Al fine di comprendere i meccanismi cellulari e molecolari alla base neotissue formazione e lo sviluppo di stenosi in ingegneria tessutale valvole cardiache, è stato sviluppato un modello murino di trapianto di valvole cardiache eterotopico. Una valvola cardiaca polmonare è stato trapiantato al destinatario utilizzando la tecnica di trapianto di cuore eterotopico.
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Articolo metodologico
Il trapianto di valvola polmonare Utilizzando un modello murino di trapianto cardiaco eterotopico
In questo articolo
Sommario
Abstract
Valvole cardiache di ingegneria tessutale, valvole soprattutto decellularized, stanno iniziando a guadagnare slancio in uso clinico di chirurgia ricostruttiva con risultati alterni. Tuttavia, i meccanismi cellulari e molecolari dello sviluppo neotissue, ispessimento della valvola, e lo sviluppo stenosi non sono studiati estesamente. Per rispondere a queste domande, abbiamo sviluppato una valvola cardiaca modello murino di trapianto eterotopico. Una valvola cardiaca è stato raccolto da un topo donatore valvola e trapiantato in un topo donatore di cuore. Il cuore con una nuova valvola è stato trapiantato heterotopically ad un mouse destinatario. Il cuore trapiantato ha mostrato il proprio battito cardiaco, indipendente battito cardiaco del destinatario. Il flusso di sangue è stato quantificato usando un sistema a ultrasuoni ad alta frequenza con un Doppler pulsato. Il flusso attraverso la valvola polmonare impiantata mostrato flusso in avanti con rigurgito minimo e il picco di flusso era vicino a 100 mm / sec. Questo modello murino di trapianto di valvola cardiaca è highly versatile, in modo che possa essere modificato e adattato per fornire diversi ambienti emodinamici e / o può essere usato con vari topi transgenici per studiare lo sviluppo neotissue in una valvola cardiaca ingegneria tessutale.
Introduzione
Difetti cardiovascolari congenite sono una delle principali cause di mortalità infantile del 1,2 mondo occidentale. Tra questi, la stenosi valvolare polmonare e premolari difetti valvolari aortici sono una forma che si verificano di frequente 3. Intervento di sostituzione della valvola cardiaca è una scelta di routine di chirurgia ricostruttiva; Tuttavia, le complicanze, tra cui la stenosi e calcificazione della valvola cardiaca, e la dipendenza per tutta la vita su anticoagulanti sono una fonte significativa di malattie croniche e morte 4-7. Inoltre, la mancanza di potenziale di crescita richiede interventi di revisione, che aumenta ....
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Protocollo
Nota: Tutte le procedure sugli animali sono state approvate dalla Hospital Institutional Animal Care ed uso Comitato dei Bambini di Nationwide.
1. Polmonare valvola cardiaca raccolta da un donatore Valvola cardiaca mouse
- Sterilizzare in autoclave tutti gli strumenti chirurgici prima della chirurgia: 1x forbici sottili, 3x micro pinze, pinze vascolari micro 2x, 1x morsetto pinze applicano, porta-aghi micro 1x, forbici primavera 1x, 1x divaricatore.
- A 6-8 settimane di età femmina C57BL / 6 mouse viene utilizzato come donatore valvola cardiaca polmonare. Rimuovere il mouse dalla gabbia e si pesa, poi eutanasia con un coc....
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Risultati
La Figura 1 illustra gli schemi della valvola modello di trapianto di cuore con trapianto di cuore eterotopico. La valvola cardiaca è stato raccolto da un donatore e impiantato su un cuore da un secondo mouse donatore. Poi il cuore con la nuova valvola cardiaca è stato impiantato all'addome di un mouse destinatario. Figura 2 mostra una illustrazione del cuore impiantato nello spazio addominale (A), subito dopo trapianto cardiaco (B), e 5 minuti dopo.......
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Discussione
Il tasso di mortalità di questa procedura è vicino al 20%, che è stato causato principalmente da emorragia nel sito di trapianto PV e anastomosi sull'aorta donatore all'aorta addominale destinatario. Nella maggior parte dei casi, il tasso di mortalità diminuisce significativamente chirurgia 48 hr postale. I topi hanno mostrato di sopravvivenza cuore batte forte e il flusso di sangue attraverso il fotovoltaico impiantato. L'intero processo dura quattro ore per una micro chirurgo esperto. Ci vorranno circa 250.......
