, singola riga, straigt, 36 posizioni | Materiale | Digikey | 2163S-36-ND | Unità parte |
| 2-parte Sylgard silicone elastomero | Materiale | Mondo Strumenti di precisione | SYLG184 | Per extra-isolare la sonda |
| Decon CONTRAD 70 Detergente Liquido | Reagente | Fisher Scientific | 04-355 Decon Laboratories No.: 1002 | Per pulire i siti di registrazione |
| Modulo di condizionamento Impedenza | Attrezzatura | FHC Inc. | 55-70-0 | Impedenza metro |
| niPOD - 32 canali | Attrezzatura | NeuroNexus | niPOD -32 | Impedenza metro |
| Grip Industrial Grade Cement | Materiale | Caulk Dentsply | 675571 (polvere) 675572 (solvente) | Grip cemento |
| 1,1 '-diottadecil-3, 3,3', 3'-tetramethylindocarbocyanine perclorato ('DII'; DiIC18 (3)) | Reagente | Invitrogen | D282 | Per colorare la traccia sonda nel cervello |
| Macchina a vite in acciaio inox, testa Binding, Drive intaglio, # 00-90, 1/8 " | Materiale | Parti piccole | MX-0090-02B | Terra e viti di riferimento |
| Magnet filo, 20G, rivestimento in nylon-poliuretano, MW80 | Materiale | Parti piccole | B000IJYRP2 | Terra e filo di riferimento |
| Macchina a vite in acciaio inox, responsabile Binding intaglio Drive, # 000-120, 1/16 " | Materiale | Parti piccole | MX-000120-01B | Viti di ancoraggio |
| N-3 All Liquid Flux scopo | Reagente | La-Co (Markal) | 23512 | Permette di saldare acciaio inossidabile |
| Microgrid Precision Expanded Rame | Materiale | Dexmet | 3 CU6-050 FA | Rete in rame per il testa a gabbia di Faraday |
| C & B-METABOND veloce! Cemento System - Dentin Activator | Materiale | Parkell | S380 | |
| C & B-METABOND veloce! Cemento System - cemento dentale | Materiale | Parkell | S380 | |
| Sharp punto l'ago di tungsteno e supporto | Strumento | Strumenti chirurgici Roboz | RS e RS-6064-6061 | Per rendere il gancio per sollevare la durata |
| Carbide Bur HP 1/4 | Strumento | Henry Schein | 9990013 | |
| Paraffina (granuli) | Materiale | Fisher Scientific | P31-500 | |
| Mineral Oil, Light (NF / FCC) | Materiale | Fisher Scientific | O121-1 | |
| GC ELECTRONICS 10-114 2-Part adesivo epossidico | Materiale | Newark | 00Z416 | |
| Tipo 1 LITZ 21 AWG 40/36 Red singolo Poliuretano-Nylon (MW80-C) A 0,041 "+ / -0,002" OD | Materiale | New England Wire Technologies Corporation | N28-36E-400-2 | Per rendere il cavo tra l'headstage e l'amplificatore |
| 32 canali Very Large Scale Integration headstage, 20x guadagno | Attrezzatura | Plexon | HST/32V-G20 | Headstage |
Riferimenti
- Buzsáki, G. High-frequency network oscillation in the hippocampus. Science. 256, 1025-1027 (1992).
- Wilson, M. A., McNaughton, B. L. Dynamics of the hippocampal ensemble code for space. Science. 261, 1055-1058 (1993).
- Buzsáki, G.
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Ristampe e permessi
