L'innesto di grasso è una tecnica essenziale per ricostruire i deficit dei tessuti molli. Tuttavia, rimane una procedura imprevedibile caratterizzata da una sopravvivenza variabile del trapianto. Il nostro obiettivo era quello di ideare un modello murino che utilizzasse un nuovo metodo di imaging per confrontare la ritenzione del volume tra diverse tecniche di preparazione e somministrazione dell'innesto di grasso.
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Articolo metodologico
Valutazione della solidità del grasso umano iniezione in topi nudi con Micro-Tomografia Computerizzata
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Lipotransfer è uno strumento essenziale nella armamentarium del chirurgo per il trattamento di deficit dei tessuti molli in tutto il corpo. Il grasso è il filler dei tessuti molli ideale in quanto è facilmente disponibile, facilmente ottenuto, poco costoso, e intrinsecamente biocompatibile. 1 Tuttavia, nonostante la sua popolarità crescente, innesto di grasso è ostacolato da risultati imprevedibili e la sopravvivenza del trapianto variabili, con tassi di ritenzione pubblicati che vanno da 10 -80%. 1-3
Per facilitare le indagini sulle innesto di grasso, abbiamo quindi sviluppato un modello animale che consente l'analisi in tempo reale di ritenzione del volume iniettato grasso. Brevemente, un piccolo taglio nel cuoio capelluto di un CD-1 topo nudo e 200-400 ml di lipoaspirato trasformati è disposto sopra il cranio. Il cuoio capelluto viene scelta come sito ricevente causa della sua mancanza di grasso sottocutaneo nativa, e per l'eccellente contrasto sfondo fornito dal cranica, che aiuta nellail processo di analisi. Tomografia Micro-computerizzata (micro-CT) viene utilizzato per eseguire la scansione l'innesto al basale e successivamente ogni due settimane. Le immagini TC sono ricostruite, e un software di imaging è utilizzato per quantificare i volumi di innesto.
Tradizionalmente, le tecniche per valutare il volume del trapianto di grasso hanno reso necessaria l'eutanasia dell'animale studio per fornire una sola valutazione del peso del trapianto e volume misurazione fisica ex vivo. Confronti biochimici e istologici hanno altresì richiesto l'animale studio per essere eutanasia. Questa tecnica di imaging descritta offre il vantaggio di visualizzazione e la quantificazione oggettiva volume a più punti di tempo dopo l'innesto iniziale senza dover sacrificare l'animale studio. La tecnica è limitata dalla dimensione dell'innesto grado di essere iniettato come pelle grandi innesti rischio e necrosi grassi. Questo metodo ha utility per tutti gli studi che valutano fattibilità del trapianto di grasso e la ritenzione del volume. E 'particolarmente adatto per providing una rappresentazione visiva di innesti di grasso e dopo cambiamenti di volume nel tempo.
Introduzione
I difetti dei tessuti molli derivano da una varietà di cause tra cui traumi, resezione tumorale, invecchiamento e anomalie congenite. Possono essere debilitanti per i pazienti e rappresentano uno dei problemi più comuni, ma impegnativi, per i chirurghi ricostruttivi. Esistono molti metodi per affrontare le carenze dei tessuti molli, come lembi locali e liberi, iniezioni di collagene e filler sintetici. Tuttavia, dal suo primo utilizzo documentato da parte di Neuber nel 18931, il trasferimento di grasso autologo rimane il gold standard per la riparazione dei deficit dei tessuti molli, poiché è pronto per la raccolta, facile e sicuro da raccogliere....
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Protocollo
NOTA: i protocolli sperimentali e moduli per il consenso dei pazienti per ottenere il grasso sono stati esaminati e approvati dal Stanford University Institutional Review Board (Protocol # 2188). Tutte le procedure di animali sono state approvate dal Pannello di Amministrazione Stanford on Laboratory Animal Care (APLAC) ai sensi del protocollo # 9999. Tutti gli esperimenti sono stati condotti con il rispetto rigoroso di sicurezza degli animali e le linee guida per la cura umane.
1. Fat raccolta
- Utilizzando la procedura Coleman 17-19, ottenere tessuto adiposo umano dalle addome, fianchi, e / o regioni coscia di pazien....
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Risultati
Innesti Fat progressivamente diminuite in volume nel corso di studio, conseguente 62,2% di sopravvivenza media di Week 8. (Figura 4A) 24 Al completamento della scansione Settimana 8, ogni innesto grasso è stato estratto in un unico pezzo. Un test della somma dei ranghi Wilcoxan è stato utilizzato per confrontare la differenza tra le misure di volume di innesti di grasso ottenuti da una micro-CT o calcolati dalla massa fisica. Nessuna differenza significativa è stata trovata tra i due metodi <.......
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Discussione
Fino a questo punto, la maggior parte dei ricercatori si sono basati sulle modalità non-imaging per quantificare la sopravvivenza a lungo termine degli innesti di grasso, ma questi metodi richiedono il sacrificio dell'animale studio e produrre soltanto una singola misura. 3,10-12 Il nostro studio rappresenta un metodo di analisi che consente una migliore obiettivo, in tempo reale quantificazione della sopravvivenza del trapianto di grasso in un modello murino.
Critical in ques.......
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Dichiarazioni
Nessuno degli autori ha alcun interesse finanziario concorrente da segnalare.
Ringraziamenti
Questo studio è stato sostenuto dalla Fondazione Oak, il Laboratorio Hagey Pediatrica Medicina Rigenerativa, e il National Institute of Health, Grants NIHR21DE019274, NIHR01DE019434, NIHR01DE021683, e NIHU01HL099776 di MTLDCW è stato sostenuto dalla ACS Franklin H. Martin Faculty Research Fellowship, il Hagey Laboratorio per Pediatrica Medicina Rigenerativa, e la Stanford University Child Health Research Institute Faculty Scholar Award. Micro-CT è stato condotto presso il Centro di Stanford per l'Innovazione in imaging in vivo.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Centrifuga lipoaspirato | |||
| Beckman Coulter, Inc., Pasadena, CA | |||
| Provette coniche da 50 ml | BD Biosciences, San Jose, CA | ||
| CD-1 topi nudi (Crl:CD1-Foxn1nu) | Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, MA | ||
| Isoflurano | Henry Schein, Dublino, OH | ||
| 2,5% Betadine | Purdue Pharma, LP, Stamford, CT | ||
| Soluzione di etanolo al 70% | Gold Shield, Hayward, CA | ||
| Siringa luer-lock da 1 cc | BD Biosciences, San Jose, CA | ||
| Cannula calibro 14 | Shippert Medical, Centennial, CO | ||
| Forceps | Fine Science Tools, Heidelberg, Germania | ||
| Forbici per tenotomia | Fine Science Tools, Heidelberg, Germania | ||
| Sutura in nylon 6-0 | Ethicon, cenere blu, soluzione | ||
| Gibco, Carlsbad, scanner | |||
| Siemens Healthcare, Pleasanton, CA | |||
| Phantom | TriFoil Imaging, Northridge, CA | ||
| Software di analisi di imaging | IRW, Siemens Healthcare, Pleasanton, CA | ||
| Scale | Mettler-Toledo International, Inc., Columbus, OH |
Riferimenti
- Gir, P., et al. Fat grafting: evidence-based review on autologous fat harvesting, processing, reinjection, and storage. Plast Reconstr Surg. 130 (1), 249-258 (2012).
- Kaufman, M. R., et al.
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Ristampe e permessi
