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La memoria svolge un ruolo vitale nel funzionamento quotidiano in quanto consente di ricordare informazioni su persone e luoghi, ricordare eventi passati, apprendere nuovi fatti e abilità, nonché di esprimere giudizi e decisioni. Qui ci concentriamo su due tipi di memoria: memoria di lavoro (WM) e memoria associativa (AM). WM ci fornisce la possibilità di mantenere e archiviare temporaneamente le informazioni per l'elaborazione cognitiva in corso1, mentre AM ci consente di ricordare più pezzi di esperienza o informazioni legate insieme. Pertanto, questi due tipi di memoria sottolineano quasi tutte le attività quotidiane. Sfortunatamente, la memoria è una delle funzioni più vulnerabili in quanto diminuisce con il normale invecchiamento e a causa di vari stati e condizioni patologiche. Sia il declino della WM che dell'AM è prominente nel decadimento cognitivo lieve2,3 e nella demenza4,5 e nel normale invecchiamento6,7. Poiché i deficit di memoria sono associati a un elevato livello di carico di malattia8,9 e influenzano significativamente la qualità della vita10,11,12,13, vi è una crescente necessità di nuovi approcci alla prevenzione e al trattamento del declino della memoria.
La stimolazione transcranica a corrente continua (tDCS) è uno strumento promettente per affrontare il declino della memoria14,15,16 e ottenere una migliore comprensione delle funzioni cerebrali in generale17. tDCS è una tecnica di stimolazione cerebrale non invasiva che utilizza deboli correnti elettriche (di solito tra 1 mA e 2 mA) per modulare l'attività cerebrale influenzando l'eccitabilità della membrana neuronale. Gli effetti della tDCS dipendono dalla polarità, in modo tale che la stimolazione anodica aumenta mentre la stimolazione catodale diminuisce l'eccitabilità neuronale. Vale a dire, il tDCS anodale aumenta la probabilità che i potenziali d'azione si attivino attraverso la depolarizzazione delle membrane neuronali, facilitando così l'attività cerebrale spontanea sotto l'anodo18. Inoltre, è dimostrato che l'effetto di una maggiore attivazione non rimane localizzato ma tende a diffondersi ad altre aree funzionalmente connesse del sistema nervoso centrale. Ci si aspetta quindi che la tDCS anodale promuova funzioni cognitive che si basano su regioni cerebrali mirate e aree cerebrali funzionalmente interconnesse, mentre la tDCS catodale dovrebbe avere l'effetto opposto.
La tDCS ha diversi vantaggi rispetto ad altre tecniche di stimolazione cerebrale: (1) la tDCS è sicura, cioè non pone rischi per la salute e non produce cambiamenti strutturali o funzionali negativi a breve o lungo termine19; (2) la tDCS è caratterizzata dalla massima tollerabilità tra le tecniche di stimolazione cerebrale in quanto provoca un disagio minimo ai partecipanti sotto forma di lieve formicolio e sensazioni di prurito sotto gli elettrodi stimolanti20; (3) la tDCS è conveniente: il prezzo dei dispositivi e delle applicazioni tDCS è da dieci a cento volte inferiore rispetto ad altre opzioni di trattamento, il che lo rende attraente per i pazienti e il sistema sanitario; (4) tDCS è facile da usare e quindi ha un elevato potenziale da applicare anche in ambienti domiciliari, il che può portare a una maggiore conformità dei pazienti e a costi ridotti per il personale medico e le strutture.
Le principali sfide per l'utilizzo di tDCS per il miglioramento della memoria sono trovare il montaggio ottimale dell'elettrodo e il protocollo di stimolazione che produrrà effetti affidabili sulla memoria. Qui usiamo il termine montaggio dell'elettrodo per riferirci alla configurazione e alle posizioni degli elettrodi (cioè il posizionamento dell'elettrodo target e di riferimento (ritorno). A causa della natura dei campi elettrici, l'elettrodo di riferimento (ritorno) non è neutro - ha la polarità opposta all'elettrodo bersaglio - e quindi può anche esercitare effetti biologici (neuromodulatori) sul tessuto neurale sottostante. Pertanto, un'attenta scelta dell'elettrodo di riferimento è essenziale per evitare effetti aggiuntivi indesiderati della stimolazione.
