Method Article

Murine Appendectomy Modello di Cronica Colite Associata Cancro Colorettale da Localizzazione precisa di Patch Caecal

DOI:

10.3791/59921

⸱

August 24th, 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of General Surgery, The First Affiliated Hospital, Xi'an Jiaotong University, 2Institute of Medical Research, Northwestern Polytechnical University, 3School of Life Sciences, Northwestern Polytechnical University, 4Department of Medicine, Xi'an Jiaotong University, 5Princess Margaret Cancer Center, University of Health Network, 6Department of Pathology, Nanjing Medical University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Il protocollo presentato descrive una facile rimozione chirurgica dell'appendice (patch caecale) in un topo seguita dall'induzione del cancro colorettale associato alla malattia intestinale infiammatoria. Questo modello di appendicosa murina consente lo studio del ruolo biologico dell'appendice nella patogenesi della malattia gastrointestinale umana.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

L'appendice umana è stata recentemente implicata per svolgere importanti ruoli biologici nella patogenesi di varie malattie complesse, come il cancro del colon-retto, la malattia infiammatoria intestinale e il morbo di Parkinson. Per studiare la funzione dell'appendice, è stato stabilito un modello di appendicia murina associata alla malattia intestinale e il suo protocollo passo-passo è descritto qui. Questa relazione introduce un protocollo facile per la rimozione dei cerotti ceecali nei topi seguito dall'induzione chimica del cancro colorettale associato alla colite cronica utilizzando una combinazione di sodio solfato di dextran (DSS) e azoxymetatano (AOM). Cellule specifiche IgA e concentrazione di IgA sono state significativamente ridotte al momento della rimozione del cerotto caecale nei topi C57BL/6 maschi rispetto a quelli del gruppo sham. Somministrazione simultanea 2% DSS e AOM ha provocato quasi 80% mouse sopravvivenza in entrambi i gruppi di farsa e appendicia senza significativa perdita di peso corporeo. I risultati istologici hanno confermato l'infiammazione colonica e diversi gradi di adenocarcinoma. Questo modello può essere utilizzato per lo studio del ruolo funzionale dell'appendice nel mantenimento dell'omeostasi del microbiota intestinale e della patogenesi della colite intestinale e delle neoplasie, nonché per lo sviluppo potenziale di terapie di targeting per farmaci.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

L'appendicosa clinica è una procedura chirurgica standard che comporta la rimozione dell'appendice principalmente a causa di infiammazione (ad esempio, appendicite)1,2,3. Tuttavia, la funzione biologica dell'appendice umana vermiforme rimane controversa4 ,5,6. L'appendice è stata considerata come un residuo vestigiale che si proietta dal cecum nell'intestino crasso. Fino a poco tempo fa, studi evolutivi, immunologici, morfologici e microbiologici hanno suggerito che l'appendice può p....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutte le procedure sugli animali sono state approvate dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali dell'Università dello Jiaotong di Xi'an (n. XJTULAC2019-1023).

1. Appendicosa ai topi

  1. Casa 8-10-settimana-vecchio C57BL/ 6 topi maschi in un ambiente certificato specifico-agente patogeno libero (SPF) per 1 settimana prima dell'intervento chirurgico.
  2. Preparare i seguenti strumenti chirurgici sterili: una coppia di microforbici, una coppia di micro-pinze, due dimensioni (4-0 e 8-0) di suture sterilizzate non assorbibili, una penna di coagulazione elettrica con portaa ad ago, 75% alcol medico, scrub a base di ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Istituzione del modello di appendicittomia murine

Questo modello di appendicosa murina del cancro colorettale cronico associato alla colite può essere generato seguendo le fasi chirurgiche e di induzione sequenziali, come illustrato nella Figura 1. Le posizioni più frequenti di caecum sono nella fossa iliaca sinistra e destra seguita dalla linea mediana dell'addome (Figura 2). Il tasso di successo di pre-localizzazion.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Un modello di appendicittomia murina di cancro colorettale associato alla colite è stato ottenuto utilizzando passaggi chirurgici con un alto tasso di sopravvivenza nei topi. Nella maggior parte dei casi, poiché il cedello era posizionato sotto la parete addominale (supplementary Table 1, Supplementary Table 2e Figura 2), era difficile pregiudicare la sua posizione senza laparotomia. In questo protocollo chirurgico, è stato introdotto un passo facile di toccare il dosso, e l.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Questo lavoro è parzialmente sostenuto da Fondi di Ricerca fondamentali per l'Università Centrale (G2018KY0302), Fondo di Sviluppo Ricerca Fondamentale dell'Università (KT00062), National Natural Science Foundation of China (81870380) e Clinical Research Award del Primo ospedale affiliato di Xi'an Jiaotong University in Cina (NO. XJTU1AF-CRF-2015-029). Gli autori ringraziano il Dr. Chengxin Shi per i suoi suggerimenti tecnici durante la fase di esplorazione iniziale del modello di appendicectomia murina, così come il patologo Dr. Xi Liu per la valutazione dei risultati di colorazione H&E di colite e tumori colorettali. Y.L. eseguì la dimostrazione chirurgica, fece ana....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Azossimetano (AOM)Sigma-Aldrich, Inc.A5486
destrano solfato sale di sodio (DSS)MP Biomedicals, Inc.160110
EntoiodioShanghai likon alta tecnologia disinfezione co. LTD310102
calibro digitaleNingbo yuanneng trading co. LTD4859263
4-0 Suture di setaYuanlikang co. LTD20172650032
8-0 Suture di proleneYuanlikang co. LTD20172650032
Penna di coagulazione elettricaChuang mei medical equipment co. LTD28221777292
siringa monouso 1mlShengguang medical products co. LTD3262-2014
siringa monouso 10mlShengguang medical products co. LTD3262-2014
75% alcol medicinaleShandong anjie high-tech disinfezione technology co. LTD371402AAJ008
Pentobarbital salesodicoSigma-Aldrich, Inc.57-33-0
Soluzione fisiologica salinaShandong qidu pharmaceutical co. LTDH37020766
Tampone di cotone assorbenteHenan ruike medical co., LTDRK051
Strumenti chirurgici-OftalmicoJinzhong Shanghai co. LTDWA3050

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Leung, T. T., et al. Bowel obstruction following appendectomy: what is the true incidence. of Surgery. 250 (1), 51-53 (2009).
  2. Salminen, P., et al. Antibiotic Therapy vs. Ap....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Murine Appendectomy ModelCaecal Patch RemovalColitis Associated Colorectal CancerDextran Sulfate SodiumAzoxymethane InductionIgA Specific CellsGut Microbiota HomeostasisSurgical Procedure ProtocolHistological Analysis ResultsFlow ELISA Detection

Related Articles