Tutta vitreo Umore dissezione per l&#39;analisi Vitreodynamic

Karthik Murali; Amir H. Kashani; Mark S. Humayun

doi:10.3791/52759

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Articolo metodologico

Tutta vitreo Umore dissezione per l'analisi Vitreodynamic

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DOI:

10.3791/52759

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24 maggio 2015

Karthik Murali¹ , Amir H. Kashani² , Mark S. Humayun¹

¹Biomedical Engineering, University of Southern California, ²Ophthalmology, University of Southern California

In questo articolo

Sommario

L'obiettivo di questo protocollo è mostrare una tecnica efficace per isolare il nucleo vitreo intero e intatto e la corteccia da occhi suini enucleati post mortem.

Abstract

Gli autori propongono una tecnica efficace per isolare il nucleo vitreo intero e intatto e la corteccia da occhi suini enucleati post mortem. Sebbene studi precedenti abbiano mostrato i risultati di tali dissezioni, i passaggi dettagliati non sono stati descritti, precludendo ai ricercatori al di fuori del campo di replicare i loro metodi. Altri studi prelevano il vitreo attraverso l'aspirazione, che non mantiene l'anatomia della struttura vitreale, o attraverso la dissezione parziale, che isola solo il nucleo vitreo. Il metodo proposto isola l'intero corpo vitreo, con il nucleo vitreo e la corteccia intatti, mantenendo l'anatomia vitreale e l'integrità strutturale. In questo metodo, viene prima creato un lembo sclerale a tutto spessore in un occhio suino enucleato e attraverso questo il tessuto coroide può essere separato dalla sclera. Il lembo sclerale viene quindi espanso e la coroide viene completamente separata dalla sclera. Infine, il tessuto coroideo-retina viene staccato dal vitreo per lasciare un corpo vitreo isolato intatto. La tecnica di dissezione del vitreo proposta può essere utilizzata per studiare le proprietà fisiche dell'umor vitreo. In particolare, questo metodo ha importanza per gli studi sperimentali che coinvolgono la somministrazione di farmaci, il trasporto di ossigeno vitreo-retinico e la convezione intraoculare.

Introduzione

L'obiettivo di questo metodo consiste nel dettaglio una tecnica per isolare un intero, corpo vitreo intatto, con il nucleo vitreo e corteccia intatta, da un occhio di cadavere, ai fini dell'analisi vitreodynamic. Poiché il campo della fisiologia del vitreo è cresciuta, i ricercatori multidisciplinari, quali la meccanica dei fluidi ricercatori, stanno studiando le proprietà fisiche e biomeccaniche del corpo vitreo ^1. A tal fine, è indispensabile dettaglio una tecnica per isolare tutto, corpo vitreo intatta per favorire ricercatori multidisciplinari.

Sebag et al. ² e altri ³ eseguiti eleganti intere dissezioni vetrose sugli occhi cadavere dell'uomo e hanno mostrato le illustrazioni dei risultati. Tuttavia, la tecnica utilizzata non è stata descritta in dettaglio e non esperti, non sarebbe in grado di replicare il metodo indipendente. Altri studi hanno raccolto vitreo da occhi cadavere con metodi semplici, come l'aspirazione o dissezione parziale,entrambi i quali non provocano un tutto, corpo vitreo intatto. Gisladottis et al. ⁴ e Xu et al. ⁵ indagare permeabilità nel vitreo raccolte da occhi cadavere. Tuttavia, poiché nessun metodo di estrazione vetrosa è stata descritta, si è ipotizzato che essi aspirati vitreo con una siringa. Watts et al. ⁶ andato un passo avanti descrivendo un metodo per isolare coniglio vitreo con una tecnica chirurgica. Tuttavia, questo metodo provoca un isolamento del solo nucleo vitreo e non la corteccia vitreo. Skeie et al. ⁷ poi organizzato il vitreo in 4 regioni uniche ed elegantemente descritto un metodo per sezionare fuori ogni parte per l'analisi. Questa tecnica tuttavia, non comporta un vitreous intatto nel suo complesso.

La tecnica attuale è stato sviluppato per facilitare esperimenti biofisici attualmente eseguite solo in occhi cadavere. I metodi precedenti, come descritto unbove, sono limitati perché 1) nessuno isolare completamente tutto il corpo vitreo, 2) raccolte nucleo vitreo e la corteccia sono omogeneizzati, 3) vitrea struttura anatomica non è mantenuta, o 4) tecniche di dissezione non sono adeguatamente dettagliate per la replica da parte dei ricercatori in altri campi . In aggiunta, a causa della opacità sclera e della coroide, visualizzazione del corpo vitreo è limitata nel bulbo oculare intatto. Questo limita la precisione e la fattibilità di misurazioni che possono essere fatte all'interno occhio intero. Inoltre, le strutture anatomiche circostanti il vitreo possono confondere lo studio delle proprietà biochimiche e fisiche del vitreo.

Negli ultimi anni, il corpo della scienza vitreo è cresciuto enormemente e non vi è ragione di credere che tutto il corpo vitreo ha proprietà diverse rispetto le sue singole parti. Vi è un crescente interesse per lo studio delle proprietà fisiche, biomeccaniche e chimiche del vitreo per vitreodynamics research, che ha applicazioni in medicina clinica, come la somministrazione di farmaci, l'ossigenazione intravitreale ⁸ e vitrectomia. Vitreodynamics farmacologici, che utilizza agenti farmacologici per manipolare il corpo vitreo, possono essere utilizzati per migliorare i risultati vitrectomia ^9. Proprietà biomeccaniche vengono utilizzate per modellare il flusso di fluido vitreale, che può essere utilizzato per migliorare drug delivery tecnologie intravitreale ^10-12. Le proprietà fisiche di diversi segmenti del vitreo sono cruciali per comprendere vitreo-retinica trasporto dell'ossigeno ^13. La tecnica dissezione vitreo proposto può essere usato per studiare varie proprietà del intatte vitreo. Permette da banco esperimenti da fare su tutto, corpi vetrosi intatti con una migliore visualizzazione.

In sintesi, i metodi attuali per lo studio del vitreo sono o non adeguatamente descritte o causare un isolamento incompleta nucleo vitreo e corteccia. Pertanto, vi è la necessità di eseguire experiments in un modello di occhio trasparente, pur mantenendo l'anatomia del vitreo che esiste negli occhi cadavere.