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Gli aspetti critici del modello ABA sono (1) il libero accesso al volontario esercizio su una ruota in esecuzione e (2) restrizione alimentare con accesso al cibo limitata ad un periodo limitato di tempo. L'accesso a una ruota portante permette all'animale di scegliere di utilizzare la ruota e fornisce un'indicazione dell'effetto di restrizione alimentare sulla motivazione dell'animale di esercitare. Viceversa, l'accesso al cibo-tempo limitato (piuttosto che calorie-restrizione) permette di misurare lo sperimentatore restrizione alimentare volontaria monitorando la misura in cui gli animali scelgono di eseguire durante le ore limitate di accesso al cibo. In questo modo, ABA è un eccellente modello di auto-fame che si verifica in AN.
Per minimizzare il rumore nei dati comportamentali del mouse, è importante ridurre al minimo la quantità di stress imprevedibile che l'esperienza animali. Ad esempio, la manipolazione degli animali dovrebbe essere ridotto al minimo, con gli animali solo di essere disturbati durante la pesatura, una voltagiorno. La movimentazione degli animali sperimentatore dovrebbe essere addestrato e confortevole con la gestione degli animali. Se possibile, una persona dovrebbe gestire gli animali tutto l'esperimento al fine di evitare ulteriore stress. Profumi e profumi dovrebbero essere evitati. Il tempo di pesatura e consegna cibo deve essere fatto per essere il più regolare possibile, per ridurre al minimo qualsiasi imprevedibilità. Come precauzione contro la perdita di dati, è preferibile alimentare il computer attraverso un alimentatore di backup in caso di interruzione di corrente; anche una breve interruzione di potere provoca il riavvio del computer e l'acquisizione dati cesserà. Inoltre, è importante controllare la durata della batteria dei trasmettitori ruota quotidiana. Se la batteria si scarica, il trasmettitore può sempre riuscire a inviare i dati al mozzo, sottovalutando così l'attività dell'animale.
Il protocollo del mouse qui descritto è stato modificato dal protocollo standard che è stato usato per i ratti 4. Adolescent topi femminasono molto più vulnerabili alla perdita di peso eccessivo e la morte a causa della fame. Pertanto, sono state effettuate le seguenti modifiche al fine di migliorare la sopravvivenza di almeno tre giorni di ABA. In primo luogo, il primo giorno di restrizione alimentare è stato ridotto rimuovendo cibo a mezzogiorno anziché a 8 pm del giorno precedente. Inoltre, il periodo di tempo di accesso al cibo è stata aumentata da 1 ora a 2 ore e la disponibilità di cibo umido è stato anche aggiunto per minimizzare gli effetti della disidratazione. Abbiamo scoperto che la somministrazione di cibo umido per i topi notevolmente migliorato la loro condizione attraverso tre giorni di restrizione alimentare. Senza il cibo umido, il peso corporeo cadeva molto più veloce e animali hanno dovuto essere rimossi dall'ambiente cibo ristretto. Questi cambiamenti erano sufficienti per permettere ai topi di sopravvivere attraverso tre giorni pieni di restrizione alimentare e prontamente recuperare da ABA.
Questo protocollo per ABA presenta alcune limitazioni importanti da considerare. Innanzitutto, è necessario alloggiare i topi singolarmentegabbie con una ruota in esecuzione al fine di monitorare l'attività volante di ogni mouse in modo indipendente. Questo si traduce in isolamento degli animali, un fattore di stress noto che possono influenzare il comportamento degli animali durante ABA nonché alcuni dei circuiti neurali che sono allo studio 26. Finora, non ci sono apparecchiature a disposizione che è in grado di monitorare l'attività individuale di topi co-ospitato, ma questo sembra essere un problema risolvibile utilizzando la tecnologia RFID e cartellini per la tracciabilità impastoiati per ogni animale. Un'altra conseguenza potenzialmente inevitabile di animali co-housing durante restrizione alimentare è il rischio che gli animali possono diventare aggressivi verso la loro gabbia compagni. Cambiare la gabbia degli animali dopo ogni sessione di alimentazione è un altro fattore di stress che abbiamo dovuto introdurre accaparramento cibo a causa di un animale sotto la biancheria da letto. Intendiamo ridurre lo stress di una nuova gabbia introducendo una notevole quantità di biancheria sporca dalla gabbia precedente nella gabbia fresca.
Altri gruppi che utilizzano il modello ABA hanno scelto diversi parametri per il loro programma di alimentazione. La scelta di tempo di alimentazione durante la fase buia del ciclo luce-buio non è standard. Abbiamo scelto di nutrire gli animali nel momento in cui le luci si spengono per consentire un tempo più naturale per gli animali da mangiare, dal momento che il mouse notturna è abitualmente più vigile e attivo durante questo periodo. Alcuni gruppi alimentano gli animali durante il periodo del giorno 13,27 luci accese. Questo può essere per motivi di convenienza dello sperimentatore, ed è importante notare che il periodo di tempo per l'assegno alimentare durante la fase di luce dovrebbe essere aumentata per migliorare la sopravvivenza. Ha anche suggerito che bloccando l'accesso alla ruota di corsa durante l'allattamento può migliorare la sopravvivenza, ma riteniamo che questo rimuove l'aspetto molto interessante di comportamento che è la decisione presa da alcuni animali per l'esecuzione piuttosto che mangiare, esacerbando ulteriormente la auto-fame aspetto del modello ABA, ma catturando un segno distintivo dellacomportamento umano associato con AN.
È importante notare che questo protocollo è stato ottimizzato specificamente per femmina adolescente C57BL / 6 topi. Se un ceppo di topi, sesso o età diversa deve essere utilizzato, alcuni parametri del protocollo possono richiedere la modifica. È stato anche dimostrato che RT colpisce la gravità di ABA nei roditori 28. Anche se non abbiamo tentato di variare la temperatura ambiente per i nostri studi, aumentando la RT è in grado di migliorare il tasso di sopravvivenza tra gli animali ABA.
Il vantaggio di utilizzare un modello animale di una malattia umana, come AN, è che è possibile studiare l'anatomia e la fisiologia del cervello e dei cambiamenti indotti da accesso a esercizio volontario e restrizione alimentare in un ambiente controllato. L'uso di topi nel modello ABA permette l'uso di approcci genetici potenti utilizzando animali transgenici e infezione virale per la manipolazione genetica. Futuri studi sono volti a studiare gli effetti di particolari geni nel resilienzao la vulnerabilità al cibo restrizione indotta iperattività e auto-fame.