Un modello murino di irreversibile e reversibile unilaterale Ureteric Ostruzione

Sommario

Il modello murino di ostruzione ureterale unilaterale irreversibile (UUO) viene presentato insieme al modello di UUO reversibile in cui l'ostruzione ureterale viene alleviata dall'anastomosi dell'uretere reciso nella vescica. Questi modelli consentono lo studio dell'infiammazione renale e delle cicatrici, nonché del rimodellamento dei tessuti.

Abstract

L'ostruzione del rene può interessare i reni nativi o trapiantati e provoca lesioni renali e cicatrici. Qui viene presentato un modello di nefropatia ostruttiva indotta da ostruzione ureterale unilaterale (UUO), che può essere irreversibile (UUO) o reversibile (R-UUO). Nel modello UUO irreversibile, l'uretere può essere ostruito per periodi di tempo variabili al fine di indurre un'infiammazione renale sempre più grave e cicatrici fibrotiche interstiziali. Nel modello reversibile R-UUO l'uretere è ostruito per indurre idronefrosi, dilatazione tubulare e infiammazione. Dopo un adeguato periodo di tempo, l'ostruzione ureterale viene quindi invertita chirurgicamente mediante anastomosi dell'uretere precedentemente ostruito alla vescica al fine di consentire la completa decompressione del rene e il ripristino del flusso urinario alla vescica. Il modello UUO irreversibile è stato utilizzato per studiare vari aspetti dell'infiammazione e della cicatrizzazione renale, tra cui la patogenesi della malattia e la sperimentazione di potenziali terapie antinfiammatorie o antifibrotiche. Il modello più impegnativo di R-UUO è stato utilizzato da alcuni ricercatori e offre un significativo potenziale di ricerca in quanto consente lo studio dei processi infiammatori e immunitari e del rimodellamento dei tessuti in un rene danneggiato e cicatrizzato dopo la rimozione dello stimolo dannoso. Di conseguenza, il modello R-UUO offre ai ricercatori l'opportunità di esplorare la risoluzione dell'infiammazione renale insieme agli aspetti chiave della riparazione tissutale. Questi modelli sperimentali sono rilevanti per la malattia umana in quanto i pazienti spesso presentano un'ostruzione del tratto renale che richiede la decompressione e sono comunemente lasciati con una significativa compromissione renale residua che non ha opzioni di trattamento attuali e può portare a un'eventuale insufficienza renale allo stadio terminale.

Introduzione

L'obiettivo generale del modello sperimentale qui descritto è quello di indurre la nefropatia ostruttiva mediante ostruzione ureterale unilaterale (UUO), che può essere irreversibile (UUO) o reversibile (R-UUO). Viene presentato un modello semplice e irreversibile di UUO in cui l'uretere sinistro è ostruito in modo permanente dalla legatura con una sutura o dall'applicazione di una clip di legatura. Ciò si traduce in una marcata dilatazione dell'uretere insieme a una riduzione del flusso sanguigno renale e della filtrazione glomerulare. L'istologia renale mostra dilatazione tubulare e infiammazione renale interstiziale e fibrosi sempre più gravi. L'UUO irreversibile ....

Protocollo

Guida Generale: Gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in conformità con le linee guida e regolamenti imposti dagli Animali (Procedure Scientifiche) Act 1986. Questo protocollo e il protocollo video che accompagna sono sia un UUO standard e un R-UUO, che può essere eseguita su molti ceppi di topi. Nel video che accompagna, entrambe le procedure sono effettuate su maschi C57BL / 6 topi di età compresa tra 8 settimane. I dati presentati nella sezione risultati rappresentativi sono stati ottenuti da maschi FVB / n topi.

NOTA: Questo protocollo e accompagnamento dettagli video come eseguire un UUO standard R-UUO utilizzando dell....

Risultati

L'aspetto delle modifiche renali marcatamente seguente ostruzione degli ureteri e diventa pallido e teso alla palpazione con il tempo (Figura 1). Vi è una crescente dilatazione dell'uretere prossimale all'ostruzione e pelvi renale. Il rene diventa sempre atrofica come la durata della nefropatia ostruttiva aumenta con ostruzione prolungata con conseguente notevole assottigliamento della corteccia renale e midollare. Dopo l'inversione di ostruzione ureterale, il colore del rene diventa più.......

Discussione

L'ostruzione del rene può interessare i reni nativi o trapiantati e provoca lesioni renali e cicatrici. Il modello R-UUO è rilevante per la malattia umana in quanto i pazienti spesso presentano un'ostruzione del tratto renale secondaria a ipertrofia prostatica, valvole uretrali posteriori, ecc. che richiede la decompressione con pazienti comunemente lasciati con una significativa compromissione renale residua che non ha opzioni di trattamento attuali e può eventualmente portare a malattia renale allo stadio terminale.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Forbici da dissezione smussate	Fine Science Tools	14072-10
Forbici a molla - dritte	Fine Science Tools	15000-10
Pinze dentate	Fine Science Tools	11021-12
Pinze angolate x 2	Fine Science Tools	00649-11
Pinze dritte	Fine Science Tools	00632-11
Divaricatore a filo Colibri da 3 cm	Fine Science Tools	17000-03
Porta aghi Castroviejo con blocco	Fine Science Tools	12565-14
Applicatore di clip per ferite	Fine Science Tools	12031-07
Clip per ferite da 7 mm	Fine Science Tools	12032-07
Porta aghi micro Castroviejo con blocco	Fine Science Tools	12060-01
Microscopio OPMI pico	Carl Zeiss	S100
Pad elettronico termico	Cozee Comfort	n/a
6/O sutura intrecciata in seta	Harvard Apparatus	72-3287
9/O Sutura Dafilon (poliammide)	B-Braun	G1111434
5/O sutura in seta intrecciata	Harvard Apparatus	51-7680
Ago smussato regolare, 1 pollice, 21G	Becton, Dickinson and Company	305175
1 ml punta antiscivolo	Becton, Dickinson and Company	300184
Tamponi di carta Wypall	Kimberley-Clark	L40	Sterilised (Autoclave)
Cotton fioc	Johnson and Johnson	n/a	Sterilised (Autoclave)
Tende semplici	Guardian	CB03	Sterilizzato (Autoclave)
Tubo in gomma siliconica			Tubo in silicone - diametro interno 1,0 mm; diametro esterno 2,0 mm; spessore della parete 0,6 mm
(Lacri-Lube) Paraffina morbida bianca 57,3%, olio minerale 42,5% e alcoli di lanolina 0,2%	Allergan Ltd	21956GB10X
(Videne) Iodio povidone 10%	Ecolab Ltd	PL 04509/0041
(Vetalar V) Ketamina cloridrato	Pfizer Animal Health	Vm 42058/4165	100mg/ml soluzione
(Domitor) Medetomidina cloridrato	Orion Pharma	Vm 06043/4003	1mg/ml
(Vetergesic) Bupernorfina cloridrato	Alsto Animal Health	Vm 00063/4002	0,3mg/ml
(Antisedan) Atipamezolo idrocorride	Orion Pharma	Vm 06043/4004	5mg/ml
(Adept) 4% Icodestrina	Baxter		Soluzione di riduzione dell'adesione
NaCl 0,9%	Baxter	FKE1323

siringa da a parete morbida