Quando si utilizza il termine protocollo di stimolazione, ci riferiamo ai parametri tDCS come la durata e l'intensità della corrente applicata, nonché il modo in cui l'intensità della corrente cambia nel tempo (cioè, se l'intensità è costante durante la stimolazione o cambiamenti a seguito di una forma d'onda sinusoidale con una certa ampiezza e frequenza). Diversi protocolli di stimolazione possono essere applicati utilizzando lo stesso montaggio di elettrodi e lo stesso protocollo può essere utilizzato su diversi montaggi.
Per ottimizzare il montaggio dell'elettrodo, esaminiamo le aree cerebrali rilevanti per la funzione e come i campi elettrici indotti da varie posizioni degli elettrodi influenzerebbero quelle aree cerebrali e di conseguenza le funzioni cognitive. Diverse strutture corticali e sottocorticali svolgono un ruolo significativo nelle funzioni di memoria, comprese le aree della corteccia frontale, temporale e parietale. Vale a dire, WM è supportato da una rete neurale diffusa che comprende dorsolaterale (DLPFC) e corteccia prefrontale laterale ventrale (VLPFC), pedomotorie e cortecce motorie supplementari, nonché corteccia parietale posteriore (PPC)21. Per l'AM e la memoria episodica in generale, le strutture all'interno del lobo temporale mediale sono essenziali22. Tuttavia, anche le aree associative delle cortecce parietali, frontali e temporali, con i loro percorsi convergenti verso l'ippocampo, svolgono un ruolo significativo. A causa della sua posizione anatomica, l'ippocampo non può essere stimolato direttamente utilizzando la tDCS, e quindi il potenziamento delle funzioni di memoria dipendenti dall'ippocampo viene effettuato utilizzando i bersagli corticali con elevata connettività funzionale all'ippocampo come la corteccia parietale posteriore. Per questi motivi, DLPFC e PPC sono più frequentemente utilizzati come bersagli di stimolazione per migliorare la memoria. Il posizionamento degli elettrodi può essere ulteriormente perfezionato sulla base della modellazione del flusso di corrente23 e convalidato in studi che combinano tDCS con tecniche di neuroimaging24.
Il protocollo di stimolazione più comune è una corrente anodale costante di 1-2 mA che dura tra 10-30 minuti. Il meccanismo assunto alla base di questo protocollo è che l'elettrodo con una carica positiva aumenterà l'eccitabilità del tessuto corticale sottostante che si tradurrà in un miglioramento delle prestazioni di memoria successive. A differenza del tDCS anodale costante, dove l'intensità di corrente rimane la stessa durante l'intero periodo di stimolazione, nel protocollo tDCS oscillatorio l'intensità della corrente fluttua alla frequenza data intorno a un valore impostato. Pertanto, questo tipo di protocollo modula non solo l'eccitabilità, ma coinvolge anche le oscillazioni neurali delle aree cerebrali rilevanti. È importante notare che sia per il tDCS costante che per quello oscillatorio gli elettrodi mantengono la stessa polarità di corrente per l'intera durata della stimolazione.
Qui presentiamo montaggi tDCS che prendono di mira i nodi all'interno della rete fronto-parieto-ippocampale per promuovere la memoria - sia WM che AM: in particolare, due montaggi di elettrodi con l'elettrodo target su DLPFC sinistro / destro o PPC sinistro / destro. Oltre al protocollo tDCS anodale costante delineiamo un protocollo tDCS oscillatorio theta.
Progettazione dello studio
Prima di fornire una guida dettagliata su come utilizzare tDCS per il miglioramento della memoria, delineeremo alcune proprietà essenziali del progetto sperimentale che sono importanti da considerare quando si pianifica uno studio tDCS sulla memoria.
