Isolamento rapido di BMPR-IB + derivate da tessuto adiposo cellule stromali per l&#39;uso in un cranica difetto di guarigione Modello

Clement D. Marshall; Elizabeth R. Zielins; Elizabeth A. Brett; Charles P. Blackshear; Michael S. Hu; Tripp Leavitt; Leandra A. Barnes; H. Peter Lorenz; Michael T. Longaker; Derrick C. Wan

doi:10.3791/55120

È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

Articolo metodologico

Isolamento rapido di BMPR-IB + derivate da tessuto adiposo cellule stromali per l'uso in un cranica difetto di guarigione Modello

6.2K visualizzazioni

⸱

DOI:

10.3791/55120

⸱

24 febbraio 2017

Clement D. Marshall¹ , Elizabeth R. Zielins¹ , Elizabeth A. Brett¹ , Charles P. Blackshear¹ , Michael S. Hu¹ , Tripp Leavitt¹ , Leandra A. Barnes¹ , H. Peter Lorenz¹ , Michael T. Longaker¹ , Derrick C. Wan¹

¹Hagey Laboratory for Pediatric Regenerative Medicine, Division of Plastic and Reconstructive Surgery, Department of Surgery, Stanford University School of Medicine

In questo articolo

Sommario

Le cellule stromali derivate dal tessuto adiposo possono essere utili per ingegnerizzare nuovi tessuti dalle cellule di un paziente. Presentiamo un protocollo per l'isolamento di una sottopopolazione di cellule stromali umane di derivazione adiposa (ASC) con aumentato potenziale osteogenico, seguito dall'applicazione delle cellule in un saggio di guarigione calvariale in vivo.

Abstract

Tumori invasivi, lesioni gravi e infezioni possono causare difetti ossei troppo grandi per essere ricostruiti con osso preesistente dal corpo del paziente. La capacità di far crescere l'osso de novo utilizzando le cellule di un paziente consentirebbe di riempire i difetti ossei con tessuto adeguato senza la morbilità del prelievo di osso nativo. C'è interesse per l'uso di cellule stromali di derivazione adiposa (ASC) come fonte per l'ingegneria tissutale perché queste sono ottenute da una fonte abbondante: il tessuto adiposo del paziente. Tuttavia, le ASC sono una popolazione eterogenea e alcune sottopopolazioni possono essere più efficaci in questa applicazione rispetto ad altre. L'isolamento della popolazione più osteogenica di ASC potrebbe migliorare l'efficienza e l'efficacia di un processo di ingegneria ossea. In questo protocollo, gli ASC sono ottenuti da tessuto adiposo sottocutaneo di un donatore umano. La sottopopolazione di ASC che esprimono il marcatore BMPR-IB viene isolata utilizzando FACS. Queste cellule vengono quindi applicate a un test di guarigione del difetto calvariale in vivo e si è scoperto che hanno un potenziale rigenerativo osteogenico migliorato rispetto alle cellule non selezionate.

Introduzione

I principali difetti ossei derivanti da lesioni, infezioni o cancro invasivo hanno un impatto significativo sul recupero e la qualità della vita del paziente. Le tecniche esistono per riempire questi difetti con ossa sane da altrove nel corpo del paziente, ma questo trasferimento porta proprio la morbilità e il rischio di complicazioni ^{^1,} ^{^2,} ^3. Inoltre, alcuni difetti sono così grandi o complessi che sufficiente osso donatore non è disponibile per riempire il difetto. Dispositivi protesici sono una possibile opzione per il riempimento di difetti ossei, ma questi sono associa....