Le aderenze addominali che si formano dopo l'intervento chirurgico sono una delle principali cause di dolore, infertilità, ospedalizzazione e reintervento per ostruzione dell'intestino tenue. La nostra procedura chirurgica per la creazione di aderenze addominali nei topi è uno strumento affidabile per studiare i meccanismi alla base della formazione delle aderenze.
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Articolo metodologico
Creazione di addominali aderenze nei topi
In questo articolo
Sommario
Abstract
Le aderenze addominali consistono in tessuto fibrotico che si forma nello spazio peritoneale in risposta a un insulto infiammatorio, tipicamente un intervento chirurgico o un'infezione intraaddominale. I meccanismi precisi alla base della formazione dell'adesione sono poco conosciuti. Molti composti e barriere fisiche sono stati testati per la loro capacità di prevenire le aderenze dopo l'intervento chirurgico con vari livelli di successo. Il topo e il ratto sono modelli importanti per lo studio delle aderenze addominali. In letteratura esistono diverse tecniche per la creazione di aderenze nel topo e nel ratto. Qui descriviamo un protocollo che utilizza l'abrasione del cieco con carta vetrata e suture posizionate nella parete laterale addominale destra. Il topo viene anestetizzato e l'addome viene preparato. Viene creata una laparotomia della linea mediana e viene identificato il cieco. La carta vetrata viene utilizzata per abradere delicatamente la superficie del cieco. Successivamente, diverse suture a forma di otto vengono posizionate nel peritoneo della parete laterale addominale destra. La cavità addominale viene irrigata, viene applicata una piccola quantità di amido e l'incisione viene chiusa. Abbiamo scoperto che questa tecnica produce le aderenze più coerenti con il più basso tasso di mortalità.
Introduzione
aderenze addominali sono una forma di tessuto cicatriziale che si formano nell'addome in risposta all'infiammazione, di solito dopo un intervento chirurgico o infezioni intra-addominale. Le adesioni sono una delle principali cause di dolore addominale cronico ed infertilità, e sono la causa più comune di piccola occlusione intestinale 1. La presenza di aderenze fa eseguire una seconda operazione addominale più difficile e aumenta la probabilità di complicazioni 2.
Nonostante anni di ricerca, i meccanismi alla base della formazione di aderenze sono ancora poco chiare. E 'noto che una lesione iniziale alla ....
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Protocollo
Il seguente protocollo è stato approvato dal Comitato Istituzionale Stanford University cura degli animali e Usa (IACUC) e soddisfa tutte le linee guida etiche istituzionali per quanto riguarda l'uso di animali di ricerca.
1. Creazione di addominali aderenze
- Avviare il mouse sulla dieta chow antibiotico una settimana prima della procedura.
- Autoclave gli strumenti chirurgici e pre-caldo la soluzione di irrigazione salina.
- Anestetizzare il mouse utilizzando 2% isoflurano per via inalatoria.
- Utilizzando un tagliacapelli seguito da un breve applicazione (5 - 10 sec) di agente depilatorio, rimuovere....
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Risultati
A sette giorni dopo l'intervento, il cieco e, eventualmente, colon ascendente, il fegato, e loop di piccolo intestino dovrebbe essere aderente alla parete addominale lato destro. (Figura 8) tessuto asportato può essere integrato e sezionato e produrrà ottimi vetrini istologici. (Figura 11, 12)
Quando la procedura viene eseguita correttamente, il 100% dei topi dovrebbe avere adesioni .......
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Discussione
I passaggi critici di questa procedura sono: accuratamente abrasione cieco senza provocare la perforazione, suture nella parete laterale addominale, e applicando la giusta quantità di amido. applica carta vetrata Solo al cieco, o per una piccola porzione specifica dell'intestino. Ampio uso di carta vetrata su grandi quantità di piccolo intestino tende a causare una significativa ileo. Fare attenzione a raschiare il cieco con forza sufficiente che la superficie diventa ruvida, ma non così tanto che le lacrime a muro........
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.
Ringraziamenti
CDM è stata sostenuta dalla American College of Surgeons (ACS) Borsa di studio Resident Research. MSH è stato sostenuto dal California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) formazione Fellow clinica concessione TG2-01159. MSH, HPL, e MTL sono stati sostenuti dalla società americana di chirurghi maxillo-facciale (ASMS) / maxillofacciale Chirurghi Foundation (MSF) Research Grant Award. HPL è stato sostenuto da NIH concedere R01 GM087609 e un dono di Ingrid Lai e Bill Shu in onore di Anthony Shu. HPL e MTL sono stati sostenuti dal Laboratorio Hagey Pediatrica Medicina rigenerativa e la Fondazione Oak. MTL è stato sostenuto dal / Fondo Olivier Gunn.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Fisherbrand Underpads assorbenti, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Campo sterile polifoderato, 18" x 24" | Busse Hospital Monouso: | 696 | Tagliare un foro rettangolare della dimensione appropriata |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | ||
| Fisherbrand Garza di cotone sterile, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Unguento oftalmico in vaselina Puralube, tubo da 1/8 oz. | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Crema depilatoria | Nair Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorfina 0,3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. | NDC 12496-0757-5 | |
| Siringa da insulina da 1 cc, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| preparazione dello iodio povidone | Medline | MDS093944H | |
| Webcol tamponi per la preparazione dell'alcol | Covidien | 6818 | |
| Nastro per etichettatura Labarotory per uso generico | VWR | 89097-912 | |
| Guanti chirurgici BioGel PI | Mö lnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Pinze con denti | Roboz | RS-5150 | |
| Forbici fini - affilate | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Pinze seghettate diritte | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Cacciavite ad ago Castro-Viejo | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 100 grana 1/4 foglio di carta vetrata | ACE Hardware | 1010446 | Tagliare a strisce |
| 4-0 sutura di seta, 30", ago SH | Ethicon | K831 | |
| 7-0 PDS II sutura monofilamento assorbibile, 30", ago BV-1 | Ethicon | Z135 | Di solito viene fornito a doppio braccio. Tagliare la sutura a metà strada per generare due suture utilizzabili. |
| Amido di riso | MP Biomedicals | 102955 | |
| 0,9% cloruro di sodio irrigazione | Baxter | BHL2F7121 | caldo a 37 gradi C prima dell'uso |
| siringa da 10 ml | Becton Dickinson | 309604 | |
| 6-0 Vicryl sutura intrecciata assorbibile, 18", RB-1 ago conico | Ethicon | J212H | |
| 6-0 Ethilon nylon monofilamento sutura, 18", ago P-3, | Ethicon | 1698G | |
| Tegaderm Pellicola Trasparente Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W | Taglio a metà nel senso della lunghezza |
Riferimenti
- Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
- Brochhausen, C., et al. Current strategies and fut....
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Ristampe e permessi
