Il modello sperimentale di emorragia subaracnoidea (SAH) con shunt sanguigno controllato a pressione intracranica nel coniglio combina le procedure standard: incannulamento dell'arteria succlavia e puntura transcutanea della cisterna magna, che consente di imitare da vicino le condizioni fisiopatologiche umane dopo SAH. Presentiamo istruzioni dettagliate e discutiamo i punti chirurgici chiave per una creazione sperimentale di SAH di successo.
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Articolo metodologico
Il Coniglio Blood-shunt modello per lo studio di acuta e sequele tardive di emorragia subaracnoidea: Aspetti tecnici
In questo articolo
Sommario
Abstract
Lesione cerebrale precoce e ritardata vasospasmo cerebrale entrambi contribuiscono a risultati sfavorevoli dopo emorragia subaracnoidea (SAH). Modelli animali riproducibili e controllabili che simulano entrambe le condizioni sono al momento raro. Pertanto, sono necessari nuovi modelli, al fine di mimare condizioni fisiopatologiche umani derivanti da SAH.
Questo rapporto descrive le sfumature tecniche di un sangue-shunt modello SAH coniglio che consente il controllo della pressione intracerebrale (ICP). Un shunt extracorporea è posto tra il sistema arterioso e lo spazio subaracnoideo, che consente esaminatore indipendente SAH in un cranio chiuso. Step-by-step istruzioni procedurali e le attrezzature necessarie sono descritte, così come considerazioni tecniche per produrre il modello con mortalità minima e morbilità. Dettagli importanti necessarie per la riuscita creazione chirurgica di questo modello SAH coniglio robusto, semplice e coerente ICP-controllato sono descritti.
Introduzione
Emorragia subaracnoidea aneurismatica (SAH) è uno dei più in pericolo di vita condizioni neuropatologici, spesso portando a danni neurologici permanenti o la morte 1. Precedenti ricerche si è concentrata sul vasospasmo cerebrale ritardata (DCVS) come l'eziologia primaria di deficit neurologici associati con SAH 2. Tuttavia, generalmente i poveri risultati clinici di pazienti affetti da emorragia subaracnoidea dopo il trattamento del vasospasmo ha portato ad un ampliamento del centro di ricerca per includere gli effetti della lesione cerebrale precoce (EBI) dopo SAH 3. Maggiore comprensione del significato di entrambi EBI e DCVS ne....
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Protocollo
Tre mesi di età femminile conigli New Zealand che pesano 2,5-3,5 kg sono stati utilizzati per questa procedura. Lo studio è stato eseguito in conformità con il National Institutes of linee guida sanitarie per la cura e l'uso di animali da esperimento e con l'approvazione del Comitato del Cantone di Berna, Svizzera (approvazione N ° 105/13) Animal Care. Tutte le procedure chirurgiche sono state eseguite in condizioni sterili presso l'Istituto Sperimentale Chirurgica del Dipartimento di Ricerca Clinica presso l'Università di Berna Hospital di Berna, in Svizzera. Un anestesista veterinario monitorato gli animali durante l'intervento chirurgico e dura....
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Risultati
Il modello di shunt sangue di coniglio di SAH descritto in questo rapporto produce EBI nell'ippocampo (Figura 2A, B), la corteccia basale (Figura 2A, B), e la vascolarizzazione cerebrale (Figura 2C) già a partire 24 ore dopo l'infortunio e mostra una caratteristica distribuzione del sangue (Figura 2D) 8. Inoltre, il modello attiva da moderata a grave gradi di DCVS in tre giorni dopo SAH induzione (Figura 3) 10. Il .......
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Discussione
Il modello di shunt produce patologia simile a quello osservato negli esseri umani dopo SAH acuta 3,8,10. E 'stato suggerito che EBI può esacerbare, mantenere e persino scatenare DCVS 12, e come tale questo modello può essere di aiuto nelle indagini sia nella fase DCVS precoce e tardiva, tra cui EBI e DCVS interazioni seguenti SAH. In particolare, ripetibile in vivo DCVS tecniche di monitoraggio, compresi i DSA 13, tomografia computerizzata angiografia 14, e Doppl.......
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Dichiarazioni
Nessuno. Gli autori non hanno alcun interesse finanziario o commerciale in nessuno dei farmaci, materiali o attrezzature utilizzate. Non sono stati ricevuti finanziamenti specifici per questo lavoro. Gli autori sono gli unici responsabili della progettazione e della conduzione dello studio presentato e non riportano alcun conflitto di interessi riguardo ai materiali e ai metodi utilizzati in questo studio o ai risultati specificati nell'articolo. Confermano l'aderenza agli standard etici. Lo studio è stato condotto in conformità con le linee guida del National Institutes of Health per la cura e l'uso degli animali da esperimento e con l'approvazione del Comitato per la cura degli animali del Cantone di Berna, Svizzera (approvazione #109/07 e #107/09).