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Dichiarazioni
Non abbiamo nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto, in parte, da una sovvenzione del NIH (RO1 HL098228) per CKB.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| DPBS | Gibco | 14190-144 | |
| Microscopio | Leica | M80 | |
| C57BL/6J (H-2b), Femmina | Jackson Laboratories | 664 | 8-12 settimane |
| Iniezione di ketamina cloridrato | Hospira Inc. | NDC 0409-2053 | |
| Soluzione sterile di xilazina | Akorn Inc. | NADA# 139-236 | |
| Ketoprofene | Fort Dodge Salute degli animali | NDC 0856-4396-01 | |
| Ibuprofene | PrecisionDose | NDC 68094-494-59 | |
| Eparina | Sodio Sagent Pharmaceticals | NDC 25021-400 | |
| Soluzione salina (sterile 0,9% cloruro di sodio) | Hospira Inc. | NDC 0409-0138-22 | |
| Iniezione di cloruro di sodio allo 0,9% | Hospira Inc. | NDC 0409-4888-10 | |
| Unguento oftalmico petrolato | Dechra Prodotti veterinari | NDC 17033-211-38 | |
| Pastiglie per la preparazione dello iodio | Triad Disposables, Inc. | NDC 50730-3201-1 | |
| Tamponi per la preparazione dell'alcol | McKesson Corp. | NDC 68599-5805-1 | |
| Applicatori con punta in cotone | Fisher Sientific | 23-400-118 | |
| Forbice fine | FST | 14028-10 | |
| Forcipe Micro-Adson FST | 11018-12 | ||
| Pinza per applicazione morsetto | FST | 00072-14 | |
| S & T Morsetto Vascolare | FST | 00396-01 | |
| Forbici a molla | FST | 15008-08 | |
| Divaricatori Colibri | FST | 17000-04 | |
| Dumont #5 Pinza | FST | 11251-20 | |
| Dumont #7 - Pinza fine | FST | 11274-20 | |
| Dumont #5/45 Pinza | FST | 11251-35 | |
| Tish Porta aghi / Pinze | Micrins | MI1540 | |
| Sutura monofilamento in poliammide nera, 10-0 | AROSurgical Instruments Corporation | TI638402 | Per suturare l'innesto |
| Sutura monofilamento in poliammide nera, 6-0 | AROSurgical Instruments | SN-1956 | Per la muscolatura e la chiusura della pelle |
| Spugne non tessute | McKesson Corp. | 94442000 | |
| Emostatico assorbibile | Ethicon | 1961 | |
| Siringa da 1 ml | BD | 309659 | |
| Siringa da 3 ml | BD | 309657 | |
| Siringa da 10 ml | BD | 309604 | |
| 18 G 1 1/2 pollici, Ago | BD | 305190 | |
| 25 G 1 pollici, Ago | BD | 305125 | |
| 30 G 1 pollici, Ago | BD | 305106 | |
| Ricircolatore d'acqua calda | Gaymar | TP-700 | |
| Cuscinetto riscaldante | Gaymar | TP-22G | |
| Trimmer | Wahl | 9854-500 | |
| VEVO2100 Ultrasuoni ad alta frequenza | VisualSonics | http://www.visualsonics.com/vevo2100 | Il numero di catalogo e il prezzo possono essere acquistati dai rappresentanti di vendita. |
| gel per trasmissione di ultrasuoni | Parker Laboratories, INC. | 01-02 | |
| Sistema di anestesia animale da laboratorio da tavolo | VetEquip, INC. | ||
| Isoflurano | Baxter | 1001936060 |
Riferimenti
- Polito, A., et al. Increased morbidity and mortality in very preterm VLBW infants with congenital heart disease. Intens Care Med. 39, 1104-1112 (2013).
- Wren, C., Reinhardt, Z., Khawaja, K. Twenty year trends in diagn....
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Ristampe e permessi
