Articolo metodologico
Questo protocollo mira ad alleviare la limitazione dello scarso attecchimento cellulare per il trattamento con cellule staminali degli infarti del miocardio attraverso l'uso di un sistema di idrogel e di una colla a base di fibrina. Con questo approccio, il contatto cellula-tessuto dopo l'infarto può essere mantenuto, aumentando il potenziale terapeutico degli agenti benefici nel sito della lesione.
Il modello murino MI è ampiamente riconosciuto nel campo delle malattie cardiovascolari ed è stato costantemente utilizzato come primo passo per testare l'efficacia dei trattamenti in vivo1. Il protocollo tradizionale e consolidato è stato ulteriormente perfezionato per ridurre al minimo i danni all'animale. In particolare, gli strati muscolari pettorali vengono allontanati piuttosto che semplicemente tagliati e la toracotomia viene affrontata intercostalmente invece di rompere le costole in una sternotomia, preservando l'integrità della gabbia toracica. Con questi cambiamenti, lo stress complessivo sull'animale diminuisce.
Le terapie con cellule staminali volte ad alleviare i danni causati dagli infarto miocardico si sono dimostrate promettenti nel corso degli anni per i loro benefici pro-angiogenici e anti-apoptotici. Gli attuali approcci di consegna delle cellule sulla superficie del cuore prevedono tipicamente l'iniezione delle cellule vicino al sito danneggiato, all'interno di un'arteria coronaria o nel flusso sanguigno periferico2-4. Sebbene le cellule abbiano dimostrato di ospitare il miocardio danneggiato, la funzionalità è limitata dal loro scarso attecchimento nel sito della lesione, con conseguente diffusione nel flusso sanguigno5. Questo manoscritto evidenzia una procedura che supera questo ostacolo con l'uso di un cerotto idrogel incapsulato con cellule. Il cerotto viene fabbricato prima della procedura chirurgica e viene posizionato sul miocardio lesionato immediatamente dopo l'occlusione dell'arteria coronaria sinistra. Per far aderire il cerotto in posizione, la colla di fibrina esterna biocompatibile viene posizionata direttamente sopra il cerotto, consentendone l'asciugatura sia sul cerotto che sulla superficie del cuore. Questo approccio fornisce un nuovo metodo di adesione per l'applicazione di un delicato costrutto terapeutico di incapsulamento cellulare.
Un infarto del miocardio (MI) è definito come l'interruzione di sangue ad una regione del cuore causata dalla occlusione di un'arteria coronaria. Il danno derivante da un MI è dovuto al rimodellamento del tessuto cardiaco vitale in tessuto cicatriziale non funzionale, che diminuisce la capacità del cuore o, più specificamente, il ventricolo sinistro, per battere correttamente. Ciò si traduce in una diminuzione del volume di sangue che può essere consegnato al corpo ad ogni battito cardiaco, chiamata volume ictus, e la percentuale di sangue che viene pompato dal cuore ad ogni battito cardiaco, noto come frazione di eiezione 6. Questi, insieme ad alt....
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La procedura è in piena compatibilità con numero di protocollo IACUC 13302 ed è stato approvato dalla divisione delle risorse animali.
1. Strumento Preparazione
2. Hydrogel Preparazione
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Durante la procedura chirurgica, legatura dell'arteria coronarica sinistra può essere identificato da un marcato blanching valle dell'arteria occlusa. Come test prima di sposarsi, la sutura può essere stretto per breve tempo per verificare se è in un luogo adeguato. Inoltre, poiché occlusione delle arterie risultati in diminuzione quasi istantanea nella capacità dell'atrio sinistro per battere correttamente, l'atrio sinistro si allargherà in risposta ad un riflusso di sangue nel sistema.
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Con questo approccio al modello MI murino, abbiamo sviluppato un sistema che riduce al minimo il danno alle zone non miocardio che sono associati con altre tecniche MI murine. Queste aree includono danni causati da tracheostomia, il taglio dello strato muscolare, e la rottura delle nervature per esporre la cavità toracica. Crediamo che questi cambiamenti migliorare le generali chirurgici risultato grazie alla cura di mantenere il più delle grandi strutture, compres.......
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Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.
Questo lavoro è stato finanziato dal US Army Grant (W81XWH-08-1-0701) e una borsa di studio da Carle Foundation Hospital.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Ventilatore per topi Harvard Model 687 | Apparecchio Harvard | 55-0001 | |
| Inintech Biosciences LLC Sterilizzatore per perline di vetro secco | Fisher Scientific | NC9531961 | |
| Microscopio operatorio Leica MZ6 | |||
| Gemini | GEM 5917 | ||
| Pinze delicate - Punte da 0,4 mm Strumenti angolati | le scienze fini | 11063-07 | |
| Divaricatore Agricola - 3,5 cm Spread | Fine Science Tools | 17005-04 | |
| Forbici a molla - Lame da 2,5 mm Dritte | Fine Science Tools | 15000-08 | |
| Castroviejo Portaaghi - con blocco Carburo di tungsteno 14 cm | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| Forbici Iris - Delicate Dritte 10,5 cm | Fine Science Tools | 14060-10 | |
| Sutura monofilamento 8-0 | Ethicon | 8730P | |
| 6-0 Sutura seta | Ethicon | 639G | |
| Trombina | Sigma | T7009 | |
| Fibrinogeno | Sigma | F3879 | |
| Adesivo tissutale Vetbond | 3M | 1469SB |
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