Ringraziamenti
Gli autori ringraziano Laurie von Melchner, Bern University Hospital, Dipartimento di Neurochirurgia, Berna, in Svizzera, per la revisione e la modifica del manoscritto e Paskus Geremia, Hospital di Boston per bambini, Boston, MA per la correzione della bozza iniziale. Apprezziamo la gestione sapiente di cura degli animali, anestesia e assistenza operativa da Daniel Mettler, DVM, Max Müller, DVM, Daniel Zalokar, e Olgica Beslac, Experimental Surgical Institute, Dipartimento di Ricerca Clinica, Università di Berna, Berna, Svizzera. Ringraziamo Michael Lensch, Responsabile Ricerca Infermiere, Dipartimento di Terapia Intensiva, Università di Berna Hospital e Università ....
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Attrezzatura | |||
| Microscopio operatorio | Zeiss, Jena, Germania | Zeiss, OPMI-MD | |
| microscopio operatorio Attrezzatura chirurgica | B. Braun, Germania | Pinze mediche n. 5; forbici per vasi 8 cm; microclip 4 mm | |
| Respiratore | Hugo Sachs | ||
| Tagliacapelli | 3M Surgical Clipper | Starter Kit 9667A | |
| Piastra calda corporea | FHC | ||
| Analizzatore di gas ematici | Radiometro, Copenaghen, Danimarca | ABL 725 | |
| Monitoraggio cardiaco | Monitor multiparametrico Camino, Integra, Plainsboro, NJ, US | AP-05 | |
| Analisi software | BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USA | Biopac MP100 e software acqKnowledge, versione 3.8.1 | |
| Analisi del software | ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA | Versione Image-Pro Plus | |
| Apparecchio per angiografia | DFP 2000 A-Toshiba | MIIXR0001EAA | |
| monitor ICP | Camino Laboratories, San Diego, CA, USA | Monitor ICP, Modello 110-4B | |
| Monitor di flusso sanguigno | Oxford Optronix Ltd., Oxford, Regno Unito | Soluzione di microsfere KIT | |
| CAL Sonde ad ago sottile per flussimetria laser Doppler | Oxford Optronix Ltd., Oxford, Regno Unito | MNP110XP, diametro 0,48 mm | |
| Tubo a pressione | B. Braun, Germay | PE 1,0 mm & volte; 2,0 mm | |
| Monitor per anestesia | GE Medical Systems, Svizzera | Datex S5 | |
| Monitor 20 | |||
| G | Catetere endovenoso Smiths Medical | Jelco, REF 4057 | |
| Catetere venoso centrale a tre lumi da 5,5 F | Connettori, Tagelswangen, Svizzera | Catetere in silicone STH-C040 | |
| ago da 22 G x 40 mm. | Emergo Group Inc., Paesi Bassi | ||
| Microtrapano ad alta velocità | Stryker, Soletta, Svizzera | 5400-15 | |
| Cera d'osso | Ethicon, Johnson & Johnson, NJ, USA | ETHW31G | |
| Forcipe bipolare | Aesculap, Inc., PA, Stati Uniti | US349SP | |
| Ketamin | Qualsiasi prodotto generico | ||
| Xilazina | Qualsiasi prodotto generico | ||
| Buprenorfina | Qualsiasi prodotto generico | ||
| Fentanyl | Qualsiasi prodotto | ||
| generico Cerotti transdermici alla matrice di fentanil | Qualsiasi prodotto generico | ||
| Lidocaina 1% | Qualsiasi prodotto generico | ||
| 4% papaverin HCl | Qualsiasi prodotto generico | ||
| Neomicina solfato | Research Organics Inc., OH, USA | Qualsiasi prodotto generico | |
| Povidone-iodio | Qualsiasi prodotto generico | ||
| 0,9% cloruro di | Qualsiasi prodotto generico | ||
| Iopamidolo | Abott Laboratories, IL, USA | Qualsiasi prodotto generico | |
| Sutura riassorbibile 3-0 | Ethicon Inc., USA | Sutura VCP824G | |
| 5-0 non assorbibile | Ethicon Inc., USA | Suture in polifilamento 8618G | |
| 4-0 | Ethicon Inc., USA | VCP284G |
Riferimenti
- Taylor, T. N., et al. Lifetime cost of stroke in the United States. Stroke; a journal of cerebral circulation. 27, 1459-1466 (1996).
- Kikkawa, Y., Kameda, K., Hirano, M., Sasaki, T., Hirano, K.
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Ristampe e permessi
Tag
Modello di emorragia subaracnoideaControllo della pressione intracranicaCannulazione dell arteria succlaviaAngiografia a sottrazione digitalePosizionamento della sonda di neuromonitoraggioAgo per accesso spinaleMonitoraggio del flusso ematico cerebraleLesione cerebrale precoceVasospasmo cerebrale ritardato
