Immunoistochimica su sezioni di paraffina di epidermide mouse utilizzando anticorpi fluorescenti

Sommario

Descriviamo un metodo affidabile per immunolocalizzazione all'interno dell'epidermide modificato per entrambe le sezioni congelate e paraffina che usiamo molto di routine nel nostro laboratorio.

Abstract

Nell'epidermide, immunoistochimica è un mezzo efficace di localizzazione di specifiche proteine ​​a loro vano espressione relativa, vale a dire gli strati basali, soprabasali, e strato corneo. La localizzazione precisa all'interno dell'epidermide di una proteina particolare presta indizi verso il suo ruolo funzionale all'interno dell'epidermide. In questo capitolo, si descrive un metodo affidabile per immunolocalizzazione all'interno dell'epidermide modificato per entrambe le sezioni congelate e paraffina che usiamo molto di routine nel nostro laboratorio. Sezioni di paraffina in genere forniscono morfologia molto meglio, quindi, risultati superiori e fotografie, ma non tutti gli anticorpi funzionano con la fissazione dura e trattamento coinvolti nel loro trattamento. Pertanto, il protocollo per sezionamento congelati è anche incluso. All'interno di sezionamento paraffina, due protocolli di fissazione sono descritti (Bouin e paraformaldeide), la scelta di fissativo sarà direttamente correlata alle specifiche di anticorpi e può richiedere un altro metodo di fissaggio.

Protocollo

Il protocollo testo completo di questo approccio sperimentale è disponibile in protocolli di Springer .