Ipertensione oculare cronica è indotta applicando una sutura circumlimbal in ratti e topi, che conduce al deterioramento strutturale e funzionale delle cellule ganglionari retiniche coerente con il glaucoma.
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Articolo metodologico
Un modello del Glaucoma indotto da sutura Circumlimbal nei ratti e nei topi
In questo articolo
Sommario
Abstract
La sutura di circumlimbal è una tecnica per indurre glaucoma sperimentale nei roditori cronicamente elevando la pressione intraoculare (IOP), un ben noto fattore di rischio per il glaucoma. Questo protocollo dimostra una guida dettagliata su questa tecnica a lungo Evans ratti e topi C57BL/6. In anestesia generale, una "" sutura viene applicata sul conjunctiva, intorno all'equatore e dietro il limbus dell'occhio. Il collega occhio serve come controllo non trattato. Nel corso della durata del nostro studio, che era un periodo di 8 settimane per ratti e 12 settimane per i topi, IOP è rimanere elevato, come misurato regolarmente di tonometria di rimbalzo in animali coscienti senza anestesia topica. In entrambe le specie, gli occhi suturati ha mostrato le caratteristiche dell'elettroretinogramma costanti con disfunzione retinica interna preferenziale. Tomografia ottica di coerenza ha mostrato selettiva assottigliamento dello strato di fibre nervose retiniche. L'istologia della retina del ratto in sezione trasversale trovato ridotta densità delle cellule nello strato delle cellule del ganglio, ma nessun cambiamento in altri strati cellulari. Macchiatura delle retine di piatto-montato del mouse con un marker specifico di cellule del ganglio (trasformante) ha confermato la perdita delle cellule del ganglio. La sutura di circumlimbal è un semplice, minimamente invasiva e conveniente modo per indurre ipertensione oculare che porta alla lesione delle cellule del ganglio in topi e ratti.
Introduzione
Modelli animali forniscono che un'importante piattaforma per la ricerca del laboratorio di cellulare processi sottostanti patogenesi del glaucoma, nonché valutare potenziali interventi terapeutici. Diversi modelli viscoelastici sono stati sviluppati per produrre elevazione sostenuta pressione intraoculare (IOP), il più importante fattore di rischio per il glaucoma. Metodi che sono stati applicati per elevare la IOP includono: iniezione salina ipertonica in episcleral vene1, photocoagulation del laser del trabecolato2 o delle vene limbal3e l'iniezione intracameral di sostanze come fantasma rosso gl....
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Protocollo
Tutte le procedure sperimentali sono state condotte secondo il codice di pratica australiana per la cura e l'uso degli animali per fini scientifici, l'impostazione del National Health and Medical Research Council in Australia. Approvazione etica è stata ottenuta dal comitato di etica animale di Howard Florey Institute (approvazione numero 13-044-UM e 13-068-UM per ratti e topi, rispettivamente).
1. misurazione della pressione intraoculare in ratti coscienti
- Impostare il tonometro rimbalzo di laboratorio per l'impostazione di ratto. Fasciare il ratto sveglio in un pezzo di panno morbido per calmare l'animale. Esporre la testa e il ....
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Risultati
I seguenti risultati in ratti18 e topi16 precedentemente sono stati segnalati e sono riassunti qui. La sutura circumlimbal ha prodotto un modello simile dell'altezza dello IOP nei ratti e nei topi (Figura 2). Una breve impennata IOP, fino a 58,1 ± 2.7 mmHg in ratti e 38,7 ± 2.2 mmHg nei topi, è stata trovata subito dopo la procedura di sutura. Nei ratti, IOP grandezza ridotta gradualmente nel tempo per essere 44.......
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Discussione
La sutura di circumlimbal è un nuovo modello di ipertensione oculare cronica. Oltre agli studi da cui i risultati rappresentativi sono provenienza16,18, questo modello animale è stato utilizzato in una serie di recenti studi15,23,24,25 ,26. Confronto tra questi rapporti precedenti dimostra che il meto.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è finanziato dalla National Health e contributo al progetto Medical Research Council of Australia (1046203), Australian Research Consiglio futuro Fellowship (FT130100338).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| soluzione salina normale | Baxter International Inc | Mantenere l'idratazione corneale durante l'intervento chirurgico | |
| Cloresadina 0,5% | Orion Laboratories | 27411, 80085 | Disinfezione dello strumento chirurgico |
| Isoflurano 99,9% | Abbott Australasia Pty Ltd | CAS 26675-46-7 | Nome proprietario: Isoflo(TM) Anestetico per inalazione. Anestetico per inalazione di grado farmaceutico miscelato con ossigeno gassoso per la procedura di sutura |
| lubrificante oculare | Alcon Laboratories | 1618611 | Nome proprietario: Lubrificante oculare per mantenere umido l'altro occhio |
| Porta ago (microchirurgia) | World Precision Instruments | 555419NT | Per tenere l'ago durante la chirurgia oculare |
| Proxymetacaine 0,5% | Alcon Laboratories | CAS 5875-06-9 | Forbici per analgesia oculare topica |
| (microchirurgia) | World Precision Instruments | 501232 | Per tagliare il moncone di sutura in eccesso durante la legatura |
| Telo chirurgico | Forniture mediche vitali | GM29-612EE | Garantire un ambiente sterile durante l'intervento chirurgico |
| Ago da sutura per ratti (microchirurgia) | Aghi medici Ninbo | 151109 | 8-0 Sutura in nylon con ago rotondo, tagliente 3/8, doppio ago, lunghezza sutura 30 cm |
| Ago da sutura per topi (microchirurgia) | Aghi medici Ninbo | 160905 | sutura in nylon 10-0 attaccata con ago rotondo, tagliente 3/8, doppio ago, lunghezza sutura 30 cm |
| Pinzette (microchirurgia) | World Precision Instruments | 500342 | manipolare i tessuti durante la chirurgia oculare |
| TONOLAB, iCare, Helsinki, Finlandia | TV02 | per il monitoraggio della pressione intraoculare |
Riferimenti
- Morrison, J. C., et al. A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage. Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).
- Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects. Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).
- Chiu, K.,....
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Ristampe e permessi