Controllo fittizio
Per valutare gli effetti della tDCS sulla memoria, lo studio deve essere controllato in modo fittizio. Ciò implica che in una delle condizioni sperimentali il protocollo assomiglia a una vera e propria sessione di stimolazione, ma non viene somministrato alcun trattamento. Questa sessione falsa o fittizia serve come punto di riferimento per confrontare le prestazioni seguendo il tDCS reale e fare inferenze sulla sua efficacia. Comunemente, nel protocollo sham la corrente viene applicata solo per un breve periodo - di solito fino a 60 secondi all'inizio e alla fine della stimolazione sham come ramp-up seguita da ramp-down immediato (cioè fade-in / fade-out, fino a 30 secondi ciascuno) moda. In questo modo si assicura che la durata della stimolazione sia insufficiente a produrre effetti comportamentali o fisiologici. Poiché le sensazioni locali della pelle / cuoio capelluto sono solitamente più pronunciate all'inizio e alla fine della stimolazione (a causa di cambiamenti nell'intensità attuale), le sensazioni indotte in tutti i protocolli sono comparabili e difficili da distinguere25. In questo modo, il partecipante è accecato sul fatto che la stimolazione sia reale o meno, il che è particolarmente importante nei progetti all'interno del soggetto.
Oltre al controllo sham, per valutare la specificità degli effetti dei protocolli oscillatori, è consigliabile avere anche una condizione di controllo attivo. Ad esempio, il controllo attivo per il protocollo oscillatorio può essere la stimolazione anodale costante della stessa intensità26,27, o la stimolazione oscillatoria in diverse frequenze, ad esempio theta vs gamma28.
Design all'interno o tra i soggetti.
Nella progettazione all'interno dei soggetti ogni partecipante subisce sia tDCS reali che fittizi, mentre nella progettazione tra soggetti un gruppo di partecipanti riceve tDCS reali e l'altro gruppo riceve tDCS fittizio. Il vantaggio principale della progettazione all'interno del soggetto è un migliore controllo delle confusioni specifiche del soggetto. Cioè, le differenze individuali nell'anatomia e nelle capacità cognitive sono meglio controllate per quando ogni partecipante viene confrontato con se stesso. Tuttavia, poiché la progettazione all'interno del soggetto deve essere applicata in modo cross-over (cioè, metà dei partecipanti riceve tDCS reale nella prima sessione e sham nella seconda sessione, mentre l'altra metà dei partecipanti riceve prima sham e tDCS reale secondo) questo design potrebbe non essere ottimale per studi clinici e di formazione, nonché studi che coinvolgono diverse sessioni tDCS per giorni consecutivi, perché la progettazione crossover può comportare linee di base disuguali tra i bracci crossover. Pertanto, la progettazione all'interno del soggetto è più adatta quando si valutano gli effetti comportamentali o fisiologici di una singola sessione tDCS e quando le linee di base disuguali non sono considerate un problema per l'ipotesi di ricerca. Nella progettazione all'interno del soggetto che valuta gli effetti della singola sessione tDCS, è buona norma mantenere 7 giorni tra la sessione tDCS reale e quella fittizia per evitare effetti di riporto (tuttavia alcuni studi suggeriscono che periodi di wash-out ancora più brevi non influenzano significativamente i risultati29,30)e utilizzare forme parallele di attività di memoria in ordine controbilanciato per ridurre al minimo l'allenamento e gli effetti di apprendimento tra le sessioni.
Quando si utilizza la progettazione tra soggetti, il gruppo di controllo deve essere attentamente abbinato per le prestazioni basali, nonché altre caratteristiche rilevanti note per essere rilevanti per l'efficacia della tDCS. L'assegnazione casuale di gruppi potrebbe non essere l'approccio migliore in campioni di piccole dimensioni (ad esempio, <100) in quanto potrebbe portare a una corrispondenza non ottimale. In entrambi i casi, le prestazioni di base dovrebbero essere contabilmente considerate nell'analisi statistica.
Dimensione del campione.
