Articolo metodologico

Misurazione della temperatura corpo del mouse utilizzando il termometro a infrarossi durante passiva anafilassi sistemica e la valutazione di allergia alimentare

DOI:

10.3791/58391

⸱

14 settembre 2018

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1Division of Cell Biology, La Jolla Institute for Allergy and Immunology

In questo articolo

Sommario

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Qui vi presentiamo un nuovo metodo per misurare con precisione le differenze di temperatura del corpo in passivo anafilassi sistemica (PSA) e modelli di mouse allergia alimentare utilizzando un termometro a infrarossi. Questa procedura è stata duplicata con precisione nei precedenti risultati di PSA.

Abstract

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Misurazione di temperatura del corpo del mouse è di fondamentale importanza per indagare le allergie e sintomi di reazioni anafilattiche. Sonde rettali per letture di temperatura è comune, e hanno dimostrati di essere preciso e prezioso in questo senso. Tuttavia, questo metodo di misurazione della temperatura richiede i topi di essere anestetizzato per inserire la sonda senza pregiudizio per l'animale. Questo limita la capacità di osservare altri fenotipi del mouse contemporaneamente. Al fine di indagare altri fenotipi durante la misurazione della temperatura, sonde rettali non sono ideali, e un altro metodo è desiderato. Qui, presentiamo un metodo non invasivo di misurazione della temperatura che rinuncia il requisito per l'anestesia del mouse mantenendo affidabilità pari alle sonde rettali nella misurazione della temperatura corporea. Usiamo un termometro a infrarossi che rileva la temperatura del corpo a compresa tra 2 e 150 mm. Questo metodo di misurazione di temperatura del corpo è riuscito a replicare in modo affidabile le tendenze di cambiamento di temperatura durante gli esperimenti di anafilassi sistema passivo in topi. Indichiamo che la temperatura del corpo è circa 2,0 ° C inferiore a misurazioni di sonda rettale, ma il grado di abbassamento della temperatura segue lo stesso andamento. Inoltre, usiamo la stessa tecnica per osservare i topi in un modello di allergia alimentare per valutare i livelli di temperatura e attività contemporaneamente.

Introduzione

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Misurazione della temperatura corporea è stata una parte essenziale del monitoraggio degli effetti dei sintomi di reazioni anafilattiche in animale modelli1,2. Differenze di temperatura sono stati tradizionalmente misurate da termometri sonda rettale in topi3,4. Con queste misure, gli investigatori hanno ritratto in modo affidabile le differenze di temperatura tra variabili; Tuttavia, questo metodo è una procedura che richiede tempo e causa l'afflizione ai topi, che possono aumentare la temperatura interna del corpo. Sonda rettale può anche causare lac....

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Protocollo

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Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati approvati dal comitato di uso dell'Istituto La Jolla e cura degli animali per l'allergia e immunologia.

1. misurazione di temperatura del corpo Mouse durante amputate

  1. Posizionare il mouse in una scatola di induzione di anestesia. Anestetizzare tramite flusso di 1 L/min di ossigeno con isoflurano 5%.
    Nota: Amputate è confermata quando il mouse smette di movimento volontario ed è stato immobile per più di 30 s. in alternativa, la frequenza respiratoria di monitor, e una volta topi stanno respirando a 1 respiro per ogni 2 s o più, viene confermata amputate.
  2. Tenere il mouse p....

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Risultati

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Anafilassi sistemica passiva: per iniezione iv, 10 settimana vecchi topi BALB/c femminili sono stati anestetizzati. Prima dell'iniezione, abbiamo misurato la loro temperatura corporea (Video 1) come descritto nel passaggio 1. La figura 1 Mostra l'andamento della temperatura di entrambe le popolazioni dopo iniezione iv. Il mouse di IgE sensibilizzati ha mostrato un calo di temperatura massima di 3,0 ° C a 20 min, mentre il mouse di controllo P.......

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Discussione

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Il protocollo descritto è stato istituito con l'obiettivo di misurare la temperatura corporea senza l'uso dell'anestesia. Nonostante la sua relativa facilità con quale temperatura letture possono essere ottenute, ci sono diversi avvertimenti che ospitare questa tecnica, oltre agli effetti più evidenti come la gestione dello stress e presenza di differenti temperature.

In primo luogo, al fine di mantenere costante la temperatura letture in tutto l'esperimento, la posizione dove viene misurata l.......

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Dichiarazioni

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Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ringraziamenti

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Assegni di ricerca in Kawakami lab è stato sostenuto dal NIH: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01 e R41AI124734-01.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Termometro a infrarossi senza contattoSinoPieDT-8861
Anti-dinitrofenile (DNP) IgESigma AldrichD8406-.2MG
PrecisionGlide 30 G agoBD305128
PrecisionGlide 26 G ago BD305111
siringa da 1 mLBD309659
Dinitrofenil - albumina sierica umanaBiosearch TechnologiesD-5059-10
Ovoalbumina da albume d'uovo di gallinaSigma AldrichA5503-50G
Imject AlumThermoFisher Scientific77161
Aghi per alimentazione animale, usa e gettaFisher Scientific01-208-87

Riferimenti

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), Quiz 516-507 506-515 (2007).
  2. Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
  3. Newsom, D. M., Bolg....

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Modello di allergia alimentareMisurazione non invasiva della temperaturaConfronto con sonda rettaleAnalisi del calo della temperaturaValutazione del fenotipo comportamentaleMetodo senza anestesiaCorrelazione tra temperatura e attivit

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