Modellazione Piazza precoci di cancro ovarico Diffusione in una cultura Organotipica della Cavità peritoneale umano

Pamela N. Peters; Elizabeth M. Schryver; Ernst Lengyel; Hilary Kenny

doi:10.3791/53541

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Articolo metodologico

Modellazione Piazza precoci di cancro ovarico Diffusione in una cultura Organotipica della Cavità peritoneale umano

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DOI:

10.3791/53541

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31 dicembre 2015

Pamela N. Peters¹ , Elizabeth M. Schryver¹ , Ernst Lengyel¹ , Hilary Kenny¹

¹Department of Obstetrics and Gynecology, Section of Gynecologic Oncology, University of Chicago

In questo articolo

Sommario

Qui, presentiamo un protocollo per costruire un modello tridimensionale in vitro del rivestimento della cavità peritoneale, composto da cellule mesoteliali umane primarie e fibroblasti stratificati con matrice extracellulare, come strumento per studiare l'adesione, l'invasione e la proliferazione delle cellule tumorali ovariche.

Abstract

Il modello di metastasi del cancro ovarico è notevolmente diverso da quello della maggior parte degli altri tumori epiteliali, perché raramente si diffonde ematogenamente. Invece, le cellule tumorali ovariche esfoliate dal tumore primario sono trasportate dal liquido peritoneale ai siti metastatici all'interno della cavità peritoneale. Questi siti, in particolare il peritoneo addominale e l'omento, sono organi ricoperti da una superficie rivestita di mesotelio. Per studiare i processi di disseminazione del cancro ovarico, abbiamo assemblato un complesso sistema di coltura tridimensionale che ricostruisce il rivestimento della cavità peritoneale in vitro. I fibroblasti umani primari e le cellule mesoteliali sono stati isolati dall'omento umano. I fibroblasti sono stati quindi mescolati con la matrice extracellulare e ricoperti con uno strato di cellule mesoteliali umane primarie per imitare le superfici peritoneali e omentali incontrate dalle cellule tumorali ovariche metastatizzanti. Il modello organotipico risultante è, come mostrato, utilizzato per esaminare le prime fasi della disseminazione del cancro ovarico, tra cui l'adesione, l'invasione e la proliferazione delle cellule tumorali. Questo modello è stato utilizzato in numerosi studi per studiare il ruolo del microambiente (cellulare e acellulare) nella disseminazione precoce del cancro ovarico. È stato anche adattato con successo allo screening ad alto rendimento e utilizzato per identificare e testare gli inibitori delle metastasi del cancro ovarico.

Introduzione

Il cancro ovarico è la neoplasia ginecologica più mortale¹. La maggior parte dei pazienti viene diagnosticata dopo che il cancro si è diffuso in tutta la cavità peritoneale. Una volta che il cancro si è diffuso in tutta la cavità peritoneale, la chirurgia citoriduttiva e la chemioterapia spesso non sono un trattamento sufficiente per prevenire la recidiva del cancro e la chemioresistenza, con un tasso di sopravvivenza a 5 anni inferiore al 30%. Le metastasi del cancro ovarico sono prevalentemente limitate alla cavità peritoneale e molti altri tipi di cancro, tra cui i tumori gastrici, pancreatici e del colon, metastatizzano negli stessi siti anatomici nella....