Una delle domande più frequenti è "quanti partecipanti è necessario per rilevare gli effetti tDCS". La risposta a questa domanda dipende da diversi aspetti dello studio, tra cui la progettazione sperimentale, le dimensioni degli effetti attesi, il tipo di analisi statistica, ecc. Le dimensioni del campione negli esperimenti di stimolazione cerebrale sono spesso troppo piccole e si stima che gli studi in questo campo perdano circa il 50% dei veri risultati positivi perché sono sottodimensionati31. L'analisi della potenza consente di determinare la dimensione del campione adeguata per ogni esperimento specifico in base al progetto dello studio e alla dimensione dell'effetto prevista per l'analisi statistica pianificata. L'analisi di potenza può essere eseguita in ambiente R o utilizzando software gratuito specializzato come G*Power32,e va sempre eseguita a priori (cioè prima dell'esperimento). La potenza dovrebbe essere impostata su >,80 (idealmente .95) e la dimensione dell'effetto prevista sulle attività di memoria dopo una singola sessione tDCS è solitamente compresa tra .15-.20 (η2), cioè Cohen f 0.42-0.50. Pertanto, in genere è necessario arruolare 20-30 partecipanti in totale per l'esperimento all'interno del soggetto e 30-40 partecipanti per gruppo per lo studio tra soggetti, per ottenere un potere soddisfacente e quindi ridurre l'errore di tipo II. Tuttavia, la dimensione del campione dipende dal numero di altri fattori, tra cui l'analisi pianificata e la sensibilità delle misure di comportamento utilizzate. Pertanto, idealmente, si dovrebbe eseguire un esperimento iniziale per comprendere le dimensioni degli effetti per il progetto specifico e utilizzare tali dati come input per l'analisi della potenza. Tuttavia, è importante notare che l'esecuzione di un esperimento pilota su pochi partecipanti porterà a stime errate e inaffidabili delle dimensioni dell'effetto. Pertanto, se le risorse sono limitate, è meglio fare affidamento sugli studi precedenti con risultati comparabili e adottare un approccio leggermente più conservativo, cioè stimando per dimensioni di effetto leggermente inferiori a quelle riportate in letteratura.
Misure di risultato
Per valutare l'efficacia della tDCS sulla memoria è necessario selezionare compiti comportamentali adeguati. In effetti, la scelta del compito di memoria è uno degli aspetti cruciali del disegno dello studio, perché la capacità di rilevare l'effetto tDCS dipende direttamente dalla sensibilità del compito. La sfida qui è che la maggior parte degli strumenti di valutazione della memoria standardizzati o dei compiti neuropsicologici classici potrebbero non essere abbastanza sensibili da rilevare gli effetti della tDCS in popolazioni specifiche. Inoltre, la maggior parte dei compiti standardizzati non sono disponibili in due o più forme parallele e quindi non possono essere utilizzati in progetti all'interno dei soggetti. Per questo motivo, la maggior parte degli studi sulla memoria tDCS utilizza attività di compilazione personalizzate. Quando si progetta o si seleziona la misura del risultato, è necessario assicurarsi che il compito sia: (1) misura focale / selettiva della funzione di memoria di interesse; (2) sensibile (cioè che la scala sia abbastanza fine da rilevare anche piccoli cambiamenti); (3) sfida per i partecipanti (vale a dire, che la difficoltà del compito è sufficiente e quindi per evitare effetti di celling); (4) affidabile (cioè che l'errore di misurazione sia ridotto al minimo possibile). Pertanto, si dovrebbero usare forme empiricamente convalidate rigorosamente parallele di compiti di memoria, che hanno un numero sufficiente di prove - sia per garantire la sensibilità della misura che per massimizzarne l'affidabilità. Idealmente, i compiti dovrebbero essere pre-testati su un gruppo campionato dalla stessa popolazione dei partecipanti all'esperimento per garantire che le massime prestazioni non siano raggiungibili e che le forme di attività abbiano indici di difficoltà uguali. Infine, è meglio utilizzare attività computerizzate quando possibile in quanto consentono una durata controllata e una tempistica precisa. In questo modo i ricercatori possono garantire che tutti i partecipanti siano sottoposti a valutazione della memoria allo stesso tempo rispetto ai tempi della stimolazione (durante o dopo la tDCS). La durata di ogni attività o blocco di attività non deve essere superiore a 10 minuti, per evitare affaticamento e fluttuazioni dei livelli di attenzione; la valutazione cognitiva non dovrebbe essere superiore a 90 minuti in totale (compresi i compiti sia durante che dopo la tDCS).